| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1 黄酮概述 | 第11-14页 |
| ·基本结构及分类 | 第11-12页 |
| ·生物学功能 | 第12-13页 |
| ·代谢途径 | 第13-14页 |
| 2 查尔酮合酶(Chalcone synthase,CHS) | 第14-18页 |
| ·查尔酮合酶蛋白结构及反应机理 | 第14-16页 |
| ·查尔酮合成酶基因结构 | 第16页 |
| ·查尔酮合成酶基因的进化 | 第16-17页 |
| ·查尔酮合成酶基因表达的调控 | 第17页 |
| ·查尔酮合成酶基因的转基因应用 | 第17-18页 |
| 3 大麦(青稞) | 第18-19页 |
| 4 实验目的与意义及研究内容 | 第19-21页 |
| 第二章 青稞查尔酮合酶基因的克隆 | 第21-35页 |
| 1. 材料与方法 | 第21-27页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·材料与菌株 | 第21页 |
| ·主要试剂与药品 | 第21页 |
| ·试剂的配置 | 第21-22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-27页 |
| ·总RNA的提取 | 第22-23页 |
| ·总RNA的纯度和浓度的检测 | 第23页 |
| ·第一链cDNA的制备 | 第23-24页 |
| ·PCR扩增 | 第24页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第24-25页 |
| ·目的片段回收 | 第25页 |
| ·连接与转化 | 第25-26页 |
| ·阳性克隆的筛选和鉴定 | 第26-27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-33页 |
| ·RNA完整性和纯度检测 | 第27页 |
| ·同源克隆 | 第27-28页 |
| ·PCR扩增产物 | 第27-28页 |
| ·生物信息学分析 | 第28-33页 |
| ·碱基序列分析 | 第28-29页 |
| ·氨基酸序列分析 | 第29-30页 |
| ·HvCHS蛋白一二级结构分析 | 第30-32页 |
| ·HvCHS蛋白三级结构分析 | 第32-33页 |
| 3 讨论 | 第33-35页 |
| ·RNA的提取 | 第33页 |
| ·青稞查尔酮合酶基因的同源克隆 | 第33-35页 |
| 第三章 青稞查尔酮合酶基因的原核表达 | 第35-46页 |
| 1 材料与方法 | 第35-41页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·质粒与菌株 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·试剂的配置 | 第35-36页 |
| ·实验仪器 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-41页 |
| ·CHS基因酶切引物设计 | 第36-37页 |
| ·PCR扩增 | 第37页 |
| ·PCR产物回收纯化 | 第37页 |
| ·CHS基因与T载体连接 | 第37页 |
| ·CHS基因转化与鉴定 | 第37页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第37-39页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第39-40页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第40-41页 |
| 2 结果 | 第41-43页 |
| ·双酶切 | 第41-42页 |
| ·青稞CHS基因的原核表达 | 第42-43页 |
| ·青稞CHS基因的原核表达条件的优化 | 第43页 |
| 3 讨论 | 第43-46页 |
| ·原核表达载体 | 第43-44页 |
| ·载体构建 | 第44-45页 |
| ·青稞HvCHS基因表达蛋白 | 第45-46页 |
| 第四章 结论与展望 | 第46-48页 |
| 1 结论 | 第46页 |
| 2 展望 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 致谢 | 第55-57页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第57页 |