| 致谢 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩写词表 | 第7-10页 |
| 1 绪论 | 第10-25页 |
| ·G蛋白偶联受体功能筛选模型的研究进展 | 第10-16页 |
| ·G蛋白偶联受体的结构与分类 | 第10-12页 |
| ·G蛋白偶联受体的信号途径 | 第12-13页 |
| ·G蛋白偶联受体的功能检测 | 第13-16页 |
| ·基于报告基因系统的cAMP及Ca~(2+)检测原理 | 第16-22页 |
| ·cAMP效应元件 | 第17-18页 |
| ·NFAT效应元件 | 第18-19页 |
| ·报告基因选择 | 第19-20页 |
| ·报告基因检测系统的应用和局限性 | 第20-21页 |
| ·总结 | 第21-22页 |
| 参考文献 | 第22-25页 |
| 2 前言 | 第25-28页 |
| 3 实验材料及方法 | 第28-35页 |
| ·实验材料 | 第28-30页 |
| ·DNA | 第28页 |
| ·细胞株 | 第28页 |
| ·试剂 | 第28页 |
| ·培养基及缓冲液 | 第28-29页 |
| ·试剂盒 | 第29页 |
| ·主要仪器及设备 | 第29页 |
| ·所用数据库及数据分析软件 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-35页 |
| ·PCR扩增各片段 | 第30-31页 |
| ·目的片段与T载体的载体构建 | 第31-33页 |
| ·表达载体的构建 | 第33页 |
| ·报告基因系统功能检测 | 第33-35页 |
| 4 胞内cAMP、Ca~(2+)检测系统构建与完善 | 第35-45页 |
| ·质粒构造 | 第35-36页 |
| ·表达载体构建结果及分析 | 第36-37页 |
| ·各片段基因克隆结果 | 第36-37页 |
| ·表达载体构建 | 第37页 |
| ·单报告基因系统检测效果鉴定 | 第37-42页 |
| ·pGL3-CVRS系统检测胞内cAMP | 第38-39页 |
| ·pGL3-INFS检测胞内Ca~(2+) | 第39-42页 |
| ·讨论 | 第42-45页 |
| 5 同时检测胞内cAMP、Ca~(2+)信号的双报告基因检测系统建立 | 第45-57页 |
| ·质粒构造 | 第46-47页 |
| ·实验结果 | 第47-54页 |
| ·双报告基因检测系统构建与完善 | 第47-50页 |
| ·双报告基因检测系统检测效果鉴定 | 第50-52页 |
| ·双报告基因检测系统与经典检测方法比较 | 第52-54页 |
| ·讨论 | 第54-57页 |
| 6 利用双报告基因检测系统研究G蛋白偶联受体 | 第57-66页 |
| ·实验结果 | 第59-63页 |
| ·抑制剂对G蛋白偶联受体cAMP、Ca~(2+)信号通路的影响 | 第59-61页 |
| ·共表达两个不同受体时的cAMP和Ca~(2+)信号检测 | 第61-63页 |
| ·讨论 | 第63-66页 |
| 7 总结 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-71页 |
| 附录一 基因序列 | 第71-74页 |
| 附录二 质粒图谱 | 第74-75页 |
| 作者简历 | 第75页 |
