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粗糙脉孢菌木糖代谢途径中关键基因的功能研究

中文摘要第1-4页
ABSTRACT第4-7页
第一章 引言第7-16页
   ·生物质能源第7-8页
   ·戊糖产乙醇途径——木糖代谢途径第8-9页
   ·木糖代谢重组酵母第9-12页
     ·XR-XDH 途径第10-11页
     ·XI 途径第11-12页
   ·粗糙脉胞菌简介第12-14页
   ·本论文研究的目的及其意义第14-16页
第二章 实验材料与方法第16-33页
   ·实验材料第16-20页
     ·实验仪器及生化试剂第16-18页
     ·实验用菌株和质粒第18-20页
   ·培养基及缓冲液第20-22页
     ·基本培养基第20-21页
     ·N.crassa 杂交用培养基第21页
     ·N.crassa 转化用培养基第21页
     ·常用溶液及缓冲液第21-22页
   ·实验方法第22-33页
     ·碱裂解法小量提取质粒 DNA(试剂盒)第22-24页
     ·质粒 DNA 的酶切第24页
     ·片段和载体的连接第24-25页
     ·E.coli 感受态细胞的转化第25-26页
     ·快速琼脂糖凝胶纯化 DNA 片段(试剂盒)第26页
     ·酵母细胞转化(质粒)第26页
     ·酵母细胞转化(基因片段)第26-27页
     ·N.crassa 转化第27页
     ·N.crassa DNA 的提取第27-28页
     ·真菌 RNA 的提取第28页
     ·RNA 纯化(试剂盒)第28-29页
     ·反转录 PCR第29页
     ·N.crassa 双突变体的构建第29-30页
     ·酵母总蛋白提取第30页
     ·蛋白浓度的测定第30-31页
     ·Western Blotting 实验流程第31页
     ·酵母基因组 DNA 提取(玻璃珠法)第31-32页
     ·N.crassa 的培养与保存第32-33页
第三章 NcXIL 的功能研究第33-52页
   ·NcXIL 在 N.crassa 中的特征研究第33-40页
     ·D-木糖诱导 NcXIL 的表达第33-34页
     ·NcXIL 在Δncxr;Δhis-3 中的过表达第34-40页
   ·NcXIL 在 S.cerevisiae 中的表达研究第40-52页
     ·NcXIL 在 S.cerevisiae 中的异源表达第40-44页
     ·重组 S.cerevisiae 利用木糖情况第44-46页
     ·改造 NcXIL 在 S.cerevisiae 中的表达及其木糖利用情况第46-49页
     ·本章小结第49-52页
第四章 NcXK 与 ScXK 在木糖利用中的差异研究第52-60页
   ·构建木糖代谢的工程酵母菌株第52-58页
     ·构建木糖表达基因的重组质粒第52-54页
     ·构建整合型工程酵母第54-58页
   ·NcXK 与 ScXK 在工程酵母利用木糖中的差异第58-59页
   ·本章小结第59-60页
第五章 结论与展望第60-61页
参考文献第61-66页
发表论文和参与科研情况说明第66-67页
致谢第67页

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