| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 縮略词表 | 第10-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-27页 |
| 第一章 大丽轮枝菌与棉花的互作机制 | 第11-15页 |
| 1 棉花黄萎病 | 第11-12页 |
| ·症状 | 第11页 |
| ·发病规律 | 第11-12页 |
| 2 病原菌 | 第12-13页 |
| ·寄主范围 | 第12页 |
| ·侵染循环 | 第12页 |
| ·致病机制 | 第12-13页 |
| 3 棉花的防御机制 | 第13-15页 |
| ·棉花对黄萎病的组织结构抗性 | 第13页 |
| ·棉花对黄萎病的生理生化抗性 | 第13-15页 |
| 第二章 MAPK途径的作用机制 | 第15-19页 |
| 1 植物体内的MAPK级联途径 | 第15-16页 |
| 2 植物体内MAPK途径的特点 | 第16-17页 |
| 3 植物中MAPK的分类 | 第17页 |
| 4 MAPK与植物病原信号传递 | 第17-19页 |
| 第三章 病毒诱导的基因沉默 | 第19-25页 |
| 1 病毒诱导基因沉默的作用机制 | 第19-20页 |
| 2 VIGS病毒载体 | 第20-21页 |
| 3 烟草脆裂病毒 | 第21-22页 |
| 4 VIGS的应用 | 第22-25页 |
| 本研究的目的和意义 | 第25-27页 |
| 第二部分 研究报告 | 第27-53页 |
| 第四章 棉花病毒诱导的基因沉默体系的建立 | 第27-45页 |
| 1 实验材料 | 第27-28页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·菌株与质粒 | 第27页 |
| ·酶与各种生化试剂 | 第27页 |
| ·常用溶液及培养基 | 第27-28页 |
| 2 实验方法 | 第28-36页 |
| ·CTAB-PVP法提取棉花总RNA | 第28-29页 |
| ·RNA的纯化 | 第29页 |
| ·cDNA第一条链的合成 | 第29-30页 |
| ·目的基因的克隆 | 第30页 |
| ·PCR扩增产物的电泳、回收、连接 | 第30-31页 |
| ·回收产物连接 | 第31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第31-33页 |
| ·载体的构建 | 第33页 |
| ·农杆菌介导基因沉默 | 第33-34页 |
| ·半定量实验 | 第34-36页 |
| 3 结果分析 | 第36-42页 |
| ·棉花叶片总RNA的提取与鉴定 | 第36页 |
| ·TRV在棉花植株中的扩散 | 第36-37页 |
| ·pTRV-GhCLAl沉默载体的构建 | 第37页 |
| ·不同浓度的农杆菌对沉默效果的影响 | 第37-39页 |
| ·TRV载体在不同棉花品种之间的差异 | 第39-41页 |
| ·农杆菌侵染后棉花RNA的提取及半定量RT-PCR分析 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-45页 |
| 第五章 沉默GhMAPK和GhMAPKKK对棉花黄萎病抗性的影响 | 第45-53页 |
| 1 实验材料 | 第45页 |
| 2 实验方法 | 第45-46页 |
| ·大丽轮枝菌的培养及接种 | 第45-46页 |
| 3 结果分析 | 第46-51页 |
| ·pTRV载体的构建 | 第46-48页 |
| ·目的基因的诱导表达分析 | 第48-49页 |
| ·半定量RT-PCR分析基因沉默效果 | 第49-50页 |
| ·沉默目的基因对棉花黄萎病抗性的影响 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 全文总结 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 附录 | 第61-65页 |
| 1 TRV沉默载体图谱 | 第61-62页 |
| 2 棉花GhCLA1基因序列 | 第62-63页 |
| 3 棉花黄萎病病情考查分级标准 | 第63-64页 |
| 4 棉花编号与品种对照表 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |