| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-21页 |
| ·蚊虫危害及治理 | 第9-10页 |
| ·蚊虫对化学杀虫剂的抗性机制及相关抗性基因 | 第10-15页 |
| ·表皮穿透性的降低 | 第10-11页 |
| ·解毒酶活力的增强 | 第11-13页 |
| ·细胞色素 P450(CYP450) | 第11-12页 |
| ·非专一性酯酶(esterase，EST) | 第12页 |
| ·谷胱甘肽 S-转移酶(glutathione-s-transferase，GST) | 第12-13页 |
| ·靶标敏感性下降 | 第13-15页 |
| ·乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase，AchE) | 第13-14页 |
| ·钠离子通道 | 第14-15页 |
| ·γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid, GABA）受体氯离子通道 | 第15页 |
| ·功能基因研究方法 | 第15-19页 |
| ·细胞模型 | 第15-16页 |
| ·抑制性差减杂交技术 | 第16-17页 |
| ·快速扩增 cDNA 末端技术 | 第17-18页 |
| ·实时荧光定量 PCR | 第18-19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 第二章 淡色库蚊烯醇化酶全长 cDNA 的克隆及其生物信息学分析 | 第21-31页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-23页 |
| ·淡色库蚊总 RNA 的提取 | 第21-22页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第22页 |
| ·淡色库蚊氯菊酯抗性相关基因的 3＇、5＇（即全长 cDNA）RACE 扩增 | 第22页 |
| ·PCR 产物的回收、鉴定和测序 | 第22页 |
| ·生物信息学分析 | 第22-23页 |
| ·结果 | 第23-28页 |
| ·淡色库蚊总 RNA 的提取 | 第23页 |
| ·淡色库蚊烯醇化酶基因全长的克隆 | 第23-24页 |
| ·烯醇化酶基因的全长核苷酸序列及编码氨基酸 | 第24-25页 |
| ·淡色库蚊烯醇化酶基因的生物信息学分析 | 第25-28页 |
| ·同源性比对和系统进化分析 | 第25-26页 |
| ·编码蛋白的结构及功能预测 | 第26-28页 |
| ·讨论 | 第28-30页 |
| ·小结 | 第30-31页 |
| 第三章 氯菊酯抗性 C6/36 细胞的筛选 | 第31-38页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·方法 | 第32-33页 |
| ·C6/36 细胞复苏与冻存 | 第32页 |
| ·C6/36 细胞传代培养 | 第32页 |
| ·逐步诱导法筛选氯菊酯耐药性的 C6/36 细胞株 | 第32-33页 |
| ·C6/36 细胞生长曲线的测定 | 第33页 |
| ·MTT 法测定氯菊酯对 C6/36 细胞的抑制率 | 第33页 |
| ·结果 | 第33-36页 |
| ·氯菊酯对 C6/36 细胞形态及生长的作用 | 第33-35页 |
| ·耐药细胞株筛选及氯菊酯对 C6/36 细胞抑制率的测定 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 第四章 烯醇化酶基因转录的实时荧光定量分析 | 第38-44页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-39页 |
| ·C6/36 细胞总 RNA 的提取 | 第38页 |
| ·总 RNA 的纯化 | 第38-39页 |
| ·反转录 | 第39页 |
| ·实时荧光定量 PCR | 第39页 |
| ·结果 | 第39-42页 |
| ·C6/36 细胞总 RNA 的提取 | 第39-40页 |
| ·反转录后作为模板的扩增 | 第40页 |
| ·实时荧光定量结果 | 第40-42页 |
| ·讨论 | 第42页 |
| ·小结 | 第42-44页 |
| 第五章 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 作者简介 | 第51页 |
