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苏云金芽胞杆菌新型cry1基因克隆、表达及活性分析

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
1. 引言第12-35页
   ·苏云金芽胞杆菌第12页
   ·杀虫晶体蛋白及其作用机理第12-16页
     ·杀虫晶体蛋白第12-14页
     ·杀虫晶体蛋白作用机制第14-15页
     ·杀虫晶体蛋白生物活性第15-16页
   ·杀虫蛋白的应用和害虫的抗性问题第16-20页
     ·杀虫蛋白的应用第16-18页
     ·害虫的抗性问题第18-20页
   ·苏云金芽胞杆菌cry 基因的分类和鉴定第20-32页
     ·cry 基因的分类第20-29页
     ·cry 基因的鉴定第29-32页
   ·Cry1 类杀虫蛋白的研究现状第32-34页
   ·本研究的立题依据和目的意义第34-35页
2. 材料与方法第35-47页
   ·实验材料第35-39页
     ·菌株与质粒第35-36页
     ·试剂第36-38页
     ·供试昆虫第38页
     ·仪器设备第38-39页
   ·研究方法第39-47页
     ·晶体形态观察第39页
     ·Bt 大质粒的提取第39页
     ·PCR 摸板的制备第39-40页
     ·PCR - RFLP 鉴定cry1 基因型第40-41页
     ·DNA 回收第41页
     ·连接反应第41页
     ·E. coli 感受态细胞制备第41-42页
     ·大肠杆菌转化第42页
     ·E. coli 质粒 DNA 提取第42页
     ·酶切体系第42页
     ·cry1 类全长基因的扩增、克隆及序列测定第42-44页
     ·新基因在大肠杆菌中表达研究第44-45页
     ·蛋白电泳检测第45页
     ·杀虫活性测定第45-47页
3. 结果与分析第47-73页
   ·cry1 类基因 PCR – RFLP 鉴定体系的优化第47-56页
     ·原有鉴定体系鉴定3 株 Bt 野生型菌株第47-48页
     ·新鉴定引物设计第48-53页
     ·优化后体系鉴定3 株Bt 野生型菌株第53-56页
   ·应用优化后体系筛选cry1 类基因第56-60页
     ·72 株标准菌株cry1 类基因的鉴定第56-57页
     ·Bt 分离株cry1 类基因的鉴定第57-60页
   ·北京植物园Bt 菌株的分离鉴定第60-63页
     ·晶体扫描电镜图第60-61页
     ·菌株大质粒图谱分析第61页
     ·菌株蛋白图谱第61-62页
     ·菌株cry 基因型鉴定第62页
     ·菌株生物活性测定第62-63页
   ·cry1 类新基因全长的克隆及序列分析第63-67页
     ·PCR - RFLP 检测出的cry1 类基因的全长克隆及序列分析第63-64页
     ·T03B001 菌株中cry1 类新基因的全长克隆及序列分析第64-65页
     ·新型cry1 类基因的比较分析第65-67页
   ·cry1 类新基因异源表达第67-69页
     ·cry1 类新基因异源表达载体的构建第67-68页
     ·cry1 类新基因在大肠杆菌异源表达第68-69页
   ·Cry1 类新蛋白杀虫活性的研究第69-73页
4. 讨论第73-75页
5. 结论第75-76页
致谢第76-78页
参考文献第78-86页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第86页

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