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苦荞10kDa过敏原的重组表达及性质研究

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 文献综述第12-27页
   ·苦荞麦简介第12-14页
     ·苦荞麦的营养价值第12-13页
     ·苦荞麦的药用价值第13-14页
     ·苦荞麦的食用价值第14页
   ·食物过敏第14-21页
     ·食物过敏症状第15页
     ·食物过敏的类型第15-17页
     ·食物过敏的机制第17-19页
     ·食物过敏原的特征第19-20页
     ·食物过敏的治疗第20-21页
   ·荞麦过敏的研究第21-26页
     ·荞麦过敏症状研究进展第22-23页
     ·荞麦过敏蛋白的相关研究第23-24页
     ·荞麦过敏蛋白的检测第24-26页
   ·选题目的、意义及研究内容第26-27页
第二章 苦荞 10kDa 过敏原基因的生物信息学分析第27-30页
   ·材料第27页
   ·方法第27页
     ·苦荞 10kDa 过敏原的序列分析第27页
     ·苦荞 10kDa 过敏原的功能结构域预测第27页
     ·苦荞 10kDa 过敏原的亲疏水性分析第27页
   ·结果第27-29页
     ·苦荞 10kDa 过敏原的序列分析第27-28页
     ·苦荞 10kDa 过敏原的功能结构域分析第28页
     ·苦荞 10kDa 过敏原的亲疏水性分析第28-29页
   ·讨论第29-30页
第三章 苦荞 10kDa 过敏原原核表达载体的构建第30-38页
   ·材料第30-31页
     ·菌种和质粒第30页
     ·主要实验仪器第30页
     ·主要试剂第30页
     ·主要溶液第30-31页
   ·方法第31-35页
     ·TBAP10 基因的扩增第31-32页
     ·TBAP10 基因原核表达载体的构建第32-34页
     ·连接产物的双酶切鉴定第34-35页
   ·结果第35-37页
     ·苦荞 10kDa 过敏原基因的 PCR 扩增第35-36页
     ·重组质粒的双酶切鉴定第36页
     ·测序鉴定第36-37页
   ·讨论第37-38页
第四章 重组的蛋白 TBAP10 的诱导表达及分离纯化第38-48页
   ·材料第38-40页
     ·菌株第38页
     ·主要仪器第38页
     ·试剂第38-40页
   ·方法第40-43页
     ·重组蛋白的诱导表达第40页
     ·目的蛋白 SDS-PAGE 的检测第40-41页
     ·重组蛋白的可溶性分析第41-42页
     ·包涵体的纯化第42页
     ·包涵体的复性第42页
     ·钴离子螯合层析纯化 TBAP10第42页
     ·His 标签的鉴定第42-43页
   ·结果第43-46页
     ·重组蛋白的诱导表达和 SDS-PAGE 分析第43页
     ·重组蛋白的可溶性分析第43-44页
     ·包涵体的纯化第44页
     ·包涵体的复性及钴离子螯合层析柱纯化目的蛋白第44-45页
     ·重组蛋白 His 标签的鉴定第45-46页
   ·讨论第46-48页
第五章 重组蛋白免疫活性的鉴定第48-54页
   ·材料第48-49页
     ·血清第48页
     ·考马斯亮蓝法 G-250 测定蛋白浓度试剂第48页
     ·Western blotting 试剂第48页
     ·ELISA 试剂第48-49页
     ·主要仪器第49页
   ·方法第49-51页
     ·考马斯亮蓝法 G-250 测定蛋白浓度第49-50页
     ·Western blotting 步骤第50-51页
     ·竞争性 ELISA 步骤第51页
   ·结果第51-52页
     ·考马斯亮蓝法 G-250 测定蛋白浓度第51页
     ·Western blotting 鉴定重组蛋白第51-52页
     ·竞争性 ELISA 检测重组蛋白 TBAP10 的 IgE 结合活性第52页
   ·讨论第52-54页
第六章 重组蛋白的稳定性分析及与α-淀粉酶之间的关系第54-61页
   ·材料第54页
     ·蛋白溶液第54页
     ·模拟胃液第54页
     ·模拟肠液第54页
     ·α-淀粉酶溶液配制第54页
     ·SDS-PAGE 溶液第54页
   ·方法第54-56页
     ·TBAP10 的热稳定性分析第54-55页
     ·蛋白溶液在模拟胃液环境中的稳定性第55页
     ·蛋白溶液在模拟肠液环境中的稳定性第55页
     ·TBAP10 与α-淀粉酶的关系第55-56页
   ·结果第56-60页
     ·TBAP10 的热稳定性分析第56-57页
     ·蛋白溶液在模拟胃液的稳定性第57页
     ·蛋白溶液在模拟肠液中的稳定性第57-58页
     ·TBAP10 与α-淀粉酶的关系第58-60页
   ·讨论第60-61页
第七章 总结第61-62页
参考文献第62-69页
附录第69-71页
致谢第71-72页
作者简介第72页

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