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金花茶离体再生体系的优化及分子机制研究

缩写词第1-9页
摘要第9-11页
Abstract第11-15页
第一章 引言第15-23页
 1 植物体细胞胚胎发生研究进展第16-18页
   ·外源激素在体细胞胚胎发生中的作用第16-17页
   ·温度和光照在体细胞胚胎发生中的作用第17页
   ·其他因素在体细胞胚胎发生中的作用第17页
   ·植物 SERK 基因克隆及其功能的研究第17-18页
 2 植物启动子相关研究进展第18-20页
   ·植物启动子的基本结构和分类第18-19页
   ·植物启动子克隆方法及其功能分析第19-20页
     ·植物启动子克隆方法第19-20页
     ·植物启动子功能分析的方法第20页
 3 金花茶生物技术的研究进展第20-21页
   ·激素对金花茶离体培养的作用第20-21页
   ·金花茶体胚的多样性第21页
   ·金花茶分子生物学进展第21页
 4 本研究意义及主要内容第21-23页
   ·研究意义第21-22页
   ·研究内容第22-23页
第二章 金花茶离体再生体系的优化第23-37页
 第一节 金花茶花药胚性愈伤组织诱导条件的优化第23-29页
  1 材料与方法第23-24页
   ·材料第23页
   ·方法第23-24页
  2 结果与分析第24-27页
   ·不同培养基对金花茶花药愈伤组织诱导率的影响第24-27页
  3 讨论第27-29页
   ·激素对花药愈伤组织诱导的作用第27-28页
   ·蔗糖对花药愈伤组织诱导的作用第28-29页
 第二节 金花茶体胚成熟的调控与萌发第29-37页
  1 材料与方法第29-30页
   ·材料第29页
   ·方法第29-30页
     ·不同浓度 ABA 对金花茶体胚成熟诱导的影响第29页
     ·不同培养基对金花茶体胚成熟诱导的影响第29页
     ·不同光质对金花茶体胚成熟诱导的影响第29-30页
  2 结果与分析第30-35页
   ·不同浓度的 ABA 对金花茶体胚成熟的影响第30-31页
   ·不同浓度的 ABA、蔗糖、肌醇、琼脂对金花茶体胚成熟诱导的效果第31-34页
   ·不同光质对金花茶体胚成熟诱导的效果第34页
   ·金花茶体胚的萌发第34-35页
  3 讨论第35-37页
   ·ABA、肌醇对金花茶体胚成熟有促进作用第35页
   ·在金花茶体胚成熟过程中 ABA 和肌醇的交互作用第35页
   ·在金花茶体胚成熟过程光质的作用第35-37页
第三章 金花茶体胚 Cn-SERK 基因 cDNA 全长克隆及生物信息学分析第37-64页
 第一节 金花茶体胚 Cn-SERK 基因的克隆第37-50页
  1 材料与方法第37-39页
   ·供试材料第37页
   ·试剂第37页
   ·方法第37-39页
     ·金花茶体胚总 RNA 提取和质量检测第37-38页
     ·金花茶体胚 Cn-SERK 基因 cDNA 的克隆第38-39页
  2 结果与分析第39-49页
   ·金花茶体胚总 RNA 提取与检测第39页
   ·金花茶体胚 Cn-SERK 基因 cDNA 全长的克隆第39-49页
  3 讨论第49-50页
   ·金花茶体胚 Cn-SERK 基因可能是富亮氨酸重复受体蛋白激酶第49页
   ·金花茶体胚 Cn-SERK 基因 cDNA 全长克隆的意义第49-50页
 第二节 金花茶 Cn-SERK 基因的生物信息学分析第50-64页
  1 材料与方法第50页
   ·材料第50页
   ·方法第50页
  2 结果与分析第50-63页
   ·蛋白质的基本理化性质第50-52页
   ·信号肽的预测和分析第52-53页
   ·亚细胞定位预测与分析第53页
   ·蛋白的跨膜结构域预测与分析第53-54页
   ·蛋白卷曲螺旋的预测第54-55页
   ·蛋白的二级结构预测第55-57页
   ·磷酸化位点预测与分析第57-59页
   ·保守结构域与功能域分析第59-60页
   ·其他功能位点的预测和分析第60-61页
   ·三维结构的预测和分析第61-62页
   ·构建 Cn-SERK 蛋白系统进化树第62-63页
  3 讨论第63-64页
   ·利用金花茶 Cn-SERK 预测结果推测其可能在金花茶体胚中的作用第63页
   ·金花茶 Cn-SERK 蛋白具有较多的磷酸化位点第63-64页
第四章 金花茶体胚 Cn-SERK 基因 DNA 克隆及内含子分析第64-69页
 1 材料与方法第64-65页
   ·供试材料第64页
   ·试剂第64页
   ·方法第64-65页
     ·基因组 DNA 的提取第64页
     ·引物设计第64-65页
     ·目的片段的扩增第65页
     ·片段的连接第65页
     ·内含子分析第65页
 2 结果与分析第65-67页
   ·金花茶体胚基因组 DNA 的提取第65-66页
   ·金花茶体胚 Cn-SERK 基因 DNA 的克隆第66页
   ·金花茶体胚 Cn-SERK 基因的内含子分析第66-67页
 3 讨论第67-69页
   ·金花茶体胚 Cn-SERK 基因组 ORF 的内含子具有较多的碱基数第67-68页
   ·金花茶体胚 Cn-SERK 基因的内含子中含有各种调控元件第68-69页
第五章 金花茶体胚 Cn-SERK 基因启动子的克隆及功能鉴定第69-79页
 1 材料与方法第69-72页
   ·供试材料第69页
   ·试剂第69页
   ·方法第69-72页
     ·连接介导染色体步移法第69-70页
     ·生物信息学分析第70页
     ·Cn-SERK 启动子 5′端缺失突变载体的构建第70-71页
     ·GUS 基因的瞬时表达第71-72页
 2 结果与分析第72-78页
   ·金花茶 Cn-SERK 启动子 PCR 扩增第72页
   ·启动子特异条带的测序结果第72-73页
   ·金花茶体胚 Cn-SERK 基因启动子的转录起始位点与调控元件的预测第73-75页
   ·Cn-SERK 启动子 5′端缺失突变载体的构建第75-77页
   ·GUS 基因在烟草中的瞬时表达第77-78页
 3 讨论第78-79页
   ·克隆金花茶体胚 Cn-SERK 基因启动子方法的选择第78页
   ·金花茶体胚 Cn-SERK 基因启动子可能的调控方式与作用第78页
   ·启动子功能验证的方法第78-79页
第六章 小结第79-82页
 1 金花茶离体再生体系的优化第79页
 2 金花茶体胚 Cn-SERK 基因的 cDNA 全长克隆及生物信息学分析第79-80页
 3 金花茶体胚 Cn-SERK 基因 DNA 序列的克隆第80页
 4 金花茶体胚 Cn-SERK 基因启动子的克隆第80-81页
 5 金花茶 Cn-SERK 基因启动子 5′端不同缺失突变体载体构建与功能验证第81-82页
参考文献第82-92页
附录 1 图版及图版说明第92-102页
附录 2 金花茶 Cn-SERK 基因(DNA)序列第102-105页
附录 3 金花茶 Cn-SERK 基因 DNA 和 cDNA(ORF)序列比对分析第105-115页
附录 4 金花茶 Cn-SERK 启动子缺失片段第115-116页
致谢第116页

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