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应用GFPuv标记技术研究猕猴桃溃疡病菌在组织中的侵染扩展动态

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-13页
第一章 文献综述第13-22页
   ·猕猴桃产业概括第13页
   ·猕猴桃溃疡病的发生与危害第13-14页
   ·猕猴桃溃疡病的研究现状第14-17页
     ·猕猴桃溃疡病的症状第14页
     ·猕猴桃溃疡病的病原学第14-15页
     ·猕猴桃溃疡病的发生规律第15-16页
     ·猕猴桃溃疡病的防治方法第16-17页
   ·细菌定殖的检测方法研究第17-18页
     ·抗生素标记法第17-18页
     ·免疫学方法第18页
     ·基因标记法第18页
   ·绿色荧光蛋白作为分子标记物在微生物学中的研究应用第18-21页
     ·绿色荧光蛋白(GFP)第18-19页
     ·GFP 在微生物中的转化及检测方法第19页
     ·GFP 在植物与微生物互作研究中的应用第19-20页
     ·绿色荧光蛋白突变体(GFPuv)第20-21页
   ·本研究的目的意义第21-22页
第二章 GFPuv 标记猕猴桃溃疡病菌的生物学特性研究第22-33页
   ·材料第22-23页
     ·供试菌株和质粒第22-23页
     ·培养基第23页
     ·主要试剂和仪器第23页
   ·方法第23-27页
     ·PDSK-GFPuv 质粒的提取及 EcoR I 酶切鉴定第23-24页
     ·PSAmx7 感受态细胞的制备第24页
     ·PSAmx7 的电击转化第24页
     ·阳性转化子的荧光检测第24页
     ·细菌基因组 DNA 的提取第24-25页
     ·转化子的 PCR 扩增第25页
     ·菌落、菌体形态观察第25-26页
     ·GFPuv 表达的稳定性检测第26页
     ·菌株的生长曲线第26页
     ·培养温度对菌株生长和 GFP 表达的影响第26页
     ·初始 pH 对菌株生长和 GFP 表达的影响第26页
     ·PSAmx7-GFPuv1 的致病性鉴定第26-27页
   ·结果与分析第27-32页
     ·质粒 pDSK-GFPuv 的酶切鉴定第27页
     ·转化子的荧光检测第27页
     ·标记菌的 PCR 鉴定第27页
     ·菌落的形态观察第27页
     ·菌体形态的电镜观察第27-28页
     ·GFPuv 表达的稳定性检测第28-29页
     ·菌株的生长曲线第29页
     ·培养温度对菌株生长和 GFP 表达的影响第29-30页
     ·初始 pH 对菌株生长和 GFP 表达的影响第30-31页
     ·PSAmx7-GFPuv1 的致病性鉴定第31-32页
   ·讨论第32-33页
第三章 标记菌株 PSAmx7-GFPuv1 在猕猴桃组织中的侵染、扩展动态第33-45页
   ·材料第33页
     ·供试菌株和供试植物品种第33页
     ·主要仪器第33页
   ·方法第33-36页
     ·接种材料的前处理第33-34页
     ·PSAmx7-GFPuv1 菌悬液的制备第34页
     ·枝条组织 PSAmx7-GFPuv1 接种和分离检测第34页
     ·叶片组织 PSAmx7-GFPuv1 接种和分离检测第34-35页
     ·PSAmx7-GFPuv1 在盆栽猕猴桃根系的定殖检测第35页
     ·PSAmx7-GFPuv1 在土壤中的存活能力第35-36页
   ·结果与分析第36-42页
     ·不同方法接种 PSAmx7-GFPuv1 对枝条的侵染定殖测定第36页
     ·温度对 PSAmx7-GFPuv1 在枝条组织中迁移的影响第36-37页
     ·PSAmx7-GFPuv1 在枝条组织中的消长动态第37页
     ·PSAmx7-GFPuv1 接种离体和活体枝条的症状表现第37-38页
     ·不同温度对 PSAmx7-GFPuv1 在叶脉中迁移的影响第38-39页
     ·PSAmx7-GFPuv1 对叶柄的侵染及迁移第39页
     ·荧光强度与 PSAmx7-GFPuv1 菌量浓度的关系第39页
     ·PSAmx7-GFPuv1 在离体叶片上的荧光变化动态第39-41页
     ·PSAmx7-GFPuv1 在猕猴桃根系的侵染定殖第41-42页
     ·PSAmx7-GFPuv1 在土壤中的存活能力第42页
   ·讨论第42-45页
第四章 标记菌株 PSAmx7-GFPuv1 在猕猴桃组织中的定殖研究第45-55页
   ·材料第45页
     ·供试菌株和供试植物品种第45页
     ·主要仪器第45页
   ·方法第45-46页
     ·PSAmx7-GFPuv1 菌悬液的制备和样品的接种第45页
     ·样品的取样方法第45-46页
     ·透射样品的制备与观察第46页
   ·结果与分析第46-53页
     ·PSAmx7-GFPuv1 在枝条组织中的定殖第46-50页
     ·PSAmx7-GFPuv1 在叶片组织中的定殖第50-52页
     ·PSAmx7-GFPuv1 在根部组织中的定殖第52-53页
   ·讨论第53-55页
结论第55-56页
参考文献第56-62页
致谢第62-63页
作者简介第63页

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