摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一章 文献综述及研究目的与意义 | 第11-19页 |
1 文献综述 | 第11-18页 |
·IBDV概述 | 第11-12页 |
·IBDV的特性 | 第12-16页 |
·形态结构特征 | 第12页 |
·IBDV的毒株分类 | 第12页 |
·基因组结构 | 第12-14页 |
·编码蛋白及其功能 | 第14-16页 |
·IBDV超强毒株与弱毒株的区别 | 第16页 |
·临床症状 | 第16-17页 |
·病理变化 | 第17页 |
·IBDV的检测 | 第17页 |
·IBDV的防控 | 第17-18页 |
2 本研究的目的与意义 | 第18-19页 |
第二章 IBDV-DDK病毒株全基因组的测定及其序列分析 | 第19-45页 |
1 实验材料 | 第19-20页 |
·IBDV毒株与鸡胚 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19-20页 |
·主要仪器 | 第20页 |
2 实验方法 | 第20-30页 |
·引物的设计与合成 | 第20-21页 |
·IBDV全基因组序列的分段克隆 | 第21-28页 |
·病毒的预处理 | 第21页 |
·IBDV的增殖培养 | 第21-22页 |
·组织/细胞总RNA的提取 | 第22-23页 |
·反转录 | 第23页 |
·PCR反应 | 第23-24页 |
·胶回收纯化 | 第24-25页 |
·连接反应 | 第25页 |
·感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第25-26页 |
·感受态细胞转化 | 第26页 |
·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第26-27页 |
·重组质粒的提取与鉴定 | 第27-28页 |
·测序及序列拼接 | 第28页 |
·全基因组序列的分析 | 第28-30页 |
3 结果与分析 | 第30-42页 |
·IBDV全基因组分段RT-PCR结果 | 第30页 |
·酶切验证 | 第30-31页 |
·全基因组序列测定结果 | 第31页 |
·IBDV-DDK病毒株核苷酸序列同源性分析 | 第31-36页 |
·IBDV-DDK病毒株基因组核苷酸序列遗传演化分析 | 第36-40页 |
·A节段核苷酸遗传演化分析 | 第36页 |
·B节段核苷酸遗传演化分析 | 第36-37页 |
·各编码蛋白核苷酸序列遗传演化分析 | 第37-40页 |
·IBDV-DDK病毒株特征氨基酸位点的比较分析 | 第40-42页 |
4 讨论 | 第42-45页 |
第三章 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-52页 |
附录 | 第52-57页 |
1 常用英文缩写词表 | 第52-53页 |
2 氨基酸缩写表 | 第53-54页 |
3 pGEM(?)-T Easy载体图谱 | 第54-55页 |
4 常规试剂的配制方法 | 第55-57页 |
致谢 | 第57页 |