| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10页 |
| ·非编码RNAs的种类 | 第10-20页 |
| ·非编码RNAs的作用机制 | 第11-12页 |
| ·sncRNAs的作用机制 | 第11页 |
| ·lncRNAs的作用机制 | 第11-12页 |
| ·miRNA的生物合成 | 第12-13页 |
| ·动物中miRNA的生物合成途径 | 第12-13页 |
| ·植物中miRNA的生物合成途径 | 第13页 |
| ·miRNA功能及作用机制 | 第13-14页 |
| ·miRNA的降解 | 第14-15页 |
| ·植物中miRNA的降解 | 第14-15页 |
| ·动物中miRNA的降解 | 第15页 |
| ·mRNA的降解 | 第15-19页 |
| ·P-bodies对mRNA的降解 | 第16页 |
| ·外切体对mRNA的降解 | 第16-19页 |
| ·外切体的结构 | 第16-17页 |
| ·外切体降解RNA的作用机制 | 第17-19页 |
| ·本论文的主要工作 | 第19-20页 |
| 第2章 材料和方法 | 第20-29页 |
| ·实验材料 | 第20-22页 |
| ·植物材料及生长条件 | 第20页 |
| ·菌株和质粒 | 第20页 |
| ·实验所用引物和寡聚核苷酸序列 | 第20-21页 |
| ·主要化学试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-25页 |
| ·质粒的构建 | 第22-25页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第22-23页 |
| ·SDN2、SDN5、SOV基因的扩增 | 第23页 |
| ·PCR产物回收 | 第23-24页 |
| ·质粒的提取（碱裂解法） | 第24-25页 |
| ·蛋白表达及纯化 | 第25-26页 |
| ·GST-SOV、GST-SDN2 和GST-SDN5 蛋白的诱导表达 | 第25页 |
| ·GST-SOV、GST-SDN2 和GST-SDN5 蛋白纯化 | 第25-26页 |
| ·酶活性分析 | 第26-29页 |
| ·酶活反应体系 | 第26-27页 |
| ·Urea-PAGE凝胶电泳 | 第27页 |
| ·转膜 | 第27-28页 |
| ·EDC交联 | 第28页 |
| ·化学发光法生物素标记核酸检测（碧云天公司提供的试剂说明书） | 第28-29页 |
| 第3章 实验结果与分析 | 第29-46页 |
| ·拟南芥小RNA核酸外切酶基因的筛选 | 第29-30页 |
| ·小RNA核酸外切酶表达载体的构建 | 第30-34页 |
| ·SDN2 基因扩增 | 第30页 |
| ·SDN5 基因的扩增 | 第30-31页 |
| ·SOV基因的扩增 | 第31-32页 |
| ·SDN2、SDN5 和SOV重组质粒菌液PCR鉴定 | 第32-34页 |
| ·SDN2、SDN5 和SOV蛋白的纯化 | 第34-41页 |
| ·GST-SDN2 重组蛋白诱导表达 | 第34-35页 |
| ·GST-SDN5 重组蛋白诱导表达 | 第35-36页 |
| ·GST-SOV重组蛋白诱导表达 | 第36-37页 |
| ·GST蛋白纯化 | 第37-38页 |
| ·GST-SDN2 重组蛋白纯化 | 第38-39页 |
| ·GST-SDN5 重组蛋白纯化 | 第39-40页 |
| ·GST-SOV重组蛋白纯化 | 第40-41页 |
| ·GST-SDN2、GST-SDN5 和GST-SOV酶活分析 | 第41-45页 |
| ·GST-SDN2 与miRNA173 酶活检测 | 第41-42页 |
| ·GST-SDN2 与miRNA173+7U酶活检测 | 第42-43页 |
| ·GST-SDN5 与miRNA173 酶活检测 | 第43-44页 |
| ·GST-SDN5 与miRNA173+7U酶活检测 | 第44-45页 |
| ·GST-SOV与miRNA173 的酶活力检测 | 第45-46页 |
| 第4章 讨论 | 第46-48页 |
| 第5章 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第58-59页 |
