甘薯抗病相关基因SGT1的克隆与表达研究
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-24页 |
| ·甘薯 | 第9-11页 |
| ·甘薯的价值 | 第9-10页 |
| ·甘薯的病害现状 | 第10页 |
| ·甘薯病害防治措施 | 第10-11页 |
| ·植物抗病基因研究进展 | 第11-14页 |
| ·植物抗病基因研究意义 | 第11-12页 |
| ·植物抗病基因研究现状 | 第12页 |
| ·植物抗病基因的分类 | 第12-14页 |
| ·植物抗病基因的展望 | 第14页 |
| ·植物抗病相关基因SGT1研究进展 | 第14-20页 |
| ·SGT1的蛋白结构及其作用机制 | 第14-16页 |
| ·SGT1对不同植物抗病性的影响 | 第16-17页 |
| ·抗病基因全长的获得途径 | 第17-20页 |
| ·植物转基因方法研究进展 | 第20-22页 |
| ·农杆菌介导法 | 第20-21页 |
| ·花粉管通道法 | 第21-22页 |
| ·基因枪法 | 第22页 |
| ·研究目的与意义 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-37页 |
| ·实验器材 | 第24-25页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·菌种和载体 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器设备及器材 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-37页 |
| ·甘薯叶片总RNA的提取与检测 | 第25页 |
| ·甘薯SGT1基因片段的RT-PCR扩增 | 第25-27页 |
| ·SGT1基因片段的回收、连接与转化 | 第27-28页 |
| ·SGT1基因cDNA全长的RACE扩增 | 第28-32页 |
| ·目的片段的回收、连接与转化 | 第32页 |
| ·SGT1基因于甘薯中的组织特异性表达检测 | 第32-33页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第33-34页 |
| ·农杆菌介导转化烟草获得转基因苗 | 第34-36页 |
| ·转基因烟草苗的鉴定 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-56页 |
| ·甘薯总RNA的提取与检测 | 第37页 |
| ·甘薯SGT1基因部分编码区的获得 | 第37-39页 |
| ·甘薯SGT1基因部分编码区的序列测定 | 第39页 |
| ·目的基因3’端和5’端的扩增 | 第39-41页 |
| ·目的基因3’端的扩增 | 第39-40页 |
| ·目的基因5’端的扩增 | 第40-41页 |
| ·甘薯SGT1基因核苷酸序列分析 | 第41-45页 |
| ·甘薯SGT1基因编码的氨基酸序列分析 | 第45-49页 |
| ·甘薯SGT1编码蛋白分析 | 第49-50页 |
| ·二级结构分析 | 第49页 |
| ·疏水性分析 | 第49-50页 |
| ·SGT1基因于甘薯中的组织特异性表达检测 | 第50-51页 |
| ·植物真核表达载体的构建 | 第51-52页 |
| ·叶盘法转化烟草 | 第52-53页 |
| ·转基因烟草阳性植株的鉴定 | 第53-56页 |
| ·PCR检测 | 第53-54页 |
| ·RT-PCR检测 | 第54-55页 |
| ·抗病性检测 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-59页 |
| ·甘薯抗病相关基因SGT1序列全长的克隆 | 第56-57页 |
| ·甘薯SGT1基因转化烟草 | 第57页 |
| ·转基因烟草的检测 | 第57-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 附录1:载体图谱 | 第67-68页 |
| 附录2:MS培养基母液配制 | 第68-69页 |
| 附录3:缩写词 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |