中文摘要 | 第1-16页 |
英文摘要 | 第16-22页 |
前言 | 第22-26页 |
第一部分 静电纺丝技术制备有机械强度和细胞相容性的双层纳米纤维结构半月板组织工程支架 | 第26-44页 |
前言 | 第26-27页 |
材料和方法 | 第27-32页 |
1. 实验材料 | 第27-28页 |
·主要试剂 | 第27-28页 |
·主要仪器及设备 | 第28页 |
2. 方法 | 第28-32页 |
·静电纺丝溶液的配制 | 第28-29页 |
·静电纺丝制备三维纤维支架 | 第29页 |
·扫描电子显微镜(SEM)观察 | 第29-30页 |
·支架的孔隙率 | 第30-31页 |
·支架水接触角的测量 | 第31页 |
·支架降解率 | 第31页 |
·支架的杨氏模量测定 | 第31-32页 |
·数据统计学分析 | 第32页 |
结果 | 第32-36页 |
1. 静电纺丝制备支架的外观 | 第32页 |
2. 支架的表征及特性 | 第32-36页 |
讨论 | 第36-39页 |
结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-44页 |
第二部分 骨髓间充质干细胞诱导分化的半月板细胞种植支架联合培养 | 第44-68页 |
前言 | 第44页 |
材料和方法 | 第44-52页 |
1. 实验材料 | 第44-46页 |
·实验动物 | 第44页 |
·主要试剂 | 第44-45页 |
·主要设备及仪器 | 第45-46页 |
2. 方法 | 第46-52页 |
·主要试剂的配制 | 第46页 |
·骨髓间充质干细胞(BMSCs)的提取(密度梯度离心法) | 第46-47页 |
·骨髓间充质干细胞传代培养 | 第47页 |
·骨髓间充质干细胞的诱导分化 | 第47-48页 |
·诱导分化的骨髓间充质干细胞爬片 | 第48页 |
·诱导分化的骨髓间充质干细胞表征观察 | 第48-50页 |
·体外构建诱导分化的骨髓间充质干细胞-支架复合体 | 第50-51页 |
·检测诱导分化的骨髓间充质干细胞-支架复合体 | 第51-52页 |
·数据统计学分析 | 第52页 |
结果 | 第52-59页 |
1.骨髓间充质干细胞的提取及培养 | 第52-53页 |
·提取骨髓间充质干细胞的实物图所见 | 第52-53页 |
·骨髓间充质干细胞的培养及形态观察 | 第53页 |
2.经诱导分化培养细胞的表征及生物行为 | 第53-56页 |
3.经诱导分化细胞种植于支架 | 第56-59页 |
·细胞在支架上生长的电镜照片 | 第56-57页 |
·细胞-支架复合体甲苯胺蓝染色 | 第57-58页 |
·细胞在支架上的示踪 | 第58页 |
·诱导分化的骨髓间充质干细胞在支架上的增殖 | 第58-59页 |
讨论 | 第59-64页 |
结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-68页 |
第三部分 制备具有生物相容性和机械强度的Gelatin/PLA/ P(3HB-co-4HB)三维组织工程支架 | 第68-91页 |
前言 | 第68-69页 |
材料和方法 | 第69-75页 |
1. 实验材料 | 第69-70页 |
·实验动物 | 第69页 |
·主要试剂 | 第69页 |
·主要设备及仪器 | 第69-70页 |
2. 方法 | 第70-75页 |
·梯度热致相分离结合溶剂萃取技术制备PLA/P (3HB- co- 4 H B ) 取向复合支架 | 第70-71页 |
·物理涂层(或吸附)法以明胶修饰支架表面 | 第71页 |
·支架的大体观 | 第71页 |
·支架在体视显微镜下观察 | 第71页 |
·扫描电子显微镜( SE M )观察支架 | 第71页 |
·支架的孔隙率 | 第71页 |
·支架水接触角的测量 | 第71-72页 |
·支架体外降解率 | 第72页 |
·支架的机械力学性能 | 第72页 |
·经诱导分化的骨髓间充质干细胞种植支架联合培养 | 第72-75页 |
·拉伸强度对比 | 第75页 |
·细胞增殖对比 | 第75页 |
·实验数据的处理及分析 | 第75页 |
结果 | 第75-85页 |
1. PLA/P (3HB-co-4HB) 和Gelatin/PLA/P (3HB-co-4HB) 支架的表征 | 第75-78页 |
·两种支架大体形貌观察及对比 | 第75页 |
·支架的体视显微镜观察 | 第75页 |
·两种支架电镜下形貌观察及对比 | 第75-78页 |
2. 支架接触角的测量结果对比 | 第78页 |
3. 两组支架体外降解率的比较 | 第78-79页 |
4. 两组支架压缩模量的比较 | 第79页 |
5. 细胞在两组支架上的增殖分析 | 第79页 |
6. 细胞-支架复合体的切片染色观察 | 第79-81页 |
7. 细胞-支架复合体共培养的电镜观察 | 第81-82页 |
8. 细胞-支架复合体共培养的共聚焦显微镜观察 | 第82页 |
9. 拉伸强度比较 | 第82页 |
10. 增殖率比较 | 第82-85页 |
讨论 | 第85-88页 |
结论 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-91页 |
第四部分Gelatin/PLA/P(3HB-co-4HB)支架负载诱导分化的干细胞植入裸鼠体内构建纤维软骨的实验研究 | 第91-103页 |
前言 | 第91页 |
材料和方法 | 第91-95页 |
1. 实验材料 | 第91-92页 |
·实验动物 | 第91页 |
·主要试剂 | 第91页 |
·主要设备及仪器 | 第91-92页 |
2. 方法 | 第92-95页 |
·支架生物安全性评估 | 第92-94页 |
·细胞--支架复合体在多功能活体成像系统下观察 | 第94页 |
·无细胞支架和细胞--支架复合体植入裸鼠背部皮下 | 第94页 |
·植入支架的裸鼠一般情况观察 | 第94-95页 |
·植入支架裸鼠在多功能活体成像系统下观察 | 第95页 |
·构建纤维软骨的观察评估 | 第95页 |
结果 | 第95-99页 |
1. 支架安全性评估 | 第95页 |
·全身急性毒性试验 | 第95页 |
·皮内刺激实验 | 第95页 |
2. 体外无细胞支架与细胞--支架复合体在多功能活体成像系统下观察 | 第95-96页 |
3. 支架植入裸鼠背部的大体观察 | 第96页 |
4. 植入支架的裸鼠一般情况观察 | 第96-97页 |
5. 支架植入裸鼠背部多功能活体成像系统下观察 | 第97页 |
6. 构建纤维软骨的观察评估 | 第97-99页 |
·大体观察 | 第97-98页 |
·无细胞支架与细胞 - -支架复合体组织学及免疫组化观察 | 第98-99页 |
讨论 | 第99-101页 |
结论 | 第101-102页 |
参考文献 | 第102-103页 |
综述 | 第103-122页 |
参考文献 | 第114-122页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第122-123页 |
致谢 | 第123-124页 |