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制备具有生物相容性和机械强度的半月板组织工程支架的实验研究

中文摘要第1-16页
英文摘要第16-22页
前言第22-26页
第一部分 静电纺丝技术制备有机械强度和细胞相容性的双层纳米纤维结构半月板组织工程支架第26-44页
 前言第26-27页
 材料和方法第27-32页
  1. 实验材料第27-28页
   ·主要试剂第27-28页
   ·主要仪器及设备第28页
  2. 方法第28-32页
   ·静电纺丝溶液的配制第28-29页
   ·静电纺丝制备三维纤维支架第29页
   ·扫描电子显微镜(SEM)观察第29-30页
   ·支架的孔隙率第30-31页
   ·支架水接触角的测量第31页
   ·支架降解率第31页
   ·支架的杨氏模量测定第31-32页
   ·数据统计学分析第32页
 结果第32-36页
  1. 静电纺丝制备支架的外观第32页
  2. 支架的表征及特性第32-36页
 讨论第36-39页
 结论第39-40页
 参考文献第40-44页
第二部分 骨髓间充质干细胞诱导分化的半月板细胞种植支架联合培养第44-68页
 前言第44页
 材料和方法第44-52页
  1. 实验材料第44-46页
   ·实验动物第44页
   ·主要试剂第44-45页
   ·主要设备及仪器第45-46页
  2. 方法第46-52页
   ·主要试剂的配制第46页
   ·骨髓间充质干细胞(BMSCs)的提取(密度梯度离心法)第46-47页
   ·骨髓间充质干细胞传代培养第47页
   ·骨髓间充质干细胞的诱导分化第47-48页
   ·诱导分化的骨髓间充质干细胞爬片第48页
   ·诱导分化的骨髓间充质干细胞表征观察第48-50页
   ·体外构建诱导分化的骨髓间充质干细胞-支架复合体第50-51页
   ·检测诱导分化的骨髓间充质干细胞-支架复合体第51-52页
   ·数据统计学分析第52页
 结果第52-59页
  1.骨髓间充质干细胞的提取及培养第52-53页
   ·提取骨髓间充质干细胞的实物图所见第52-53页
   ·骨髓间充质干细胞的培养及形态观察第53页
  2.经诱导分化培养细胞的表征及生物行为第53-56页
  3.经诱导分化细胞种植于支架第56-59页
   ·细胞在支架上生长的电镜照片第56-57页
   ·细胞-支架复合体甲苯胺蓝染色第57-58页
   ·细胞在支架上的示踪第58页
   ·诱导分化的骨髓间充质干细胞在支架上的增殖第58-59页
 讨论第59-64页
 结论第64-65页
 参考文献第65-68页
第三部分 制备具有生物相容性和机械强度的Gelatin/PLA/ P(3HB-co-4HB)三维组织工程支架第68-91页
 前言第68-69页
 材料和方法第69-75页
  1. 实验材料第69-70页
   ·实验动物第69页
   ·主要试剂第69页
   ·主要设备及仪器第69-70页
  2. 方法第70-75页
   ·梯度热致相分离结合溶剂萃取技术制备PLA/P (3HB- co- 4 H B ) 取向复合支架第70-71页
   ·物理涂层(或吸附)法以明胶修饰支架表面第71页
   ·支架的大体观第71页
   ·支架在体视显微镜下观察第71页
   ·扫描电子显微镜( SE M )观察支架第71页
   ·支架的孔隙率第71页
   ·支架水接触角的测量第71-72页
   ·支架体外降解率第72页
   ·支架的机械力学性能第72页
   ·经诱导分化的骨髓间充质干细胞种植支架联合培养第72-75页
   ·拉伸强度对比第75页
   ·细胞增殖对比第75页
   ·实验数据的处理及分析第75页
 结果第75-85页
  1. PLA/P (3HB-co-4HB) 和Gelatin/PLA/P (3HB-co-4HB) 支架的表征第75-78页
   ·两种支架大体形貌观察及对比第75页
   ·支架的体视显微镜观察第75页
   ·两种支架电镜下形貌观察及对比第75-78页
  2. 支架接触角的测量结果对比第78页
  3. 两组支架体外降解率的比较第78-79页
  4. 两组支架压缩模量的比较第79页
  5. 细胞在两组支架上的增殖分析第79页
  6. 细胞-支架复合体的切片染色观察第79-81页
  7. 细胞-支架复合体共培养的电镜观察第81-82页
  8. 细胞-支架复合体共培养的共聚焦显微镜观察第82页
  9. 拉伸强度比较第82页
  10. 增殖率比较第82-85页
 讨论第85-88页
 结论第88-89页
 参考文献第89-91页
第四部分Gelatin/PLA/P(3HB-co-4HB)支架负载诱导分化的干细胞植入裸鼠体内构建纤维软骨的实验研究第91-103页
 前言第91页
 材料和方法第91-95页
  1. 实验材料第91-92页
   ·实验动物第91页
   ·主要试剂第91页
   ·主要设备及仪器第91-92页
  2. 方法第92-95页
   ·支架生物安全性评估第92-94页
   ·细胞--支架复合体在多功能活体成像系统下观察第94页
   ·无细胞支架和细胞--支架复合体植入裸鼠背部皮下第94页
   ·植入支架的裸鼠一般情况观察第94-95页
   ·植入支架裸鼠在多功能活体成像系统下观察第95页
   ·构建纤维软骨的观察评估第95页
 结果第95-99页
  1. 支架安全性评估第95页
   ·全身急性毒性试验第95页
   ·皮内刺激实验第95页
  2. 体外无细胞支架与细胞--支架复合体在多功能活体成像系统下观察第95-96页
  3. 支架植入裸鼠背部的大体观察第96页
  4. 植入支架的裸鼠一般情况观察第96-97页
  5. 支架植入裸鼠背部多功能活体成像系统下观察第97页
  6. 构建纤维软骨的观察评估第97-99页
   ·大体观察第97-98页
   ·无细胞支架与细胞 - -支架复合体组织学及免疫组化观察第98-99页
 讨论第99-101页
 结论第101-102页
 参考文献第102-103页
综述第103-122页
 参考文献第114-122页
攻读学位期间发表文章情况第122-123页
致谢第123-124页

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