摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-20页 |
1. 研究背景 | 第10页 |
2. 胎盘效率与母猪繁殖力 | 第10-11页 |
3. 与母猪繁殖能力相关的基因 | 第11页 |
4. PPARs家族的分布与功能 | 第11-14页 |
·PPARs的分布 | 第12页 |
·PPARs与卵巢功能的关系 | 第12-13页 |
·PPARs与胎盘发育的关系 | 第13-14页 |
·PPARγ与血管发生之间的关系 | 第14页 |
5. 荧光定量PCR | 第14-19页 |
·荧光定量PCR技术的原理与特点 | 第15页 |
·荧光标记的种类 | 第15-17页 |
·定量方法 | 第17-18页 |
·FQ-PCR的应用领域 | 第18-19页 |
6 研究目的与意义 | 第19-20页 |
第二章 荧光定量PCR检测方法的建立 | 第20-38页 |
1 材料与方法 | 第20-21页 |
·实验动物 | 第20页 |
·实验试剂 | 第20-21页 |
·主要仪器 | 第21页 |
2. 实验方法 | 第21-28页 |
·引物设计 | 第21-22页 |
·总RNA的提取 | 第22-23页 |
·cDNA的合成 | 第23页 |
·PPARγ和GAPDH基因部分片段的扩增及纯化 | 第23-24页 |
·载体连接及转化 | 第24-25页 |
·转化感受态细胞 | 第25页 |
·质粒的提取及酶切鉴定 | 第25-26页 |
·灵敏度试验和标准曲线的建立 | 第26-27页 |
·荧光定量PCR相对定量方法的建立 | 第27页 |
·重复性试验 | 第27-28页 |
3 结果与分析 | 第28-35页 |
·引物的反应性 | 第28-29页 |
·RNA的质量 | 第29-30页 |
·片段扩增及纯化 | 第30-31页 |
·载体的连接及转化感受态细胞的结果 | 第31页 |
·菌液的测序分析 | 第31-32页 |
·质粒的提取及酶切鉴定 | 第32页 |
·荧光定量PCR标准曲线法的建立及灵敏度分析 | 第32-34页 |
·荧光定量PCR相对定量△△Ct法的建立 | 第34页 |
·荧光定量PCR反应的重复性 | 第34-35页 |
4 讨论 | 第35-38页 |
第三章 母猪妊娠不同时期胎盘中PPARγ mRNA的表达量 | 第38-50页 |
1. 材料与方法 | 第38-40页 |
·实验动物组的建立 | 第38页 |
·实验试剂及耗材 | 第38页 |
·主要仪器 | 第38-39页 |
·样品采集 | 第39页 |
·母猪妊娠不同时期子宫内膜和绒毛膜中PPARγ mRNA的拷贝数的测定 | 第39页 |
·母猪妊娠不同时期子宫内膜和绒毛膜中PPARγ mRNA相对表达量的测定 | 第39-40页 |
·胎盘中PPARγ mRNA的表达与胎儿大小、胎囊长度之间的相关性分析 | 第40页 |
2. 结果与分析 | 第40-46页 |
·猪妊娠不同时期子宫及胎儿发育的观察 | 第40-42页 |
·母猪妊娠不同时期子宫内膜和绒毛膜中PPARγ mRNA的拷贝数 | 第42-43页 |
·妊娠不同时期子宫内膜中PPARγ mRNA的表达量 | 第43页 |
·妊娠不同时期绒毛膜中PPARγ mRNA的表达量 | 第43-44页 |
·妊娠不同时期子宫内膜和绒毛膜中PPARγ mRNA的表达量差异 | 第44-45页 |
·妊娠25d胎盘中PPARγ mRNA的表达量在胚胎不同存活状态组别中的差异 | 第45页 |
·妊娠40d胎盘中PPARγ mRNA的表达量在胚胎不同存活状态组别中的差异 | 第45-46页 |
·胎盘中PPARγmRNA的表达与胎儿大小、胎囊长度之间的相关性 | 第46页 |
3 讨论 | 第46-50页 |
第四章 结论 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
致谢 | 第60-62页 |
作者简介 | 第62页 |