致谢 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
1 文献综述 | 第9-15页 |
·种子老化、种子劣变、种子生活力与种子活力 | 第9-10页 |
·定义 | 第9页 |
·种子劣变、种子生活力与种子活力的关系 | 第9-10页 |
·种子活力的影响因素 | 第10-12页 |
·遗传因素 | 第10页 |
·非遗传因素 | 第10-12页 |
·种子形成和发育时的条件 | 第10-11页 |
·种子的成熟度 | 第11页 |
·种子的采收及加工 | 第11-12页 |
·种子贮藏的条件 | 第12页 |
·种子老化的相关研究 | 第12-15页 |
·形态的变化 | 第12页 |
·生理生化的变化 | 第12-15页 |
·质膜的变化 | 第12-13页 |
·蛋白的变化 | 第13-14页 |
·核酸的变化 | 第14页 |
·激素的变化 | 第14-15页 |
2 引言 | 第15-17页 |
·研究目的 | 第15页 |
·研究内容 | 第15-16页 |
·技术路线 | 第16-17页 |
3 材料与方法 | 第17-32页 |
·材料与处理 | 第17页 |
·种子发芽力的测定 | 第17页 |
·种胚生活力的测定 | 第17-18页 |
·种胚O_2~(·-)产生速率的测定 | 第18页 |
·种胚氧化还原酶活性的测定 | 第18-19页 |
·超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定 | 第18-19页 |
·过氧化物酶(POD)活性的测定 | 第19页 |
·过氧化氢酶(CAT)活性的测定 | 第19页 |
·种胚总RNA提取方法的优化 | 第19-22页 |
·种胚总RNA的提取 | 第19-21页 |
·Trizol提取法 | 第20页 |
·优化的Trizol提取法 | 第20页 |
·TransZol~(TM) Plant提取试剂盒 | 第20-21页 |
·总RNA质量的检测 | 第21-22页 |
·紫外分光光度检测 | 第21页 |
·电泳检测 | 第21页 |
·RT-PCR检测 | 第21-22页 |
·基于cDNA-AFLP技术的玉米种胚老化响应相关基因筛选 | 第22-30页 |
·cDNA-AFLP技术 | 第22-26页 |
·双链cDNA的合成与纯化 | 第23-24页 |
·双酶切与接头连接 | 第24-25页 |
·预扩增 | 第25页 |
·选择性扩增 | 第25-26页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第26-27页 |
·差异片段的回收及测序 | 第27-30页 |
·生物信息学分析 | 第30页 |
·老化响应相关基因的表达模式分析 | 第30-32页 |
4 结果与分析 | 第32-55页 |
·人工老化对种子发芽力的影响 | 第32-33页 |
·人工老化对种胚生活力的影响 | 第33页 |
·人工老化过程中种胚O_2~(·-)的产生速率 | 第33-34页 |
·人工老化过程中种胚氧化还原酶活性的活性 | 第34页 |
·种子生活力与不同生理特性的相关性分析 | 第34-35页 |
·种胚RNA的提取 | 第35-37页 |
·种胚RNA的紫外分光光度检测 | 第35-36页 |
·种胚总RNA的电泳检测 | 第36页 |
·种胚总RNA的RT-PCR检测 | 第36-37页 |
·基于cDNA-AFLP技术的玉米种胚老化响应相关基因筛选 | 第37-41页 |
·cDNA-AFLP技术 | 第37-39页 |
·cDNA双链的合成 | 第37-38页 |
·cDNA的双酶切结果 | 第38页 |
·连接产物的预扩增结果 | 第38-39页 |
·选择性扩增结果 | 第39页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳结果 | 第39-40页 |
·差异片段的二次扩增 | 第40-41页 |
·老化响应相关序列的生物信息学分析 | 第41-52页 |
·老化相关序列的同源性分析 | 第41-49页 |
·老化响应相关基因的功能分析 | 第49-52页 |
·种胚老化响应相关基因的表达模式分析 | 第52-55页 |
5 结论与讨论 | 第55-60页 |
·结论 | 第55页 |
·讨论 | 第55-60页 |
·人工老化对玉米‘郑单958’种子生活力的影响 | 第55-56页 |
·老化过程中玉米种胚ROS的积累 | 第56页 |
·玉米种胚总RNA提取方法的优化 | 第56页 |
·cDNA-AFLP技术在种子老化响应相关基因研究中的应用潜力 | 第56-57页 |
·人工老化对种子基本代谢过程的影响 | 第57页 |
·人工老化对信号转导过程的影响 | 第57-58页 |
·种子对人工老化处理的积极响应 | 第58页 |
·玉米种子人工老化的可能机制 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-69页 |
ABSTRACT | 第69-70页 |