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猪附红细胞体病间接ELISA检测方法的建立与初步应用

摘要第1-7页
Abstract第7-10页
1 文献综述第10-16页
   ·猪附红细胞体病的诊断方法第11-14页
     ·猪附红细胞体病的病原学诊断方法第11-12页
     ·免疫学诊断第12-13页
     ·分子生物学诊断第13-14页
   ·国内外流行病学调查第14-16页
2 研究目的与意义第16-17页
3 材料与方法第17-23页
   ·主要的仪器与设备第17页
   ·实验材料第17页
   ·主要溶液的配制第17-19页
     ·SDS-PAGE缓冲液第17-18页
     ·培养基第18页
     ·ELISA缓冲液第18页
     ·其它溶液第18-19页
   ·实验方法第19-20页
     ·重组蛋白的表达与SDS-PAGE检测第19页
     ·重组蛋白ELISA检测方法的操作步骤第19-20页
     ·MSG1-ELISA操作步骤第20页
     ·PCR方法检测病原第20页
   ·重组蛋白PFK-ELISA、ALD-ELISA、GAPDH-ELISA检测方法的建立第20-21页
     ·抗原最佳包被浓度与血清稀释度的确定第20-21页
     ·最佳封闭液浓度和最佳封闭时间的确定第21页
     ·血清最佳作用时间的确定第21页
     ·酶标二抗的最佳工作浓度和最佳作用时间的确定第21页
     ·ELISA判定标准的确定第21页
   ·PFK-ELISA、ALD-ELISA、GAPDH-ELISA与MSG1-ELISA的比较第21页
   ·湖北省及周边地区规模化猪场猪附红细胞体病流行病学调查第21-23页
4 实验结果第23-37页
   ·PFK、ALD、GAPDH可溶性重组蛋白的提取和纯化第23页
   ·重组蛋白PFK-ELISA、ALD-ELISA、GAPDH-ELISA检测方法的建立第23-29页
     ·抗原最佳包被浓度与血清稀释度的确定第23-25页
     ·最佳封闭液浓度和最佳封闭时间的确定第25-26页
     ·血清最佳作用时间的确定第26-27页
     ·酶标二抗最佳工作浓度和最佳作用时间的确定第27-29页
     ·ELISA判定标准的确定第29页
   ·PFK-ELISA、ALD-ELISA、GAPDH-ELISA与MSG1-ELISA的比较第29-34页
   ·湖北省及周边地区规模化猪场猪附红细胞体病流行病学调查第34-37页
     ·规模化猪场不同年龄阶段猪的猪附红细胞体病流行病学调查第34-35页
     ·规模化猪场不同季节猪附红细胞体病的流行病学调查第35-37页
5 讨论第37-40页
   ·猪附红细胞体病检测方法的选择第37-38页
   ·流行病学调查结果分析与讨论第38-40页
6 结论第40-41页
参考文献第41-47页
致谢第47页

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