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黄瓜低温胁迫应答转录因子CsWRKY46和CsWRKY21的表达特征与功能分析

摘要第1-8页
Abstract第8-15页
第一章 绪论第15-27页
   ·低温对黄瓜生长发育的影响第15-16页
     ·低温对黄瓜形态指标的影响第15-16页
     ·低温对黄瓜产量品质的影响第16页
   ·低温对黄瓜生理代谢的影响第16-18页
     ·低温对光合作用的影响第16-17页
     ·低温对细胞膜的影响第17页
     ·低温对植物激素 ABA 的影响第17-18页
   ·低温相关基因的应答与调控第18-24页
     ·相关基因对胁迫的响应与信号传导第19页
     ·WRKY 转录因子与植物的抗逆性第19-24页
   ·展望第24-25页
   ·选题目的及意义第25-27页
第二章 黄瓜 WRKY 转录因子的生物信息学分析第27-33页
   ·前言第27页
   ·材料和方法第27-28页
     ·黄瓜 WRKY 基因的获取及染色体定位第27-28页
     ·黄瓜 WRKY 基因的序列分析第28页
     ·应用的生物信息学软件及相关网站第28页
   ·结果与分析第28-31页
     ·黄瓜 WRKY 基因的获取及染色体定位第28-30页
     ·黄瓜 WRKY 转录因子的系统进化分析第30页
     ·黄瓜 CsWRKY46 转录因子的序列分析第30页
     ·黄瓜 CsWRKY21 转录因子的序列分析第30-31页
   ·讨论第31-32页
   ·小结第32-33页
第三章 黄瓜 CsWRKY46 和 CsWRKY21 的时空表达分析第33-43页
   ·前言第33页
   ·材料与方法第33-38页
     ·植物的生长与处理第33-34页
     ·CsWRKY 基因全序列的获得第34-37页
     ·半定量 PCR 和实时荧光定量 PCR 分析第37-38页
   ·结果与分析第38-40页
     ·目标 WRKY 家族基因克隆的结果与分析第38页
     ·低温胁迫对 WRKY 家族基因的表达的影响第38-39页
     ·ABA 对 WRKY 家族基因的表达的影响第39-40页
     ·黄瓜 WRKY 家族基因在不同组织中的表达模式第40页
   ·讨论第40-42页
   ·小结第42-43页
第四章 CsWRKY46 和 CsWRKY21 的亚细胞定位第43-50页
   ·前言第43页
   ·材料和方法第43-45页
     ·实验材料第43页
     ·WRKY 基因瞬时表达载体构建第43-44页
     ·拟南芥原生质体的提取及转化第44-45页
     ·目的基因与 GFP 融合蛋白的显微镜观察第45页
   ·结果与分析第45-48页
     ·WRKY 基因瞬时表达载体构建第45-46页
     ·WRKY 基因瞬时表达第46-48页
     ·讨论第48-49页
   ·小结第49-50页
第五章 载体构建及转基因植株的获得第50-68页
   ·前言第50页
   ·材料和方法第50-58页
     ·植物过表达载体的构建第50-52页
     ·RNAi 载体的构建第52-56页
     ·floral-dip 法转化拟南芥第56-57页
     ·转基因植株的获得及筛选第57-58页
   ·结果与分析第58-66页
     ·过表达载体的构建第58-61页
     ·RNAi 载体的构建第61-63页
     ·过表达转基因植株的获得第63-66页
   ·讨论第66-67页
   ·小结第67-68页
第六章 黄瓜 CsWRKY46 和 CsWRKY21 的功能验证第68-81页
   ·前言第68页
   ·材料和方法第68-70页
     ·植物材料的培养与处理方法第68-69页
     ·冰冻处理后转基因植株的表型鉴定第69页
     ·低温胁迫下相关生理指标的测定第69-70页
     ·ABA 敏感性实验第70页
     ·荧光定量 PCR 检测部分低温信号转导通路基因的表达第70页
   ·结果与分析第70-78页
     ·CsWRKY46 的功能验证第70-74页
     ·CsWRKY21 的功能验证第74-78页
   ·讨论第78-79页
   ·小结第79-81页
第七章 黄瓜 CsWRKY46 和 CsWRKY21 的原核表达第81-88页
   ·前言第81页
   ·材料和方法第81-83页
     ·原核表达载体的构建第81-82页
     ·原核表达条件的优化第82-83页
   ·结果与分析第83-86页
     ·原核表达载体的构建第83-84页
     ·蛋白表达的纯化第84-86页
   ·讨论第86-87页
   ·小结第87-88页
第八章 全文讨论第88-90页
第九章 全文结论第90-92页
参考文献第92-102页
附录第102-104页
致谢第104-105页
作者简介第105页

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