摘要 | 第1-12页 |
Abstract | 第12-16页 |
第一部分 泛素连接酶 Cbl-b 参与缺血预处理对 PI3K/Akt 通路的调控 | 第16-45页 |
前言 | 第16-17页 |
材料与方法 | 第17-26页 |
1. 材料 | 第17-18页 |
·细胞株 | 第17页 |
·试剂 | 第17-18页 |
·仪器 | 第18页 |
2. 实验方法 | 第18-26页 |
·PC12 细胞培养 | 第18-19页 |
·氧糖剥夺 | 第19页 |
·氧糖剥夺预处理 | 第19页 |
·MTT 检测细胞存活率 | 第19页 |
·Hoechst 33258 细胞核染色检测凋亡细胞 | 第19页 |
·Real time PCR | 第19-21页 |
·蛋白质免疫印迹(Western blot) | 第21-26页 |
·统计学处理 | 第26页 |
结果 | 第26-38页 |
1. 预处理防止 OGD 诱导的细胞死亡 | 第26-28页 |
2. Cbl-b 参与 OGD 预处理过程 | 第28-32页 |
3. Cbl-b 对 OGD 预处理的反应大于 Akt 的激活 | 第32-34页 |
4. OGD 预处理过程中 Akt 活性调节 GSK3β磷酸化 | 第34-36页 |
5. Akt 活性在 OGD 预处理过程中调控细胞的凋亡 | 第36-38页 |
讨论 | 第38-41页 |
结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-45页 |
第二部分 Ca~(2+)/CaN 参与缺血预处理对 Cbl-b 的调控 | 第45-62页 |
前言 | 第45-46页 |
材料与方法 | 第46-48页 |
1. 材料 | 第46页 |
·细胞株 | 第46页 |
·试剂 | 第46页 |
2. 实验方法 | 第46-48页 |
·PC12 细胞培养 | 第46-47页 |
·氧糖剥夺 | 第47页 |
·氧糖剥夺预处理 | 第47页 |
·MTT 检测细胞存活率 | 第47页 |
·蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第47-48页 |
结果 | 第48-56页 |
1. OGD 缺血预处理降低缺血导致 CaN 表达的增加 | 第48-50页 |
2. 不同时间点 CaN 与 Cbl-b 的对应表达 | 第50-51页 |
3. A23187 对预处理组 CaN 和 Cbl-b 表达的影响 | 第51-53页 |
4. 钙离子调控药物在缺血过程中对 CaN 和 Cbl-b 表达的影响 | 第53-56页 |
讨论 | 第56-59页 |
结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-62页 |
第三部分 Ca~(2+)/CaN/Cbl-b/Akt 在尼莫地平和 MK801 药物预处理中的作用研究 | 第62-77页 |
前言 | 第62-63页 |
材料和方法 | 第63-65页 |
1. 材料 | 第63-64页 |
·细胞株 | 第63页 |
·试剂 | 第63-64页 |
2. 实验方法 | 第64-65页 |
·PC12 细胞培养 | 第64页 |
·氧糖剥夺 | 第64页 |
·氧糖剥夺预处理 | 第64页 |
·MTT 检测细胞存活率 | 第64-65页 |
·Hoechst 33258 细胞核染色检测凋亡细胞 | 第65页 |
·蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第65页 |
结果 | 第65-70页 |
1. 尼莫地平或 MK801 预处理抑制 OGD 诱导的细胞死亡 | 第65-67页 |
2. 尼莫地平或 MK801 预处理对 CaN、Cbl-b、PI3K 及 p-GSK3 β表达的影响 | 第67-68页 |
3. 尼莫地平或 M K 801 预处理调控细胞的凋亡 | 第68-70页 |
讨论 | 第70-74页 |
结论 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-77页 |
综述 | 第77-92页 |
参考文献 | 第85-92页 |
附录 | 第92-93页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第93-94页 |
致谢 | 第94-95页 |