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甘薯抗病相关基因SGT1的克隆与表达研究

摘要第1-8页
Abstract第8-9页
1 文献综述第9-24页
   ·甘薯第9-11页
     ·甘薯的价值第9-10页
     ·甘薯的病害现状第10页
     ·甘薯病害防治措施第10-11页
   ·植物抗病基因研究进展第11-14页
     ·植物抗病基因研究意义第11-12页
     ·植物抗病基因研究现状第12页
     ·植物抗病基因的分类第12-14页
     ·植物抗病基因的展望第14页
   ·植物抗病相关基因SGT1研究进展第14-20页
     ·SGT1的蛋白结构及其作用机制第14-16页
     ·SGT1对不同植物抗病性的影响第16-17页
     ·抗病基因全长的获得途径第17-20页
   ·植物转基因方法研究进展第20-22页
     ·农杆菌介导法第20-21页
     ·花粉管通道法第21-22页
     ·基因枪法第22页
   ·研究目的与意义第22-24页
2 材料与方法第24-37页
   ·实验器材第24-25页
     ·植物材料第24页
     ·菌种和载体第24页
     ·主要试剂第24页
     ·主要仪器设备及器材第24-25页
   ·实验方法第25-37页
     ·甘薯叶片总RNA的提取与检测第25页
     ·甘薯SGT1基因片段的RT-PCR扩增第25-27页
     ·SGT1基因片段的回收、连接与转化第27-28页
     ·SGT1基因cDNA全长的RACE扩增第28-32页
     ·目的片段的回收、连接与转化第32页
     ·SGT1基因于甘薯中的组织特异性表达检测第32-33页
     ·植物表达载体的构建第33-34页
     ·农杆菌介导转化烟草获得转基因苗第34-36页
     ·转基因烟草苗的鉴定第36-37页
3 结果与分析第37-56页
   ·甘薯总RNA的提取与检测第37页
   ·甘薯SGT1基因部分编码区的获得第37-39页
   ·甘薯SGT1基因部分编码区的序列测定第39页
   ·目的基因3’端和5’端的扩增第39-41页
     ·目的基因3’端的扩增第39-40页
     ·目的基因5’端的扩增第40-41页
   ·甘薯SGT1基因核苷酸序列分析第41-45页
   ·甘薯SGT1基因编码的氨基酸序列分析第45-49页
   ·甘薯SGT1编码蛋白分析第49-50页
     ·二级结构分析第49页
     ·疏水性分析第49-50页
   ·SGT1基因于甘薯中的组织特异性表达检测第50-51页
   ·植物真核表达载体的构建第51-52页
   ·叶盘法转化烟草第52-53页
   ·转基因烟草阳性植株的鉴定第53-56页
     ·PCR检测第53-54页
     ·RT-PCR检测第54-55页
     ·抗病性检测第55-56页
4 讨论第56-59页
   ·甘薯抗病相关基因SGT1序列全长的克隆第56-57页
   ·甘薯SGT1基因转化烟草第57页
   ·转基因烟草的检测第57-59页
5 结论第59-60页
参考文献第60-67页
附录1:载体图谱第67-68页
附录2:MS培养基母液配制第68-69页
附录3:缩写词第69-70页
致谢第70页

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