| 缩写词 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-23页 |
| 1 植物体细胞胚胎发生研究进展 | 第16-18页 |
| ·外源激素在体细胞胚胎发生中的作用 | 第16-17页 |
| ·温度和光照在体细胞胚胎发生中的作用 | 第17页 |
| ·其他因素在体细胞胚胎发生中的作用 | 第17页 |
| ·植物 SERK 基因克隆及其功能的研究 | 第17-18页 |
| 2 植物启动子相关研究进展 | 第18-20页 |
| ·植物启动子的基本结构和分类 | 第18-19页 |
| ·植物启动子克隆方法及其功能分析 | 第19-20页 |
| ·植物启动子克隆方法 | 第19-20页 |
| ·植物启动子功能分析的方法 | 第20页 |
| 3 金花茶生物技术的研究进展 | 第20-21页 |
| ·激素对金花茶离体培养的作用 | 第20-21页 |
| ·金花茶体胚的多样性 | 第21页 |
| ·金花茶分子生物学进展 | 第21页 |
| 4 本研究意义及主要内容 | 第21-23页 |
| ·研究意义 | 第21-22页 |
| ·研究内容 | 第22-23页 |
| 第二章 金花茶离体再生体系的优化 | 第23-37页 |
| 第一节 金花茶花药胚性愈伤组织诱导条件的优化 | 第23-29页 |
| 1 材料与方法 | 第23-24页 |
| ·材料 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-24页 |
| 2 结果与分析 | 第24-27页 |
| ·不同培养基对金花茶花药愈伤组织诱导率的影响 | 第24-27页 |
| 3 讨论 | 第27-29页 |
| ·激素对花药愈伤组织诱导的作用 | 第27-28页 |
| ·蔗糖对花药愈伤组织诱导的作用 | 第28-29页 |
| 第二节 金花茶体胚成熟的调控与萌发 | 第29-37页 |
| 1 材料与方法 | 第29-30页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-30页 |
| ·不同浓度 ABA 对金花茶体胚成熟诱导的影响 | 第29页 |
| ·不同培养基对金花茶体胚成熟诱导的影响 | 第29页 |
| ·不同光质对金花茶体胚成熟诱导的影响 | 第29-30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-35页 |
| ·不同浓度的 ABA 对金花茶体胚成熟的影响 | 第30-31页 |
| ·不同浓度的 ABA、蔗糖、肌醇、琼脂对金花茶体胚成熟诱导的效果 | 第31-34页 |
| ·不同光质对金花茶体胚成熟诱导的效果 | 第34页 |
| ·金花茶体胚的萌发 | 第34-35页 |
| 3 讨论 | 第35-37页 |
| ·ABA、肌醇对金花茶体胚成熟有促进作用 | 第35页 |
| ·在金花茶体胚成熟过程中 ABA 和肌醇的交互作用 | 第35页 |
| ·在金花茶体胚成熟过程光质的作用 | 第35-37页 |
| 第三章 金花茶体胚 Cn-SERK 基因 cDNA 全长克隆及生物信息学分析 | 第37-64页 |
| 第一节 金花茶体胚 Cn-SERK 基因的克隆 | 第37-50页 |
| 1 材料与方法 | 第37-39页 |
| ·供试材料 | 第37页 |
| ·试剂 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-39页 |
| ·金花茶体胚总 RNA 提取和质量检测 | 第37-38页 |
| ·金花茶体胚 Cn-SERK 基因 cDNA 的克隆 | 第38-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-49页 |
| ·金花茶体胚总 RNA 提取与检测 | 第39页 |
| ·金花茶体胚 Cn-SERK 基因 cDNA 全长的克隆 | 第39-49页 |
| 3 讨论 | 第49-50页 |
| ·金花茶体胚 Cn-SERK 基因可能是富亮氨酸重复受体蛋白激酶 | 第49页 |
| ·金花茶体胚 Cn-SERK 基因 cDNA 全长克隆的意义 | 第49-50页 |
| 第二节 金花茶 Cn-SERK 基因的生物信息学分析 | 第50-64页 |
| 1 材料与方法 | 第50页 |
| ·材料 | 第50页 |
| ·方法 | 第50页 |
| 2 结果与分析 | 第50-63页 |
| ·蛋白质的基本理化性质 | 第50-52页 |
| ·信号肽的预测和分析 | 第52-53页 |
| ·亚细胞定位预测与分析 | 第53页 |
| ·蛋白的跨膜结构域预测与分析 | 第53-54页 |
| ·蛋白卷曲螺旋的预测 | 第54-55页 |
| ·蛋白的二级结构预测 | 第55-57页 |
| ·磷酸化位点预测与分析 | 第57-59页 |
| ·保守结构域与功能域分析 | 第59-60页 |
| ·其他功能位点的预测和分析 | 第60-61页 |
| ·三维结构的预测和分析 | 第61-62页 |
| ·构建 Cn-SERK 蛋白系统进化树 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-64页 |
| ·利用金花茶 Cn-SERK 预测结果推测其可能在金花茶体胚中的作用 | 第63页 |
| ·金花茶 Cn-SERK 蛋白具有较多的磷酸化位点 | 第63-64页 |
| 第四章 金花茶体胚 Cn-SERK 基因 DNA 克隆及内含子分析 | 第64-69页 |
| 1 材料与方法 | 第64-65页 |
| ·供试材料 | 第64页 |
| ·试剂 | 第64页 |
| ·方法 | 第64-65页 |
| ·基因组 DNA 的提取 | 第64页 |
| ·引物设计 | 第64-65页 |
| ·目的片段的扩增 | 第65页 |
| ·片段的连接 | 第65页 |
| ·内含子分析 | 第65页 |
| 2 结果与分析 | 第65-67页 |
| ·金花茶体胚基因组 DNA 的提取 | 第65-66页 |
| ·金花茶体胚 Cn-SERK 基因 DNA 的克隆 | 第66页 |
| ·金花茶体胚 Cn-SERK 基因的内含子分析 | 第66-67页 |
| 3 讨论 | 第67-69页 |
| ·金花茶体胚 Cn-SERK 基因组 ORF 的内含子具有较多的碱基数 | 第67-68页 |
| ·金花茶体胚 Cn-SERK 基因的内含子中含有各种调控元件 | 第68-69页 |
| 第五章 金花茶体胚 Cn-SERK 基因启动子的克隆及功能鉴定 | 第69-79页 |
| 1 材料与方法 | 第69-72页 |
| ·供试材料 | 第69页 |
| ·试剂 | 第69页 |
| ·方法 | 第69-72页 |
| ·连接介导染色体步移法 | 第69-70页 |
| ·生物信息学分析 | 第70页 |
| ·Cn-SERK 启动子 5′端缺失突变载体的构建 | 第70-71页 |
| ·GUS 基因的瞬时表达 | 第71-72页 |
| 2 结果与分析 | 第72-78页 |
| ·金花茶 Cn-SERK 启动子 PCR 扩增 | 第72页 |
| ·启动子特异条带的测序结果 | 第72-73页 |
| ·金花茶体胚 Cn-SERK 基因启动子的转录起始位点与调控元件的预测 | 第73-75页 |
| ·Cn-SERK 启动子 5′端缺失突变载体的构建 | 第75-77页 |
| ·GUS 基因在烟草中的瞬时表达 | 第77-78页 |
| 3 讨论 | 第78-79页 |
| ·克隆金花茶体胚 Cn-SERK 基因启动子方法的选择 | 第78页 |
| ·金花茶体胚 Cn-SERK 基因启动子可能的调控方式与作用 | 第78页 |
| ·启动子功能验证的方法 | 第78-79页 |
| 第六章 小结 | 第79-82页 |
| 1 金花茶离体再生体系的优化 | 第79页 |
| 2 金花茶体胚 Cn-SERK 基因的 cDNA 全长克隆及生物信息学分析 | 第79-80页 |
| 3 金花茶体胚 Cn-SERK 基因 DNA 序列的克隆 | 第80页 |
| 4 金花茶体胚 Cn-SERK 基因启动子的克隆 | 第80-81页 |
| 5 金花茶 Cn-SERK 基因启动子 5′端不同缺失突变体载体构建与功能验证 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-92页 |
| 附录 1 图版及图版说明 | 第92-102页 |
| 附录 2 金花茶 Cn-SERK 基因(DNA)序列 | 第102-105页 |
| 附录 3 金花茶 Cn-SERK 基因 DNA 和 cDNA(ORF)序列比对分析 | 第105-115页 |
| 附录 4 金花茶 Cn-SERK 启动子缺失片段 | 第115-116页 |
| 致谢 | 第116页 |