| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 缩略语 | 第10-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-43页 |
| ·胚胎干细胞概述 | 第12-20页 |
| ·ESCs的分子标记 | 第13-16页 |
| ·ESCs的分化潜能 | 第16-18页 |
| ·ESCs的应用潜能 | 第18页 |
| ·ESCs应用存在的问题 | 第18-20页 |
| ·体细胞重编程概述 | 第20-25页 |
| ·细胞核移植 | 第21-22页 |
| ·细胞融合 | 第22-23页 |
| ·诱导多能性干细胞 | 第23-25页 |
| ·诱导多能性干细胞研究进展 | 第25-36页 |
| ·获得iPSCs常用的转录因子组合 | 第26页 |
| ·重编程因子导入细胞的方法 | 第26-30页 |
| ·提高iPSCs的诱导效率及质量 | 第30-35页 |
| ·iPSCs存在的问题 | 第35-36页 |
| ·Rab32研究进展 | 第36-42页 |
| ·Rab32表达模式 | 第36页 |
| ·Rab32在线粒体上的功能 | 第36页 |
| ·Rab32调控自噬过程 | 第36-38页 |
| ·Rab32调控脂类代谢 | 第38页 |
| ·Rab32参与黑色素体形成 | 第38-40页 |
| ·Rab32在发育过程的作用 | 第40页 |
| ·Rab32在疾病方面的作用 | 第40-41页 |
| ·Rab32调控模式 | 第41-42页 |
| ·研究目的及意义 | 第42-43页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第43-68页 |
| ·实验材料与设备 | 第43-46页 |
| ·实验动物 | 第43页 |
| ·仪器设备 | 第43-45页 |
| ·质粒、细胞、菌株 | 第45-46页 |
| ·试剂配制 | 第46-50页 |
| ·试剂 | 第46-48页 |
| ·溶液配方 | 第48-50页 |
| ·实验方法 | 第50-67页 |
| ·细胞RNA的提取 | 第50页 |
| ·反转录cDNA | 第50-51页 |
| ·逆转录病毒载体的构建 | 第51-54页 |
| ·shRNA表达载体的构建 | 第54-55页 |
| ·过表达与沉默效率检测 | 第55页 |
| ·MEFs制备与培养 | 第55-56页 |
| ·饲养层细胞制备 | 第56页 |
| ·病毒组装与感染 | 第56-58页 |
| ·iPSCs诱导体系的建立 | 第58页 |
| ·重编程效率检测 | 第58-59页 |
| ·iPSCs细胞系的建立和维持 | 第59页 |
| ·重编程的基因表达分析 | 第59-60页 |
| ·iPSCs干细胞标记检测 | 第60页 |
| ·iPSCs分化能力鉴定 | 第60-61页 |
| ·iPSCs核型分析 | 第61页 |
| ·嵌合体小鼠实验及四倍体囊胚互补实验 | 第61-64页 |
| ·OPERETTA高内涵仪器检测细胞内细胞器的变化 | 第64-65页 |
| ·用Fluidigm的BioMark HD仪器上检测基因表达情况 | 第65-67页 |
| ·数据分析 | 第67-68页 |
| 第三章 实验结果 | 第68-100页 |
| ·不同质量iPSCs与ESCs之间基因表达情况 | 第68-69页 |
| ·过表达载体构建及验证 | 第69-71页 |
| ·Rab32可以提高重编程效率 | 第71-77页 |
| ·重编程候选基因筛选方案 | 第71-72页 |
| ·筛选结果 | 第72-73页 |
| ·Rab32促进TF4细胞形成iPSCs的效率 | 第73-75页 |
| ·成纤维细胞重编程全程观测 | 第75-77页 |
| ·OSKR iPSCs具有多能性 | 第77-82页 |
| ·Rab32调控MEFs细胞中自噬体及脂滴的形成 | 第82-85页 |
| ·Rab32在重编程过程中的作用机制 | 第85-97页 |
| ·重编程过程中脂滴及相应基因的变化情况 | 第85-89页 |
| ·重编程过程中自噬体及相应基因的变化情况 | 第89-92页 |
| ·重编程过程中自噬及脂肪酸合成的作用 | 第92-95页 |
| ·重编程过程中多能性基因的变化情况 | 第95-97页 |
| ·讨论 | 第97-100页 |
| 第四章 结论 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-113页 |
| 附录 | 第113-132页 |
| 致谢 | 第132-134页 |
| 作者简介 | 第134页 |