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钾转运体KUP7参与拟南芥响应低钾胁迫的功能研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-10页
英文缩写第10-13页
第一章 引言第13-45页
   ·植物中钾的含量及功能第13-19页
     ·植物中钾的含量及其分布第13-14页
     ·钾在植物生长发育中的重要功能第14-16页
     ·土壤中的钾及植物缺钾后的典型症状第16-19页
   ·植物钾营养吸收利用的分子机制第19-20页
   ·植物中钾通道和钾转运体的研究进展第20-30页
     ·植物中钾通道的研究进展第20-26页
     ·植物中钾转运体的研究进展第26-30页
   ·植物中钾离子吸收与转运机制的研究进展第30-32页
     ·植物根系钾离子吸收的研究进展第31-32页
     ·植物体内钾离子转运的研究进展第32页
   ·植物中钾通道和钾转运体的调控机制第32-37页
     ·植物中钾通道和钾转运体转录水平的调控机制第32-34页
     ·植物中钾通道和钾转运体翻译后水平的调控机制第34-37页
   ·环境因子对植物钾营养的影响第37-38页
   ·植物对低钾胁迫的响应第38-42页
     ·植物感受低钾胁迫的信号转导过程第39-40页
     ·植物对低钾胁迫的适应性反应第40-42页
   ·植物中蛋白激酶CIPK的研究进展第42-43页
     ·植物中蛋白激酶CIPK的结构及其亚细胞定位特点第42-43页
     ·植物中蛋白激酶CIPK的生理功能第43页
   ·本研究工作的立题依据和意义第43-45页
第二章 实验材料及实验方法第45-81页
   ·实验材料第45-47页
     ·植物材料第45页
     ·常用菌株第45页
     ·克隆载体第45-46页
     ·酶、试剂盒以及各种化学药品第46-47页
   ·实验常用主要溶液和培养基的配制第47-49页
     ·常用主要溶液的配制第47-48页
     ·常用主要培养基的配制第48-49页
   ·实验仪器第49-50页
   ·研究涉及的实验方法第50-78页
     ·植物材料的培养第50-51页
     ·目的基因T-DNA插入突变体DNA水平的纯合鉴定第51-53页
     ·目的基因转录水平的表达检测第53-57页
     ·目的基因的克隆与构建第57-62页
     ·拟南芥转基因植物材料的构建与鉴定第62-65页
     ·Promoter:GUS转基因植物材料的GUS染色反应第65-66页
     ·植物材料钾离子含量及生物量的测定第66-67页
     ·钾离子荧光染料标记实验分析植物材料不同组织中的钾离子含量第67-68页
     ·植株木质部伤流液中钾离子含量的测定第68页
     ·植物钾营养耗竭实验第68-69页
     ·酵母双杂交实验分析不同蛋白之间的相互作用第69-73页
     ·钾营养缺陷型酵母钾离子吸收互补实验第73-75页
     ·农杆菌介导的烟草表皮细胞的瞬时转化第75-76页
     ·基因的定点突变第76-78页
   ·实验中所用到的引物序列第78-81页
     ·T-DNA插入突变体材料鉴定所需引物第78-79页
     ·转基因植物材料构建所需引物第79页
     ·酵母钾吸收互补实验所需引物第79页
     ·蛋白互作载体构建所需引物第79-80页
     ·基因定点突变载体构建所需引物第80-81页
第三章 实验结果与分析第81-116页
 引言第81页
   ·KUP7 T-DNA插入突变体的获得及其低钾表型的检测第81-85页
     ·KUP7 T-DNA插入突变体的获得与鉴定第81-82页
     ·kup7突变体的低钾表型检测第82-83页
     ·kup7突变体叶绿素含量及钾离子含量的测定第83-84页
     ·不同NH_4~+浓度和K~+浓度处理下kup7表型的检测第84-85页
   ·kup7/KUP7恢复材料的低钾表型检测第85-90页
     ·kup7/KUP7恢复材料的构建与鉴定第85-86页
     ·kup7/KUP7恢复材料的低钾表型检测第86页
     ·kup7/KUP7恢复材料叶绿素含量及钾离子含量的测定第86-87页
     ·KUP7过表达材料的构建及其低钾表型的检测第87-90页
   ·KUP7钾离子转运功能的检测第90-92页
     ·KUP7酵母钾吸收互补功能的检测第90-92页
     ·高NH_4~+对KUP7钾离子转运活性的影响第92页
   ·KUP7蛋白亚细胞定位检测第92-93页
   ·KUP7的组织表达分布检测第93-100页
     ·Genevestigator和eFP Browser分析KUP7在拟南芥各组织的表达分布第93-98页
     ·利用ProKUP7:GUS转基因植物检测KUP7的表达分布第98-100页
   ·KUP7的突变影响拟南芥根部钾离子的吸收第100-102页
     ·植株钾总量及生物量分析第100-101页
     ·植株钾离子吸收速率检测第101-102页
   ·KUP7的突变影响植株体内钾离子由根向冠的转运第102-110页
     ·植株体内钾离子冠/根比检测第102-103页
     ·木质部伤流液中钾离子含量的测定第103-105页
     ·KUP7的突变影响根部钾离子向中柱组织的装载第105-107页
     ·KUP7过量表达对植物体内钾离子由根向冠转运的影响第107-110页
   ·低钾诱导KUP7转录水平表达变化的检测第110-111页
   ·KUP7蛋白序列中可能磷酸化位点的检测第111-116页
     ·KUP7蛋白跨膜结构的预测分析第112-113页
     ·磷酸化位点对KUP7钾转运活性的影响第113-114页
     ·kup7/KUP7不同点突变恢复材料的低钾表型检测第114-116页
第四章 结论第116-117页
第五章 讨论与展望第117-123页
   ·拟南芥根部钾离子的吸收与转运机制第117-118页
   ·KUP7能够调节低钾下植物根部钾离子的吸收和转运第118页
   ·KUP7生理功能受翻译后水平的调控第118-121页
     ·KUP7对低钾胁迫的响应第118-119页
     ·酵母双杂交实验检测KUP7与CIPKs的互作第119页
     ·烟草BIFC实验检测KUP7与CIPKs的互作第119-120页
     ·CIPK11相关材料的低钾表型检测第120-121页
   ·展望第121-123页
参考文献第123-147页
致谢第147-148页
个人简历第148页

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