| 摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 缩略词表 | 第16-17页 |
| 第一部分 文献综述 | 第17-33页 |
| 1 研究背景 | 第17-20页 |
| ·提高精液品质的重要性 | 第17页 |
| ·增强抗病性的重要性 | 第17-19页 |
| ·运输应激对动物生产的影响 | 第19-20页 |
| 2 奶牛精液品质和抗病性状相关基因研究进展 | 第20-24页 |
| ·BMP15基因研究进展 | 第20-22页 |
| ·BMP15基因的表达 | 第20-21页 |
| ·BMP15的生物学功能 | 第21页 |
| ·BMP15基因突变对生殖的影响 | 第21-22页 |
| ·Toll样受体基因家族研究进展 | 第22-24页 |
| 3 运输应激对奶牛繁殖的影响 | 第24-29页 |
| ·运输应激对种公牛繁殖的影响 | 第24-28页 |
| ·精子发生的调节机制 | 第24-27页 |
| ·运输应激对种公牛繁殖的影响 | 第27-28页 |
| ·运输应激对母牛生殖的影响 | 第28页 |
| ·运输应激的危害 | 第28-29页 |
| ·以小鼠为模型研究运输应激对奶牛生殖的影响 | 第29页 |
| 4 分子生物学技术 | 第29-31页 |
| ·直接选择 | 第29页 |
| ·分子标记辅助选择 | 第29-30页 |
| ·表达谱芯片 | 第30-31页 |
| 5 研究的目的和意义 | 第31-33页 |
| 第二部分 试验研究 | 第33-92页 |
| 试验研究一 BMP15基因多态性与牛精液品质性状的相关性 | 第33-42页 |
| 1 引言 | 第33-34页 |
| 2 材料和方法 | 第34-37页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·试验样品的采集 | 第34页 |
| ·主要仪器设备 | 第34-35页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第35页 |
| ·试验方法 | 第35-37页 |
| ·基因组DNA的提取与检测 | 第35页 |
| ·引物设计和PCR反应 | 第35-36页 |
| ·PCR-SSCP突变位点的筛查 | 第36-37页 |
| ·PCR产物的回收和测序 | 第37页 |
| ·PCR产物的酶切基因分型 | 第37页 |
| ·统计分析 | 第37页 |
| 3 结果 | 第37-40页 |
| ·PCR扩增产物 | 第37-38页 |
| ·RFLP基因分型 | 第38页 |
| ·基因型频率和等位基因频率 | 第38-39页 |
| ·基因多态性与生产性状的相关分析 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40页 |
| 5 小结 | 第40-42页 |
| 试验研究二 TLR基因多态性与奶牛乳腺炎、结核及布病的相关性分析 | 第42-65页 |
| 1 引言 | 第42-43页 |
| 2 材料和方法 | 第43-47页 |
| ·试验材料 | 第43页 |
| ·试验动物 | 第43页 |
| ·试验样品的采集 | 第43页 |
| ·主要仪器设备 | 第43页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第43页 |
| ·主要溶液的配制 | 第43页 |
| ·试验方法 | 第43-46页 |
| ·试验数据的收集 | 第43-44页 |
| ·基因组DNA的提取与检测 | 第44页 |
| ·引物设计和PCR反应 | 第44-45页 |
| ·PCR-SSCP进行突变位点的筛查 | 第45页 |
| ·PCR产物的回收和测序 | 第45-46页 |
| ·PCR产物的酶切基因分型 | 第46页 |
| ·统计分析 | 第46-47页 |
| 3 结果 | 第47-60页 |
| ·基因组DNA提取 | 第47页 |
| ·TLR1基因 | 第47-50页 |
| ·PCR扩增 | 第47页 |
| ·RFLP基因分型 | 第47-49页 |
| ·TLR1基因多态性与牛结核易感性的相关分析 | 第49-50页 |
| ·TLR2基因 | 第50-53页 |
| ·PCR扩增 | 第50页 |
| ·RFLP基因分型 | 第50-51页 |
| ·基因型频率和等位基因频率 | 第51-52页 |
| ·基因多态性与奶牛体细胞评分的相关分析 | 第52页 |
| ·基因多态性与奶牛布病易感性的相关分析 | 第52-53页 |
| ·TLR4基因 | 第53-55页 |
| ·PCR扩增 | 第53-54页 |
| ·RFLP基因分型 | 第54页 |
| ·基因型和等位基因在牛结核感染组和对照组的分布 | 第54-55页 |
| ·TLR6基因 | 第55-58页 |
| ·PCR扩增 | 第55页 |
| ·RFLP基因分型 | 第55-56页 |
| ·基因型频率和等位基因频率 | 第56-57页 |
| ·TLR6基因多态性与牛结核易感性的相关分析 | 第57-58页 |
| ·TLR9基因 | 第58-60页 |
| ·PCR扩增 | 第58-59页 |
| ·多态位点基因分型 | 第59页 |
| ·基因型频率和等位基因频率 | 第59-60页 |
| ·TLR9基因多态性与奶牛结核和布病易感性的相关分析 | 第60页 |
| 4 讨论 | 第60-64页 |
| ·TLR基因变异与奶牛结核易感性 | 第60-62页 |
| ·TLR2和TLR9基因变异与奶牛布病易感性 | 第62-63页 |
| ·TLR2基因变异与奶牛乳腺炎易感性 | 第63-64页 |
| 5 小结 | 第64-65页 |
| 试验研究三 运输应激对雄性生殖的影响及其分子机制研究 | 第65-77页 |
| 1 引言 | 第65页 |
| 2 材料和方法 | 第65-72页 |
| ·试验材料 | 第65-67页 |
| ·试验动物 | 第65-66页 |
| ·主要仪器 | 第66页 |
| ·主要试剂 | 第66页 |
| ·运输应激动物模型的建立和样品的采集 | 第66-67页 |
| ·试验方法 | 第67-72页 |
| ·石蜡切片的制备 | 第67页 |
| ·常规HE染色 | 第67页 |
| ·脏器指数和体重的称量 | 第67页 |
| ·附睾尾精子计数 | 第67页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第67-70页 |
| ·Western blot检测 | 第70-72页 |
| 3 结果 | 第72-74页 |
| ·运输应激对实验小鼠睾丸、附睾重量及其指数、精子相对计数的影响 | 第72页 |
| ·睾丸组织结构变化 | 第72-73页 |
| ·运输应激对小鼠睾丸组织中LHR,AR和Hsp70表达的影响 | 第73-74页 |
| ·睾丸组织总RNA的提取和反转录 | 第73页 |
| ·生殖相关基因mRNA表达差异的检测 | 第73-74页 |
| ·LHR和Hsp70蛋白表达的检测 | 第74页 |
| 4 讨论 | 第74-76页 |
| 5 结论 | 第76-77页 |
| 试验研究四 以鼠为模型研究妊娠对运输应激的分子调控机制 | 第77-92页 |
| 1 引言 | 第77页 |
| 2 材料和方法 | 第77-79页 |
| ·材料 | 第77-78页 |
| ·试验动物和样品的采集 | 第77-78页 |
| ·主要仪器设备 | 第78页 |
| ·主要试剂 | 第78页 |
| ·主要生物信息学软件及数据库 | 第78页 |
| ·方法 | 第78-79页 |
| ·组织总RNA的提取 | 第78页 |
| ·芯片杂交和扫描 | 第78-79页 |
| ·统计分析 | 第79页 |
| 3 结果 | 第79-89页 |
| ·运输应激对孕鼠胚胎发育的影响 | 第79页 |
| ·筛选的差异基因 | 第79-80页 |
| ·差异基因的聚类分析 | 第80-81页 |
| ·差异表达基因类型 | 第81-84页 |
| ·差异表达基因的功能注释 | 第84-89页 |
| 4 讨论 | 第89-90页 |
| 5 小结 | 第90-92页 |
| 全文结论、创新点及下一步计划 | 第92-95页 |
| 参考文献 | 第95-116页 |
| 附录攻读博士期间发表的论文 | 第116-118页 |
| 致谢 | 第118-119页 |
