摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
目录 | 第10-19页 |
缩略语注释 | 第19-21页 |
第1章 引言 | 第21-40页 |
·概述 | 第21页 |
·天然抗肿瘤药物的研究现状 | 第21-24页 |
·中药黄酮类 | 第22页 |
·活性多糖类 | 第22-23页 |
·生物碱类 | 第23页 |
·其他天然药物 | 第23-24页 |
·多糖的国内外研究进展 | 第24-25页 |
·多糖的应用 | 第25页 |
·神秘而新奇的多糖——灵芝多糖 | 第25-31页 |
·灵芝概述 | 第25-26页 |
·灵芝多糖的药理作用 | 第26-31页 |
·灵芝多糖抗肿瘤作用机制的国内外研究现状 | 第31-36页 |
·提高宿主免疫能力而发挥抗肿瘤作用 | 第31-34页 |
·灵芝多糖对肿瘤细胞的生长抑制作用 | 第34-36页 |
·灵芝多糖抗肿瘤效果的影响因素及未来研究方向 | 第36页 |
·黑灵芝的研究概况 | 第36-38页 |
·本实验的研究内容和意义 | 第38-40页 |
·主要研究内容 | 第38页 |
·主要创新之处和研究意义 | 第38-40页 |
第2章 PSG-1 对 CT26 结肠癌细胞体外增殖的作用 | 第40-48页 |
·引言 | 第40-41页 |
·实验材料与仪器 | 第41-42页 |
·实验细胞株 | 第41页 |
·实验动物 | 第41页 |
·主要试剂 | 第41页 |
·主要溶液的配制 | 第41-42页 |
·主要仪器 | 第42页 |
·实验方法 | 第42-44页 |
·细胞培养 | 第42页 |
·PSG-1 的体外抗肿瘤活性 | 第42-43页 |
·小鼠腹腔巨噬细胞的制备 | 第43-44页 |
·数据处理 | 第44页 |
·实验结果 | 第44-46页 |
·PSG-1 对结肠癌细胞株 CT26 生长的影响 | 第44-45页 |
·PSG-1 对腹腔巨噬细胞吞噬杀伤 CT26 细胞的影响 | 第45-46页 |
·讨论 | 第46-47页 |
·本章小结 | 第47-48页 |
第3章 PSG-1 通过 TLR4 调节的 NF-κB、MAPK 信号转导途径抑制 CT26 荷瘤小鼠肿瘤生长的研究 | 第48-71页 |
·引言 | 第48-49页 |
·实验材料与仪器 | 第49-51页 |
·实验细胞株 | 第49页 |
·实验动物 | 第49页 |
·主要试剂 | 第49页 |
·主要溶液的配制 | 第49-50页 |
·实验仪器 | 第50-51页 |
·实验方法 | 第51-59页 |
·CT26 细胞悬浮液的制备 | 第51页 |
·动物模型建立及处理 | 第51页 |
·肿瘤抑制率、脾指数及胸腺指数的测定 | 第51-52页 |
·荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞的制备 | 第52页 |
·荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能的测定 | 第52页 |
·NO 水平的测定 | 第52页 |
·细胞因子分泌水平的测定 | 第52-53页 |
·RT-PCR 检测 mRNA 表达水平 | 第53-55页 |
·抗 Toll 样受体 4(Anti-TLR4)抗体对 PSG-1 促结肠癌移植瘤小鼠腹腔巨噬细胞分泌 TNF-α的影响 | 第55-56页 |
·p38MAPK 特异阻断剂取消 PSG-1 促结肠癌移植瘤小鼠巨噬细胞分泌TNF-α的作用 | 第56页 |
·NF-κB 特异阻断剂取消 PSG-1 促结肠癌移植瘤小鼠巨噬细胞分泌TNF-α的效果 | 第56-57页 |
·蛋白印迹免疫分析(Western blot analysis) | 第57-59页 |
·数据处理 | 第59页 |
·实验结果 | 第59-68页 |
·PSG-1 对 CT26 荷瘤小鼠的抑瘤率和免疫器官指数的影响 | 第59-60页 |
·PSG-1 对荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的作用 | 第60-61页 |
·PSG-1 对荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞分泌 NO 的影响 | 第61-62页 |
·PSG-1 对巨噬细胞分泌细胞因子的影响 | 第62-63页 |
·RT-PCR 检测荷瘤小鼠巨噬细胞 TNF-α、IL-1β、iNOS mRNA 的表达43 | 第63-64页 |
·抗 Toll 样受体 4(TLR4)抗体部分取消 PSG-1 促荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞分泌 TNF-α的作用 | 第64-65页 |
·p38MAPK 特异阻断剂取消 PSG-1 促荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α的作用 | 第65-66页 |
·NF-κB 特异性阻断剂 PDTC 取消 PSG-1 促荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α的作用 | 第66页 |
·细胞膜受体 TLR4 蛋白表达水平的测定 | 第66-67页 |
·PSG-1 对 NF-κB 信号通路关键分子蛋白表达的影响 | 第67页 |
·p38 MAPK 信号通路在 PSG-1 抗肿瘤作用的影响 | 第67-68页 |
·讨论 | 第68-70页 |
·本章小结 | 第70-71页 |
第4章 PSG-1 通过 G 蛋白偶联受体信号通路抑制 CT26 荷瘤小鼠的肿瘤生长的研究 | 第71-87页 |
·引言 | 第71-72页 |
·实验材料与仪器 | 第72页 |
·实验细胞株 | 第72页 |
·实验动物 | 第72页 |
·主要试剂 | 第72页 |
·实验仪器 | 第72页 |
·实验方法 | 第72-76页 |
·结肠癌 CT26 荷瘤小鼠模型的建立 | 第72-73页 |
·实验分组及处理 | 第73页 |
·观察指标 | 第73-74页 |
·肿瘤细胞的制备 | 第74页 |
·流式细胞术检测细胞凋亡 | 第74页 |
·cAMP 和 cGMP 浓度的测定 | 第74页 |
·二酰基甘油(DG)和腺苷酸环化酶 (AC) 水平的测定 | 第74页 |
·PKA 和 PKC 活性的测定 | 第74-75页 |
·蛋白印迹法检测蛋白的表达 | 第75页 |
·中性红吞噬实验 | 第75页 |
·淋巴细胞增殖的测定 | 第75页 |
·数据处理 | 第75-76页 |
·结果与分析 | 第76-84页 |
·PSG-1 对 CT26 荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用 | 第76-77页 |
·PSG-1 对 CT26 荷瘤小鼠免疫器官的影响 | 第77页 |
·PSG-1 对 CT26 荷瘤小鼠血清中细胞因子分泌的影响 | 第77-78页 |
·PSG-1 对 CT26 细胞凋亡的影响 | 第78-79页 |
·PSG-1 对荷瘤小鼠肿瘤细胞内 cAMP 和 cGMP 水平的影响 | 第79-80页 |
·PSG-1 对荷瘤小鼠肿瘤细胞内 AC 和 DG 水平的影响 | 第80-81页 |
·PSG-1 对荷瘤小鼠肿瘤细胞中的 PKA、PKC 活性的调节 | 第81-83页 |
·PSG-1 对腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响 | 第83-84页 |
·PSG-1 对荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖的影响 | 第84页 |
·讨论 | 第84-86页 |
·本章小结 | 第86-87页 |
第5章 PSG-1 通过线粒体凋亡途径的抗结肠癌作用 | 第87-104页 |
·引言 | 第87-88页 |
·实验材料与仪器 | 第88-89页 |
·实验细胞株 | 第88页 |
·实验动物 | 第88页 |
·主要试剂 | 第88页 |
·实验仪器 | 第88-89页 |
·实验方法 | 第89-93页 |
·建立 CT26 结肠癌荷瘤小鼠模型 | 第89页 |
·实验分组及处理 | 第89页 |
·观察指标 | 第89页 |
·血清细胞因子的检测 | 第89页 |
·CT26 结肠癌细胞的制备 | 第89页 |
·PSG-1 对 CT26 荷瘤小鼠 CT26 细胞增殖的作用 | 第89页 |
·细胞凋亡的检测 | 第89-90页 |
·CT26 细胞线粒体膜电位的测定 | 第90页 |
·Western blot 法检测细胞凋亡相关蛋白的表达 | 第90-91页 |
·Caspase 活性的测定 | 第91-92页 |
·CT26 细胞内 ROS 含量的测定 | 第92页 |
·PSG-1 对 CT26 荷瘤小鼠淋巴细胞增殖的影响 | 第92-93页 |
·数据处理 | 第93页 |
·结果与分析 | 第93-101页 |
·PSG-1 的体内抑瘤活性 | 第93-94页 |
·PSG-1 对 CT26 小鼠免疫脏器指数的影响 | 第94页 |
·PSG-1 对 CT26 荷瘤小鼠肿瘤细胞的促凋亡作用 | 第94-95页 |
·PSG-1 对 CT26 荷瘤小鼠 CT26 细胞线粒体ΔΨm 和细胞色素 c 释放的影响 | 第95-96页 |
·PSG-1 对 CT26 移植瘤小鼠结肠癌细胞 ROS 的影响 | 第96-97页 |
·PSG-1 对荷瘤小鼠 CT26 细胞 Caspase-3 和 Caspase-9 酶活性的影响 | 第97-98页 |
·PSG-1 对荷瘤小鼠 CT26 细胞中 Bcl-2 家族蛋白和 p53 蛋白表达的影响 | 第98-99页 |
·PSG-1 对 CT26 荷瘤小鼠血清中细胞因子水平的影响 | 第99-100页 |
·PSG-1 对 CT26 荷瘤小鼠脾细胞增殖的影响 | 第100-101页 |
·讨论 | 第101-103页 |
·本章小结 | 第103-104页 |
第6章 PSG-1 体外对 S180 肿瘤生长的作用 | 第104-111页 |
·引言 | 第104-105页 |
·实验材料与仪器 | 第105页 |
·实验细胞株 | 第105页 |
·实验动物 | 第105页 |
·主要试剂 | 第105页 |
·实验仪器 | 第105页 |
·实验方法 | 第105-107页 |
·S180 细胞的培养与悬浮液制备 | 第105-106页 |
·PSG-1 对 S180 肉瘤细胞体外增殖实验 | 第106页 |
·PSG-1 对腹腔巨噬细胞杀伤 S180 细胞效果的影响 | 第106-107页 |
·数据处理 | 第107页 |
·实验结果 | 第107-109页 |
·PSG-1 对 S180 细胞的增殖作用 | 第107-108页 |
·PSG-1 对腹腔巨噬细胞吞噬作用的影响 | 第108-109页 |
·讨论 | 第109-110页 |
·本章小结 | 第110-111页 |
第7章 PSG-1 通过 TLR4 调节的 NF-κB、MAPK 信号转导途径抑制 S180 肿瘤生长的机制探讨 | 第111-123页 |
·引言 | 第111-112页 |
·实验材料与仪器 | 第112页 |
·实验细胞株 | 第112页 |
·实验动物 | 第112页 |
·主要试剂 | 第112页 |
·实验仪器 | 第112页 |
·实验方法 | 第112-115页 |
·S180 荷瘤小鼠模型的建立 | 第112-113页 |
·实验分组及处理 | 第113页 |
·动物处理 | 第113页 |
·肿瘤细胞的制备 | 第113页 |
·PSG-1 对 S180 荷瘤小鼠肿瘤生长的影响 | 第113-114页 |
·荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的测定 | 第114页 |
·巨噬细胞中细胞因子分泌的测定 | 第114页 |
·Griess 法测定 NO | 第114页 |
·荷瘤小鼠脾脏 T、B 淋巴细胞的增殖 | 第114-115页 |
·Western blot 检测相关蛋白的表达 | 第115页 |
·数据处理 | 第115页 |
·实验结果 | 第115-120页 |
·PSG-1 的体内抗肿瘤作用 | 第115-116页 |
·实验各组荷瘤小鼠的胸腺指数及脾脏指数 | 第116-117页 |
·PSG-1 对 Con A 和 LPS 分别诱导的 T、B 淋巴细胞增殖的作用 | 第117页 |
·PSG-1 对荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响 | 第117-118页 |
·PSG-1 对 S180 荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞中 NO 和细胞因子分泌水平的影响 | 第118-119页 |
·PSG-1 对 TLR4 调节的 NF-κB 信号通路的影响 | 第119页 |
·PSG-1 对 MAPK 信号通路的影响 | 第119-120页 |
·讨论 | 第120-122页 |
·本章小结 | 第122-123页 |
第8章 黑灵芝多糖通过 G 蛋白介导的信号转导途径抑制 S180 荷瘤小鼠的肿瘤生长的研究 | 第123-140页 |
·引言 | 第123-124页 |
·实验材料与仪器 | 第124-125页 |
·实验细胞株 | 第124页 |
·实验动物 | 第124页 |
·主要试剂 | 第124页 |
·实验仪器 | 第124-125页 |
·实验方法 | 第125-128页 |
·S180 荷瘤小鼠模型的建立 | 第125页 |
·实验分组及饲养 | 第125页 |
·测定抑瘤率 | 第125页 |
·S180 荷瘤小鼠免疫器官指数的测定 | 第125-126页 |
·肿瘤细胞的制备 | 第126页 |
·流式细胞术检测细胞凋亡 | 第126页 |
·二酰基甘油(DG)和腺苷酸环化酶(AC)水平的测定 | 第126页 |
·cAMP 和 cGMP 浓度的测定 | 第126页 |
·PKA 和 PKC 活性的测定 | 第126页 |
·蛋白印迹法检测蛋白的表达 | 第126-127页 |
·Ca~(2+)浓度的测定 | 第127页 |
·中性红吞噬实验 | 第127页 |
·淋巴细胞增殖的测定 | 第127页 |
·数据处理 | 第127-128页 |
·结果与分析 | 第128-136页 |
·PSG-1 对 S180 小鼠移植瘤抑瘤率作用 | 第128页 |
·PSG-1 对 S180 荷瘤小鼠肿瘤细胞活力的影响 | 第128-129页 |
·PSG-1 对胸腺指数和脾指数的影响 | 第129-130页 |
·PSG-1 对腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响 | 第130页 |
·PSG-1 对淋巴细胞增殖的作用 | 第130-131页 |
·PSG-1 对 S180 肿瘤细胞凋亡的影响 | 第131-132页 |
·PSG-1 对荷瘤小鼠 S180 细胞内 AC 和 DG 水平的影响 | 第132-133页 |
·PSG-1 对荷瘤小鼠 S180 细胞内 cAMP 和 cGMP 水平的影响 | 第133-134页 |
·PSG-1 对荷瘤小鼠 S180 细胞内 PKA 和 PKC 活性的影响 | 第134-135页 |
·PSG-1 对荷瘤小鼠 S180 细胞内 PKA 和 PKC 蛋白表达的影响 | 第135页 |
·PSG-1 对荷瘤小鼠 S180 细胞内 Ca~(2+)的影响 | 第135-136页 |
·讨论 | 第136-139页 |
·本章小结 | 第139-140页 |
第9章 论文总结 | 第140-142页 |
致谢 | 第142-143页 |
参考文献 | 第143-158页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第158-160页 |
附录 | 第160-162页 |