| 縮略词表 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| ·溶菌酶概述 | 第11-13页 |
| ·溶菌酶的分类 | 第11-13页 |
| ·c型溶菌酶 | 第11-12页 |
| ·g型溶菌酶 | 第12页 |
| ·植物溶菌酶 | 第12页 |
| ·微生物溶菌酶 | 第12页 |
| ·噬菌体溶菌酶 | 第12-13页 |
| ·i-型溶菌酶 | 第13页 |
| ·溶菌酶的生物学性质 | 第13-15页 |
| ·溶菌酶的基因结构 | 第13-14页 |
| ·溶菌酶的活性中心 | 第14页 |
| ·溶菌酶的理化性质 | 第14-15页 |
| ·溶菌酶的应用 | 第15-18页 |
| ·溶菌酶在医疗上的应用 | 第15-16页 |
| ·溶菌酶在食品方面的应用 | 第16-18页 |
| ·溶菌酶在乳制品中的应用 | 第16页 |
| ·溶菌酶在饮料中的应用 | 第16页 |
| ·溶菌酶在软包食品上的应用 | 第16-17页 |
| ·溶菌酶在保健食品中的应用 | 第17页 |
| ·溶菌酶在降解大分子壳聚糖上的应用 | 第17页 |
| ·溶菌酶在肉制品保鲜中的应用 | 第17-18页 |
| ·溶菌酶在畜牧业上的应用 | 第18页 |
| ·溶菌酶在畜禽治疗上的应用 | 第18页 |
| ·溶菌酶在饲料上的应用 | 第18页 |
| ·溶菌酶在生物工程中的应用 | 第18页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统概述 | 第18-21页 |
| ·毕赤酵母表达系统的组成 | 第19-20页 |
| ·宿主菌株 | 第19页 |
| ·表达载体 | 第19-20页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统的特点 | 第20页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统所存在的问题 | 第20-21页 |
| ·研究的主要内容、目的、意义和技术路线 | 第21-23页 |
| ·研究的主要内容 | 第21页 |
| ·研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| ·研究的技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-38页 |
| ·材料与仪器 | 第23-28页 |
| ·菌株和质粒 | 第23页 |
| ·试剂与工具酶 | 第23页 |
| ·特异性引物 | 第23-24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24-25页 |
| ·主要溶液及缓冲液 | 第25-27页 |
| ·培养基 | 第27-28页 |
| ·SjLys-C基因质粒的鉴定的扩增与重组克隆 | 第28-33页 |
| ·特异性引物设计 | 第28页 |
| ·pMD18-T-SjLys-C/DH5 α质粒的提取 | 第28-29页 |
| ·SjLys-C基因的扩增 | 第29-30页 |
| ·PCR产物的低熔点琼脂糖凝胶电泳回收 | 第30-31页 |
| ·构建重组克隆质粒 | 第31页 |
| ·重组克隆质粒的菌落PCR鉴定 | 第31-32页 |
| ·重组克隆质粒的双酶切鉴定 | 第32页 |
| ·重组克隆质粒的测序鉴定 | 第32-33页 |
| ·构建重组表达质粒pPIC9K-SjLys-C | 第33-34页 |
| ·双酶切pMD18-T-SjLys-C和表达载体pPIC9K | 第33页 |
| ·构建重组表达质粒 | 第33-34页 |
| ·pPIC9K-SjLys及pPIC9K-SjLys-C转化毕赤酵母GS115及筛选 | 第34-35页 |
| ·毕赤酵母GS115感受态细胞的制备 | 第34页 |
| ·pPIC9K-SjLys及pPIC9K-SjLys-C质粒的线性化 | 第34-35页 |
| ·电转化 | 第35页 |
| ·含有目的基因的高拷贝毕赤酵母转化子的筛选 | 第35页 |
| ·SjLys及SjLys-C基因的诱导表达 | 第35-36页 |
| ·表达产物的浓缩处理及SDS-PAGE检测 | 第36-37页 |
| ·TCA法沉淀目的蛋白 | 第36页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE检测 | 第36-37页 |
| ·重组海参溶菌酶及其C端多肽的抑菌活性分析 | 第37-38页 |
| 第三章 结果与分析 | 第38-47页 |
| ·SjLys-C基因的扩增与重组克隆质粒的鉴定 | 第38-40页 |
| ·SjLys-C基因的扩增 | 第38页 |
| ·重组克隆质粒pMD18-T-SjLys-C的菌落PCR鉴定 | 第38-39页 |
| ·重组克隆质粒pMD18-T-SjLys-C的双酶切鉴定 | 第39-40页 |
| ·重组克隆质粒pMD18-T-SjLys-C的测序鉴定 | 第40页 |
| ·SjLys-C基因重组表达质粒的构建 | 第40-43页 |
| ·重组表达质粒pPIC9K-SjLys-C的菌落PCR鉴定 | 第40-41页 |
| ·重组表达质粒pPIC9K-SjLys-C的双酶切鉴定 | 第41-42页 |
| ·重组表达质粒pPIC9K-SjLys-C测序鉴定 | 第42-43页 |
| ·重组毕赤酵母高拷贝菌株筛选 | 第43-44页 |
| ·重组海参溶菌酶及C端多肽的诱导表达与抑菌活性分析 | 第44-47页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE分析 | 第44-46页 |
| ·抑菌活性分析 | 第46-47页 |
| 第四章 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
