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细胞穿透肽介导的大白菜小孢子遗传转化体系的构建

摘要第1-13页
Abstract第13-16页
缩略词第16-17页
前言第17-19页
第一章 文献综述第19-33页
   ·植物遗传转化概述第19-20页
     ·植物遗传转化第19-20页
     ·植物遗传转化的优势第20页
   ·植物遗传转化方法第20-23页
     ·农杆菌介导法第20-21页
     ·基因枪法第21页
     ·超声波介导法第21-22页
     ·显微注射法第22页
     ·化学药剂诱导法第22页
     ·花粉管通道法第22-23页
     ·电激法第23页
   ·游离小孢子培养技术研究进展第23-27页
     ·影响大白菜游离小孢子胚状体发生因素第24-26页
     ·其他特殊处理第26-27页
     ·大白菜游离小孢子培养技术的优势与利用第27页
   ·细胞穿透肽简介第27-30页
     ·细胞穿透肽的发现第27-28页
     ·细胞穿透肽的运转优势第28页
     ·细胞穿透肽穿透机制第28-29页
     ·细胞穿透肽的应用第29-30页
   ·细胞穿透肽从动物细胞到植物细胞过渡第30-31页
   ·本研究目的及意义第31-33页
第二章 表达载体pBI121和pBI221-GFP转化、鉴定及目的片段获得第33-42页
   ·材料与方法第33-38页
     ·菌株与质粒载体第33页
     ·试验用品第33页
     ·试验方法第33-38页
   ·结果与分析第38-41页
     ·菌液PCR扩增产物检测结果第38-39页
     ·质粒pBI121和pBI121-GFP提取第39-40页
     ·载体质粒pBI121和pBI221-GFP酶切鉴定结果第40页
     ·目的片段回收第40-41页
   ·小结第41-42页
第三章 CPP介导大白菜小孢子转染第42-49页
   ·材料与方法第42-44页
     ·植物材料第42页
     ·质粒载体第42页
     ·实验药品第42页
     ·试验方法第42-44页
   ·结果与分析第44-48页
     ·Lipofectamine~(TM)2000对大白菜游离小孢子胚胎发生的影响第44-45页
     ·DNAcargos复合物的检测第45页
     ·DNAcargos复合物添加对小孢子胚胎发生的影响第45-46页
     ·热激时间对添加DNAcargos复合物后小孢子胚胎发生的影响第46页
     ·更换和添加培养基对添加DNAcargos复合物后小孢子胚胎发生的影响第46-47页
     ·植株再生过程第47-48页
   ·小结第48-49页
第四章 转化植株的鉴定第49-66页
   ·材料与方法第49-57页
     ·植物材料第49页
     ·试剂第49页
     ·引物第49页
     ·实验仪器第49-50页
     ·试验方法第50-57页
   ·结果与分析第57-64页
     ·大白菜基因组DNA提取第57-58页
     ·PCR扩增鉴定转化植株第58-59页
     ·总RNA提取与反转录PCR第59-60页
     ·GUS组织化学染色结果第60-61页
     ·GFP的鉴定第61-62页
     ·转化植株Southern Blot检测结果第62-64页
     ·转化植株倍性鉴定第64页
   ·小结第64-66页
讨论第66-72页
结论第72-73页
参考文献第73-90页
附录第90-98页
致谢第98-99页
攻读学位期间发表的学术论文第99页

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