摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-27页 |
·苦荞麦简介 | 第12-14页 |
·苦荞麦的营养价值 | 第12-13页 |
·苦荞麦的药用价值 | 第13-14页 |
·苦荞麦的食用价值 | 第14页 |
·食物过敏 | 第14-21页 |
·食物过敏症状 | 第15页 |
·食物过敏的类型 | 第15-17页 |
·食物过敏的机制 | 第17-19页 |
·食物过敏原的特征 | 第19-20页 |
·食物过敏的治疗 | 第20-21页 |
·荞麦过敏的研究 | 第21-26页 |
·荞麦过敏症状研究进展 | 第22-23页 |
·荞麦过敏蛋白的相关研究 | 第23-24页 |
·荞麦过敏蛋白的检测 | 第24-26页 |
·选题目的、意义及研究内容 | 第26-27页 |
第二章 苦荞 10kDa 过敏原基因的生物信息学分析 | 第27-30页 |
·材料 | 第27页 |
·方法 | 第27页 |
·苦荞 10kDa 过敏原的序列分析 | 第27页 |
·苦荞 10kDa 过敏原的功能结构域预测 | 第27页 |
·苦荞 10kDa 过敏原的亲疏水性分析 | 第27页 |
·结果 | 第27-29页 |
·苦荞 10kDa 过敏原的序列分析 | 第27-28页 |
·苦荞 10kDa 过敏原的功能结构域分析 | 第28页 |
·苦荞 10kDa 过敏原的亲疏水性分析 | 第28-29页 |
·讨论 | 第29-30页 |
第三章 苦荞 10kDa 过敏原原核表达载体的构建 | 第30-38页 |
·材料 | 第30-31页 |
·菌种和质粒 | 第30页 |
·主要实验仪器 | 第30页 |
·主要试剂 | 第30页 |
·主要溶液 | 第30-31页 |
·方法 | 第31-35页 |
·TBAP10 基因的扩增 | 第31-32页 |
·TBAP10 基因原核表达载体的构建 | 第32-34页 |
·连接产物的双酶切鉴定 | 第34-35页 |
·结果 | 第35-37页 |
·苦荞 10kDa 过敏原基因的 PCR 扩增 | 第35-36页 |
·重组质粒的双酶切鉴定 | 第36页 |
·测序鉴定 | 第36-37页 |
·讨论 | 第37-38页 |
第四章 重组的蛋白 TBAP10 的诱导表达及分离纯化 | 第38-48页 |
·材料 | 第38-40页 |
·菌株 | 第38页 |
·主要仪器 | 第38页 |
·试剂 | 第38-40页 |
·方法 | 第40-43页 |
·重组蛋白的诱导表达 | 第40页 |
·目的蛋白 SDS-PAGE 的检测 | 第40-41页 |
·重组蛋白的可溶性分析 | 第41-42页 |
·包涵体的纯化 | 第42页 |
·包涵体的复性 | 第42页 |
·钴离子螯合层析纯化 TBAP10 | 第42页 |
·His 标签的鉴定 | 第42-43页 |
·结果 | 第43-46页 |
·重组蛋白的诱导表达和 SDS-PAGE 分析 | 第43页 |
·重组蛋白的可溶性分析 | 第43-44页 |
·包涵体的纯化 | 第44页 |
·包涵体的复性及钴离子螯合层析柱纯化目的蛋白 | 第44-45页 |
·重组蛋白 His 标签的鉴定 | 第45-46页 |
·讨论 | 第46-48页 |
第五章 重组蛋白免疫活性的鉴定 | 第48-54页 |
·材料 | 第48-49页 |
·血清 | 第48页 |
·考马斯亮蓝法 G-250 测定蛋白浓度试剂 | 第48页 |
·Western blotting 试剂 | 第48页 |
·ELISA 试剂 | 第48-49页 |
·主要仪器 | 第49页 |
·方法 | 第49-51页 |
·考马斯亮蓝法 G-250 测定蛋白浓度 | 第49-50页 |
·Western blotting 步骤 | 第50-51页 |
·竞争性 ELISA 步骤 | 第51页 |
·结果 | 第51-52页 |
·考马斯亮蓝法 G-250 测定蛋白浓度 | 第51页 |
·Western blotting 鉴定重组蛋白 | 第51-52页 |
·竞争性 ELISA 检测重组蛋白 TBAP10 的 IgE 结合活性 | 第52页 |
·讨论 | 第52-54页 |
第六章 重组蛋白的稳定性分析及与α-淀粉酶之间的关系 | 第54-61页 |
·材料 | 第54页 |
·蛋白溶液 | 第54页 |
·模拟胃液 | 第54页 |
·模拟肠液 | 第54页 |
·α-淀粉酶溶液配制 | 第54页 |
·SDS-PAGE 溶液 | 第54页 |
·方法 | 第54-56页 |
·TBAP10 的热稳定性分析 | 第54-55页 |
·蛋白溶液在模拟胃液环境中的稳定性 | 第55页 |
·蛋白溶液在模拟肠液环境中的稳定性 | 第55页 |
·TBAP10 与α-淀粉酶的关系 | 第55-56页 |
·结果 | 第56-60页 |
·TBAP10 的热稳定性分析 | 第56-57页 |
·蛋白溶液在模拟胃液的稳定性 | 第57页 |
·蛋白溶液在模拟肠液中的稳定性 | 第57-58页 |
·TBAP10 与α-淀粉酶的关系 | 第58-60页 |
·讨论 | 第60-61页 |
第七章 总结 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-69页 |
附录 | 第69-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
作者简介 | 第72页 |