| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-31页 |
| 1 产单核细胞李氏杆菌的研究进展 | 第11-18页 |
| ·产单核细胞李氏杆菌概述 | 第11页 |
| ·产单核细胞李氏杆菌致病机理 | 第11-18页 |
| 2 产单核细胞李氏杆菌作为活疫苗载体的研究概述 | 第18-20页 |
| ·LM活疫苗载体的基本原理 | 第18页 |
| ·LM活载体疫苗的构建 | 第18-20页 |
| ·减毒LM作为活疫苗载体的优势 | 第20页 |
| 3 疫苗佐剂 | 第20-23页 |
| ·铝盐类胶体佐剂 | 第21页 |
| ·弗氏佐剂(Freund's adjuvant,FA) | 第21页 |
| ·CpG | 第21-22页 |
| ·ActA作为一种新型免疫佐剂 | 第22-23页 |
| 4 本研究目的和意义 | 第23页 |
| 参考文献 | 第23-31页 |
| 第二章 表达EGFP的重组产单核细胞李氏杆菌的构建及其免疫特性研究 | 第31-51页 |
| 摘要 | 第31-32页 |
| 1 材料与方法 | 第32-42页 |
| ·试验材料 | 第32-33页 |
| ·引物设计与合成 | 第33页 |
| ·PCR扩增 | 第33-34页 |
| ·pUC19-Phly,pUC19-PactA,pUC19-egfp克隆载体的构建及鉴定 | 第34-35页 |
| ·pKSV7-Phly-egfp,pKSV7-PactA-egfp、pKSV7-Phly载体构建及鉴定 | 第35-36页 |
| ·pKSV7-Phly、pKSV7-Phly-egfp,pKSV7-PactA-egfp电转化至LM-1003 | 第36-37页 |
| ·细胞培养 | 第37页 |
| ·激光共聚焦显微镜下观察 | 第37-38页 |
| ·动物免疫实验 | 第38-42页 |
| 2 结果 | 第42-47页 |
| ·pKSV7-PactA-egfp,pKSV7-Phly-egfp质粒载体的构建 | 第42-43页 |
| ·荧光显微镜下观察LM1007,LM1010 | 第43-45页 |
| ·在激光共聚焦显微镜观察 | 第45页 |
| ·动物实验 | 第45-47页 |
| 3 讨论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-49页 |
| ABSTRACT | 第49-51页 |
| 第三章 产单核细胞李氏杆菌的ActA蛋白NH_2结构域(30-264aa)具分子佐剂特性 | 第51-63页 |
| 摘要 | 第51-52页 |
| 1 材料和方法 | 第52-57页 |
| ·实验材料 | 第52页 |
| ·绿色荧光蛋白EGFP的大肠杆菌表达与纯化 | 第52-54页 |
| ·ActA(30-264aa)的大肠杆菌表达与纯化 | 第54-56页 |
| ·EGFP与ActA蛋白纯化后切胶回收 | 第56页 |
| ·动物免疫实验 | 第56-57页 |
| 2 结果 | 第57-60页 |
| ·EGFP蛋白的表达与纯化 | 第57页 |
| ·ActA蛋白的表达与纯化 | 第57-58页 |
| ·动物实验 | 第58-60页 |
| 3 讨论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61页 |
| ABSTRACT | 第61-63页 |
| 全文总结 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65-67页 |
| 附录1 实验材料与仪器 | 第67-70页 |
| 附录2 培养基和溶液配方 | 第70-71页 |
