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玉米种子人工老化响应相关基因筛选与分析

致谢第1-8页
摘要第8-9页
1 文献综述第9-15页
   ·种子老化、种子劣变、种子生活力与种子活力第9-10页
     ·定义第9页
     ·种子劣变、种子生活力与种子活力的关系第9-10页
   ·种子活力的影响因素第10-12页
     ·遗传因素第10页
     ·非遗传因素第10-12页
       ·种子形成和发育时的条件第10-11页
       ·种子的成熟度第11页
       ·种子的采收及加工第11-12页
       ·种子贮藏的条件第12页
   ·种子老化的相关研究第12-15页
     ·形态的变化第12页
     ·生理生化的变化第12-15页
       ·质膜的变化第12-13页
       ·蛋白的变化第13-14页
       ·核酸的变化第14页
       ·激素的变化第14-15页
2 引言第15-17页
   ·研究目的第15页
   ·研究内容第15-16页
   ·技术路线第16-17页
3 材料与方法第17-32页
   ·材料与处理第17页
   ·种子发芽力的测定第17页
   ·种胚生活力的测定第17-18页
   ·种胚O_2~(·-)产生速率的测定第18页
   ·种胚氧化还原酶活性的测定第18-19页
     ·超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定第18-19页
     ·过氧化物酶(POD)活性的测定第19页
     ·过氧化氢酶(CAT)活性的测定第19页
   ·种胚总RNA提取方法的优化第19-22页
     ·种胚总RNA的提取第19-21页
       ·Trizol提取法第20页
       ·优化的Trizol提取法第20页
       ·TransZol~(TM) Plant提取试剂盒第20-21页
     ·总RNA质量的检测第21-22页
       ·紫外分光光度检测第21页
       ·电泳检测第21页
       ·RT-PCR检测第21-22页
   ·基于cDNA-AFLP技术的玉米种胚老化响应相关基因筛选第22-30页
     ·cDNA-AFLP技术第22-26页
       ·双链cDNA的合成与纯化第23-24页
       ·双酶切与接头连接第24-25页
       ·预扩增第25页
       ·选择性扩增第25-26页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第26-27页
     ·差异片段的回收及测序第27-30页
   ·生物信息学分析第30页
   ·老化响应相关基因的表达模式分析第30-32页
4 结果与分析第32-55页
   ·人工老化对种子发芽力的影响第32-33页
   ·人工老化对种胚生活力的影响第33页
   ·人工老化过程中种胚O_2~(·-)的产生速率第33-34页
   ·人工老化过程中种胚氧化还原酶活性的活性第34页
   ·种子生活力与不同生理特性的相关性分析第34-35页
   ·种胚RNA的提取第35-37页
     ·种胚RNA的紫外分光光度检测第35-36页
     ·种胚总RNA的电泳检测第36页
     ·种胚总RNA的RT-PCR检测第36-37页
   ·基于cDNA-AFLP技术的玉米种胚老化响应相关基因筛选第37-41页
     ·cDNA-AFLP技术第37-39页
       ·cDNA双链的合成第37-38页
       ·cDNA的双酶切结果第38页
       ·连接产物的预扩增结果第38-39页
       ·选择性扩增结果第39页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳结果第39-40页
     ·差异片段的二次扩增第40-41页
   ·老化响应相关序列的生物信息学分析第41-52页
     ·老化相关序列的同源性分析第41-49页
     ·老化响应相关基因的功能分析第49-52页
   ·种胚老化响应相关基因的表达模式分析第52-55页
5 结论与讨论第55-60页
   ·结论第55页
   ·讨论第55-60页
     ·人工老化对玉米‘郑单958’种子生活力的影响第55-56页
     ·老化过程中玉米种胚ROS的积累第56页
     ·玉米种胚总RNA提取方法的优化第56页
     ·cDNA-AFLP技术在种子老化响应相关基因研究中的应用潜力第56-57页
     ·人工老化对种子基本代谢过程的影响第57页
     ·人工老化对信号转导过程的影响第57-58页
     ·种子对人工老化处理的积极响应第58页
     ·玉米种子人工老化的可能机制第58-60页
参考文献第60-69页
ABSTRACT第69-70页

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