| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-20页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征 | 第11-15页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征流行病学概述 | 第11页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒分子病原学 | 第11-12页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒的检测技术 | 第12-15页 |
| ·高致病性猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗 | 第15-16页 |
| ·弱毒疫苗培育 | 第15页 |
| ·商品化弱毒疫苗的安全性试验 | 第15页 |
| ·商品化弱毒疫苗的效力试验 | 第15-16页 |
| ·生物标准物质 | 第16-17页 |
| ·定义 | 第16页 |
| ·特点 | 第16页 |
| ·分级与种类 | 第16页 |
| ·国内外现状 | 第16-17页 |
| ·疫苗参考品的效力值 | 第17-18页 |
| ·课题研究的目的和意义 | 第18-20页 |
| 第二章 高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1-R株)国家参考品制备技术研究 | 第20-31页 |
| ·前言 | 第20-21页 |
| ·实验材料 | 第21页 |
| ·试验用仪器 | 第21页 |
| ·试验用试剂 | 第21页 |
| ·试验用其他材料 | 第21页 |
| ·制备方法的依据 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-22页 |
| ·参考品的制备与特性值的测定 | 第22-25页 |
| ·实验结果 | 第25-29页 |
| ·参考品候选物的筛选 | 第25页 |
| ·参考品制备和各项特性值的定值 | 第25-29页 |
| ·讨论 | 第29-30页 |
| ·高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1-R株)国家参考品的制备与各项特性值的测定 | 第29-30页 |
| ·高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1-R株)国家参考品稳定性考察 | 第30页 |
| ·小结 | 第30-31页 |
| 第三章 高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1-R株)荧光定量PCR方法的建立 | 第31-43页 |
| ·前言 | 第31页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·试验用仪器 | 第31页 |
| ·试验试剂 | 第31页 |
| ·试验用其他材料 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-35页 |
| ·引物与探针的设计 | 第32页 |
| ·标准质粒的构建 | 第32-34页 |
| ·RNA的提取 | 第32页 |
| ·目的片段的扩增与鉴定 | 第32页 |
| ·PCR产物的回收 | 第32-33页 |
| ·重组质粒的构建、增殖 | 第33页 |
| ·重组质粒的提取 | 第33页 |
| ·重组质粒的的鉴定 | 第33-34页 |
| ·荧光定量RT-PCR反应条件的建立和优化 | 第34页 |
| ·引物退火温度的优化 | 第34页 |
| ·引物、探针浓度的优化 | 第34页 |
| ·引物特异性试验 | 第34页 |
| ·检验灵敏性试验 | 第34页 |
| ·稳定性试验 | 第34页 |
| ·重复性试验 | 第34页 |
| ·参考品的荧光定量方法初定值 | 第34页 |
| ·PRRSV的热失活处理 | 第34-35页 |
| ·实验结果 | 第35-42页 |
| ·标准质粒的构建 | 第35-36页 |
| ·目的片段的扩增与鉴定 | 第35页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第35-36页 |
| ·引物退火温度的优化 | 第36页 |
| ·引物、探针浓度的优化 | 第36-37页 |
| ·引物特异性试验 | 第37-38页 |
| ·检验灵敏性试验 | 第38-39页 |
| ·稳定性试验 | 第39-40页 |
| ·重复性试验 | 第40-41页 |
| ·荧光定量PCR | 第41页 |
| ·参考品效力值的初定值 | 第41-42页 |
| ·PRRSV的热失活处理 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第四章 应用荧光定量PCR方法测定高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1-R株)参考品效力值 | 第43-49页 |
| ·前言 | 第43页 |
| ·实验材料 | 第43-44页 |
| ·试验用仪器 | 第43页 |
| ·试验试剂 | 第43页 |
| ·试验用其他材料 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44页 |
| ·结果 | 第44-47页 |
| ·讨论 | 第47页 |
| ·小结 | 第47-49页 |
| 第五章 高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1-R株)国家参考品协作标定 | 第49-53页 |
| ·前言 | 第49页 |
| ·实验材料 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-50页 |
| ·定值方法 | 第49页 |
| ·协作单位的确定 | 第49-50页 |
| ·发放协作标定材料 | 第50页 |
| ·协作标定结果的统计分析 | 第50页 |
| ·半数组织培养感染量(TCID_(50))试验所有定值数据的格拉布斯(Grubbs)检验 | 第50页 |
| ·半数组织培养感染量(TCID_(50))试验所有定值数据的正态性检验 | 第50页 |
| ·半数组织培养感染量(TCID_(50))试验定值结果的确定及不确定度的评定 | 第50页 |
| ·定值结果 | 第50-52页 |
| ·定值数据的格拉布斯(Grubbs)检验 | 第50-51页 |
| ·定值数据的正态性检验 | 第51-52页 |
| ·定值 | 第52页 |
| ·讨论 | 第52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 第六章 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 附录一 高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征(JXA1-R株)国家参考品研究技术路线 | 第59-60页 |
| 附录二 本实验用到的溶液和培养基 | 第60-62页 |
| 附录三 高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1-R株)国家参考品协作标定方案 | 第62-64页 |
| 作者简历 | 第64页 |
