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紫苏FAD3/FAD7基因种子特异性表达载体的构建及遗传转化研究

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-12页
1 引言第12-23页
   ·多不饱和脂肪酸及其功能第12-13页
   ·脂肪酸脱氢酶研究进展第13-15页
     ·脂肪酸脱氢酶的结构和分类第13-14页
     ·ω-3 脂肪酸脱氢酶研究进展第14-15页
   ·α-亚麻酸的植物资源和生理功能第15-16页
   ·紫苏第16-18页
     ·紫苏的生物学特性第16-17页
     ·紫苏的药用价值第17页
     ·紫苏籽脂肪酸组成分析研究第17-18页
   ·根癌农杆菌特性及介导的遗传转化研究第18-21页
     ·根癌农杆菌T i质粒的结构和功能第18-19页
     ·Ti质粒载体的改造和分类第19-20页
     ·根癌农杆菌转化植物的步骤第20页
     ·农癌农杆菌转化法的优势第20-21页
   ·研究目的与意义第21-22页
   ·技术路线第22-23页
2 试验材料与方法第23-40页
   ·试验材料第23-25页
     ·植物材料第23页
     ·载体和菌株第23页
     ·主要试剂与培养基第23-25页
     ·主要仪器设备第25页
   ·紫苏FAD3/FAD7基因的克隆第25-29页
     ·紫苏RNA的提取和逆转录第25-26页
     ·紫苏FAD3、FAD7基因的克隆第26-29页
   ·中间载体的构建第29-33页
     ·构建表达载体的EFAD3/EFAD7序列克隆第29页
     ·构建中间载体pUCm-T-EFAD3和pUCm-T-EFAD7第29-33页
   ·重组质粒导入根癌农杆菌第33-34页
     ·根癌农杆菌感受态细胞的制备第33页
     ·重组质粒转化农杆菌GV3101感受态细胞第33-34页
   ·根癌农杆菌介导的烟草遗传转化第34-38页
     ·工程菌液的制备第34页
     ·烟草遗传转化第34页
     ·转基因植株的筛选与鉴定第34-37页
     ·转基因烟草种子脂肪酸分析第37-38页
   ·根癌农杆菌介导的油菜遗传转化第38-40页
     ·无菌苗的获得第38页
     ·工程菌株的培养第38页
     ·转基因油菜苗的获得第38页
     ·转基因油菜的筛选与鉴定第38-40页
3 结果与分析第40-50页
   ·种子特异性表达载体的构建第40-44页
     ·中间载体的构建第40-41页
     ·紫苏FAD3/FAD7基因种子特异性表达载体的构建第41-44页
   ·根癌农杆菌介导的烟草遗传转化第44-47页
     ·转基因烟草的获得第44页
     ·转基因烟草的分子鉴定第44-45页
     ·转基因烟草qRT-PCR检测第45-46页
     ·转基因烟草脂肪酸分析第46-47页
   ·根癌农杆菌介导的油菜遗传转化第47-50页
     ·转基因油菜的获得第47-48页
     ·转基因油菜的分子鉴定第48页
     ·转基因油菜的qRT-PCR检测第48-50页
4 讨论第50-53页
   ·种子特异性表达载体的构建第50-51页
   ·烟草的遗传转化研究第51页
   ·油菜的遗传转化研究第51-53页
5 结论第53-55页
   ·取得的研究结果第53页
   ·存在的不足和下一步打算第53-55页
参考文献第55-60页
附录A:攻读硕士学位期间发表论文及科研情况第60-61页
附录B:pC2301M1DPB质粒图第61-62页
附录C:紫苏FAD3/FAD7基因序列第62-64页
致谢第64页

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