| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-20页 |
| ·研究问题的由来 | 第9-10页 |
| ·文献综述 | 第10-19页 |
| ·VIGS概述 | 第10-11页 |
| ·影响基因沉默效果的因素研究进展 | 第11-17页 |
| ·病毒载体研究进展 | 第11-14页 |
| ·目的基因片段的选择研究进展 | 第14-15页 |
| ·VIGS病毒载体的接种方法研究进展 | 第15-16页 |
| ·影响基因沉默效果的其它因素研究进展 | 第16-17页 |
| ·VIGS研究植物基因功能的应用进展 | 第17-18页 |
| ·VIGS的优点和局限研究进展 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-32页 |
| ·材料与试剂 | 第20-22页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·质粒与菌株 | 第20页 |
| ·酶及试剂 | 第20-21页 |
| ·常用试剂配制 | 第21-22页 |
| ·培养基配制 | 第21页 |
| ·侵染缓冲液配制 | 第21-22页 |
| ·其它试剂配制 | 第22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22-23页 |
| ·试验环境条件 | 第23页 |
| ·试验设计及样品处理 | 第23-26页 |
| ·观赏花烟草VIGS技术体系初步建立试验 | 第23-24页 |
| ·重组病毒载体构建 | 第24页 |
| ·观赏花烟草VIGS技术体系优化试验 | 第24-25页 |
| ·技术路线图 | 第25-26页 |
| ·试验方法 | 第26-32页 |
| ·花冠RNA的提取 | 第26页 |
| ·RNA反转录成cDNA | 第26页 |
| ·加接头CHS(jjtCHS)基因片段的克隆 | 第26-27页 |
| ·PCR产物普通琼脂糖凝胶DNA回收 | 第27页 |
| ·病毒质粒的提取 | 第27页 |
| ·不依赖连接的克隆(LIC)法构建重组病毒载体 | 第27-29页 |
| ·重组病毒载体转化大肠杆菌 | 第29页 |
| ·质粒多克隆位点引物检测阳性重组子及测序 | 第29-30页 |
| ·农杆菌GV3101感受态制备 | 第30页 |
| ·重组病毒载体质粒电转化农杆菌GV3101感受态 | 第30-31页 |
| ·侵染液制备 | 第31页 |
| ·植物材料侵染 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-45页 |
| ·根吸收法侵染观赏花烟草幼根试验 | 第32页 |
| ·叶背注射渗透法侵染观赏花烟草幼苗试验 | 第32-36页 |
| ·加接头CHS基因片段的克隆 | 第36-38页 |
| ·pTRV2质粒酶切 | 第38-39页 |
| ·多克隆位点引物检测pTRV2-CHS阳性重组子 | 第39-41页 |
| ·重组病毒载体质粒电转化农杆菌GV3101感受态 | 第41-42页 |
| ·已转化农杆菌的重组病毒载体pTRV-CHS侵染观赏花烟草结果 | 第42-43页 |
| ·RT-PCR检验观赏花烟草CHS基因下调水平 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| ·主要结论 | 第45页 |
| ·创新点及解决的科学问题 | 第45-46页 |
| ·理论价值及应用前景 | 第46-47页 |
| ·存在的问题与展望 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 致谢 | 第55页 |