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H2O2诱导兔关节软骨细胞凋亡机制研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
第一章 绪论第10-19页
   ·骨关节炎概述第10页
   ·细胞凋亡第10-16页
     ·前言第10-12页
     ·线粒体与细胞凋亡第12页
     ·Caspase 蛋白与细胞凋亡第12-13页
     ·BCL-2 家族蛋白与细胞凋亡第13页
     ·细胞凋亡通路概述第13-16页
   ·ROS 诱导软骨细胞凋亡的研究现状第16-18页
     ·ROS 与细胞凋亡第16-17页
     ·ROS 诱导软骨细胞凋亡的研究现状第17-18页
   ·激光扫描共聚焦显微镜(Lase Scanning Confocal Microscope, LSCM)应用第18页
   ·本研究的目的和意义第18-19页
第二章 H_2O_2诱导兔软骨细胞凋亡第19-28页
   ·引言第19页
   ·实验材料和仪器第19-20页
     ·实验动物第19页
     ·主要仪器第19页
     ·主要试剂第19-20页
     ·常用试剂配备第20页
   ·实验方法第20-23页
     ·原代兔关节软骨细胞的提取与培养第20-21页
     ·细胞活性检测第21-22页
     ·细胞核荧光染色技术第22页
     ·Annexin V-FITC/PI 双染法检测凋亡第22-23页
   ·统计分析第23页
   ·实验结果第23-26页
     ·H_2O_2诱导了浓度依赖性的软骨细胞毒性第23-25页
     ·H_2O_2诱导软骨细胞发生细胞形态学以及细胞核的改变第25页
     ·H_2O_2诱导软骨细胞凋亡第25-26页
   ·总结与讨论第26-28页
第三章 H_2O_2诱导兔软骨细胞凋亡的机制研究第28-48页
   ·引言第28页
   ·实验仪器和材料第28-30页
     ·主要实验仪器第28-29页
     ·主要试剂第29页
     ·原代兔关节软骨细胞提取及细胞培养第29-30页
     ·质粒第30页
   ·实验方法第30-33页
     ·细胞转染第30页
       ·流式细胞 Rhodamine123 染色检测线粒体膜电位第30-31页
     ·RNA 干扰技术第31页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳和 western blotting 检测第31-33页
     ·荧光光谱检测第33页
   ·统计分析第33页
   ·实验结果第33-45页
     ·H_2O_2诱导软骨细胞线粒体膜电位(ΔΨm)下降第33-36页
     ·H_2O_2作用下软骨细胞溶酶体完整性并未受到破坏第36-38页
     ·BID 没有参与 H_2O_2诱导的软骨细胞凋亡第38页
     ·Bax 没有参与 H_2O_2诱导的线粒体凋亡通路第38-40页
     ·caspase-3 和 caspase-8 而不是 caspase-9 参与 H_2O_2诱导的软骨细胞凋亡第40-43页
     ·诱导软骨细胞凋亡通过死亡受体介导的外源性凋亡通路第43-44页
     ·H_2O_2诱导 AIF 而非 Cyt.c 从线粒体释放第44-45页
   ·总结与讨论第45-48页
第四章 总结与展望第48-49页
参考文献第49-58页
附录一 中英文缩略词表第58-60页
附录二 攻读硕士学位期间科研工作情况第60-61页
致谢第61页

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