摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1. 引言 | 第12-35页 |
·苏云金芽胞杆菌 | 第12页 |
·杀虫晶体蛋白及其作用机理 | 第12-16页 |
·杀虫晶体蛋白 | 第12-14页 |
·杀虫晶体蛋白作用机制 | 第14-15页 |
·杀虫晶体蛋白生物活性 | 第15-16页 |
·杀虫蛋白的应用和害虫的抗性问题 | 第16-20页 |
·杀虫蛋白的应用 | 第16-18页 |
·害虫的抗性问题 | 第18-20页 |
·苏云金芽胞杆菌cry 基因的分类和鉴定 | 第20-32页 |
·cry 基因的分类 | 第20-29页 |
·cry 基因的鉴定 | 第29-32页 |
·Cry1 类杀虫蛋白的研究现状 | 第32-34页 |
·本研究的立题依据和目的意义 | 第34-35页 |
2. 材料与方法 | 第35-47页 |
·实验材料 | 第35-39页 |
·菌株与质粒 | 第35-36页 |
·试剂 | 第36-38页 |
·供试昆虫 | 第38页 |
·仪器设备 | 第38-39页 |
·研究方法 | 第39-47页 |
·晶体形态观察 | 第39页 |
·Bt 大质粒的提取 | 第39页 |
·PCR 摸板的制备 | 第39-40页 |
·PCR - RFLP 鉴定cry1 基因型 | 第40-41页 |
·DNA 回收 | 第41页 |
·连接反应 | 第41页 |
·E. coli 感受态细胞制备 | 第41-42页 |
·大肠杆菌转化 | 第42页 |
·E. coli 质粒 DNA 提取 | 第42页 |
·酶切体系 | 第42页 |
·cry1 类全长基因的扩增、克隆及序列测定 | 第42-44页 |
·新基因在大肠杆菌中表达研究 | 第44-45页 |
·蛋白电泳检测 | 第45页 |
·杀虫活性测定 | 第45-47页 |
3. 结果与分析 | 第47-73页 |
·cry1 类基因 PCR – RFLP 鉴定体系的优化 | 第47-56页 |
·原有鉴定体系鉴定3 株 Bt 野生型菌株 | 第47-48页 |
·新鉴定引物设计 | 第48-53页 |
·优化后体系鉴定3 株Bt 野生型菌株 | 第53-56页 |
·应用优化后体系筛选cry1 类基因 | 第56-60页 |
·72 株标准菌株cry1 类基因的鉴定 | 第56-57页 |
·Bt 分离株cry1 类基因的鉴定 | 第57-60页 |
·北京植物园Bt 菌株的分离鉴定 | 第60-63页 |
·晶体扫描电镜图 | 第60-61页 |
·菌株大质粒图谱分析 | 第61页 |
·菌株蛋白图谱 | 第61-62页 |
·菌株cry 基因型鉴定 | 第62页 |
·菌株生物活性测定 | 第62-63页 |
·cry1 类新基因全长的克隆及序列分析 | 第63-67页 |
·PCR - RFLP 检测出的cry1 类基因的全长克隆及序列分析 | 第63-64页 |
·T03B001 菌株中cry1 类新基因的全长克隆及序列分析 | 第64-65页 |
·新型cry1 类基因的比较分析 | 第65-67页 |
·cry1 类新基因异源表达 | 第67-69页 |
·cry1 类新基因异源表达载体的构建 | 第67-68页 |
·cry1 类新基因在大肠杆菌异源表达 | 第68-69页 |
·Cry1 类新蛋白杀虫活性的研究 | 第69-73页 |
4. 讨论 | 第73-75页 |
5. 结论 | 第75-76页 |
致谢 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-86页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第86页 |