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Ca2+/CaN/Cbl-b/Akt在缺血及药物预处理中的作用研究

摘要第1-12页
Abstract第12-16页
第一部分 泛素连接酶 Cbl-b 参与缺血预处理对 PI3K/Akt 通路的调控第16-45页
 前言第16-17页
 材料与方法第17-26页
  1. 材料第17-18页
   ·细胞株第17页
   ·试剂第17-18页
   ·仪器第18页
  2. 实验方法第18-26页
   ·PC12 细胞培养第18-19页
   ·氧糖剥夺第19页
   ·氧糖剥夺预处理第19页
   ·MTT 检测细胞存活率第19页
   ·Hoechst 33258 细胞核染色检测凋亡细胞第19页
   ·Real time PCR第19-21页
   ·蛋白质免疫印迹(Western blot)第21-26页
   ·统计学处理第26页
 结果第26-38页
  1. 预处理防止 OGD 诱导的细胞死亡第26-28页
  2. Cbl-b 参与 OGD 预处理过程第28-32页
  3. Cbl-b 对 OGD 预处理的反应大于 Akt 的激活第32-34页
  4. OGD 预处理过程中 Akt 活性调节 GSK3β磷酸化第34-36页
  5. Akt 活性在 OGD 预处理过程中调控细胞的凋亡第36-38页
 讨论第38-41页
 结论第41-42页
 参考文献第42-45页
第二部分 Ca~(2+)/CaN 参与缺血预处理对 Cbl-b 的调控第45-62页
 前言第45-46页
 材料与方法第46-48页
  1. 材料第46页
   ·细胞株第46页
   ·试剂第46页
  2. 实验方法第46-48页
   ·PC12 细胞培养第46-47页
   ·氧糖剥夺第47页
   ·氧糖剥夺预处理第47页
   ·MTT 检测细胞存活率第47页
   ·蛋白质免疫印迹(Western Blot)第47-48页
 结果第48-56页
  1. OGD 缺血预处理降低缺血导致 CaN 表达的增加第48-50页
  2. 不同时间点 CaN 与 Cbl-b 的对应表达第50-51页
  3. A23187 对预处理组 CaN 和 Cbl-b 表达的影响第51-53页
  4. 钙离子调控药物在缺血过程中对 CaN 和 Cbl-b 表达的影响第53-56页
 讨论第56-59页
 结论第59-60页
 参考文献第60-62页
第三部分 Ca~(2+)/CaN/Cbl-b/Akt 在尼莫地平和 MK801 药物预处理中的作用研究第62-77页
 前言第62-63页
 材料和方法第63-65页
  1. 材料第63-64页
   ·细胞株第63页
   ·试剂第63-64页
  2. 实验方法第64-65页
   ·PC12 细胞培养第64页
   ·氧糖剥夺第64页
   ·氧糖剥夺预处理第64页
   ·MTT 检测细胞存活率第64-65页
   ·Hoechst 33258 细胞核染色检测凋亡细胞第65页
   ·蛋白质免疫印迹(Western Blot)第65页
 结果第65-70页
  1. 尼莫地平或 MK801 预处理抑制 OGD 诱导的细胞死亡第65-67页
  2. 尼莫地平或 MK801 预处理对 CaN、Cbl-b、PI3K 及 p-GSK3 β表达的影响第67-68页
  3. 尼莫地平或 M K 801 预处理调控细胞的凋亡第68-70页
 讨论第70-74页
 结论第74-75页
 参考文献第75-77页
综述第77-92页
 参考文献第85-92页
附录第92-93页
攻读学位期间发表论文情况第93-94页
致谢第94-95页

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