柑橘采后生防菌34-9遗传转化体系的建立与优化
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 前言 | 第8-17页 |
| ·柑橘主要采后真菌病害种类 | 第8页 |
| ·控制柑橘采后真菌病害的主要方法 | 第8-11页 |
| ·物理保鲜技术 | 第8-9页 |
| ·化学防治 | 第9页 |
| ·生物防治 | 第9-11页 |
| ·柑橘生防酵母菌的研究进展 | 第11-13页 |
| ·生防酵母菌的作用机制 | 第11页 |
| ·生物酵母菌遇到的问题 | 第11-12页 |
| ·酵母拮抗菌生防效力的改良 | 第12-13页 |
| ·酵母的遗传改良方法 | 第13-15页 |
| ·LiAc法转化 | 第14页 |
| ·原生质体转化 | 第14页 |
| ·根癌农杆菌介导的转化 | 第14-15页 |
| ·课题的的来源和意义 | 第15-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-25页 |
| ·材料 | 第17-20页 |
| ·实验菌株 | 第17页 |
| ·质粒 | 第17页 |
| ·培养基 | 第17-18页 |
| ·试剂 | 第18-19页 |
| ·仪器设备 | 第19-20页 |
| ·试验方法 | 第20-25页 |
| ·酵母总DNA的提取(CTAB法) | 第20页 |
| ·34-9对潮霉素B敏感性检测 | 第20-21页 |
| ·原生质体转化 | 第21-22页 |
| ·根癌农杆菌介导的转化 | 第22-23页 |
| ·转化子稳定性检测 | 第23-24页 |
| ·PCR检测转化子 | 第24页 |
| ·转化子的形态鉴定 | 第24-25页 |
| ·转化子rDNA-ITS基因扩增与测序 | 第25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-44页 |
| ·34-9对潮霉素B敏感性检测 | 第25-27页 |
| ·原生质体的转化 | 第27-33页 |
| ·34-9生长曲线的测定 | 第27页 |
| ·镜检34-9原生质体的产生 | 第27-28页 |
| ·影响34-9原生质体制备率和再生率的因素 | 第28-32页 |
| ·34-9原生质体的转化与转化子的获得 | 第32-33页 |
| ·根癌农杆菌介导的34-9转化 | 第33-44页 |
| ·农杆菌介导的34-9转化效率的影响因素 | 第33-37页 |
| ·34-9阳性转化子的获得及初步鉴定 | 第37页 |
| ·转化子分析 | 第37-39页 |
| ·转化子的形态鉴定 | 第39-41页 |
| ·转化子的rDNA-ITS序列分析 | 第41-44页 |
| 4 讨论 | 第44-48页 |
| ·原生质体法转化 | 第44-46页 |
| ·菌龄 | 第44页 |
| ·酵母细胞的浓度 | 第44页 |
| ·渗透压稳定剂的种类 | 第44-45页 |
| ·酶的种类和浓度 | 第45页 |
| ·不同酶解方式 | 第45页 |
| ·不同预处理剂 | 第45-46页 |
| ·转化子的稳定性 | 第46页 |
| ·根癌农杆菌介导的转化 | 第46-48页 |
| ·共培养时间 | 第46-47页 |
| ·酵母和农杆菌的浓度 | 第47页 |
| ·共培养膜的类型 | 第47页 |
| ·转化子的微观形态 | 第47-48页 |
| ·转化子的筛选和鉴定 | 第48页 |
| 展望 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-58页 |
| 附图及说明 | 第58-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
