| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-22页 |
| ·多杀性巴氏杆菌的生物学分类 | 第12页 |
| ·牛源A型多杀性巴氏杆菌所致临床疾病 | 第12-14页 |
| ·船运热 | 第12-13页 |
| ·地方性肺炎(ECP) | 第13-14页 |
| ·牛多杀性巴氏杆菌肺炎的病理学 | 第14页 |
| ·多杀性巴氏杆菌性肺炎的流行病学 | 第14-16页 |
| ·A型多杀性巴氏杆菌毒力因子 | 第16-19页 |
| ·粘附素和定居因子菌毛 | 第16页 |
| ·LPS | 第16-17页 |
| ·荚膜和荚膜合成基因 | 第17-18页 |
| ·外膜蛋白 | 第18页 |
| ·铁调节和获得蛋白-IROMPs | 第18-19页 |
| ·胞外酶 | 第19页 |
| ·多杀性巴氏杆菌免疫逃避机制 | 第19-20页 |
| ·牛A型多杀性巴氏杆菌疫苗 | 第20-22页 |
| 第2章 引言 | 第22-24页 |
| ·研究的目的意义 | 第22-23页 |
| ·研究的主要内容 | 第23-24页 |
| ·多杀性巴氏杆菌溶血特性、ahpA基因研究 | 第23页 |
| ·A型多杀性巴氏杆菌灭活疫苗侯选菌株筛选 | 第23页 |
| ·疫苗制备及成品检验 | 第23-24页 |
| 第3章 6株牛源A型多杀性巴氏杆菌溶血特性比较及溶血相关基因ahpA相关研究 | 第24-44页 |
| ·材料 | 第24-26页 |
| ·菌种 | 第24页 |
| ·试剂 | 第24页 |
| ·试验动物 | 第24-25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·主要试剂的配制 | 第25-26页 |
| ·主要培养基 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-32页 |
| ·6株A型多杀性巴氏杆菌溶血现象比较 | 第26页 |
| ·溶血相关基因ahpA及其上游调控序列的克隆分析 | 第26-27页 |
| ·ahpA基因荧光定量分析 | 第27-29页 |
| ·pET-32a(+)-ahpA表达载体构建 | 第29-30页 |
| ·BL21-pET-32a(+)-ahpA工程菌的溶血现象观察 | 第30页 |
| ·目的基因的原核表达 | 第30-31页 |
| ·重组蛋白的大量诱导 | 第31页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第31页 |
| ·目的蛋白的免疫印迹分析 | 第31-32页 |
| ·ahpA蛋白的免疫保护试验 | 第32页 |
| ·结果 | 第32-41页 |
| ·溶血特性比较 | 第32-33页 |
| ·ahpA基因的扩增与进化树构建 | 第33-35页 |
| ·ahpA基因上游调控序列扩增 | 第35页 |
| ·荧光定量分析 | 第35-37页 |
| ·pET-32a(+)-ahpA重组质粒鉴定 | 第37-38页 |
| ·重组菌的溶血特性 | 第38-39页 |
| ·ahpA基因的原核表达 | 第39页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第39-40页 |
| ·免疫印迹分析结果 | 第40-41页 |
| ·小鼠免疫保护试验 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-44页 |
| 第4章 牛源A型多杀性巴氏杆菌灭活疫苗候选菌株筛选 | 第44-54页 |
| ·材料 | 第44-45页 |
| ·菌种 | 第44页 |
| ·实验动物 | 第44页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| ·主要仪器和设备 | 第44-45页 |
| ·主要培养基的配制 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-46页 |
| ·6株牛源A型多杀性巴氏杆菌培养特性比较 | 第45页 |
| ·PmCQ1-6对昆明鼠的LD50测定 | 第45页 |
| ·交互免疫试验 | 第45-46页 |
| ·疫苗候选菌株遗传稳定性研究 | 第46页 |
| ·结果 | 第46-51页 |
| ·6株培养特性比较结果 | 第46-47页 |
| ·不同株多杀性巴氏杆菌对昆明鼠的LD50测定 | 第47-49页 |
| ·交叉保护结果 | 第49-50页 |
| ·候选菌株遗传稳定性结果 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-54页 |
| 第5章 灭活疫苗配制及检验 | 第54-68页 |
| ·材料 | 第54-55页 |
| ·菌种 | 第54页 |
| ·实验动物 | 第54页 |
| ·主要试剂 | 第54页 |
| ·主要仪器和设备 | 第54页 |
| ·主要试剂的配制 | 第54-55页 |
| ·主要培养基的配制 | 第55页 |
| ·方法 | 第55-59页 |
| ·疫苗生产用种子制备 | 第55页 |
| ·制苗用菌液培养 | 第55-56页 |
| ·疫苗的配制 | 第56页 |
| ·成品检验 | 第56-57页 |
| ·间接ELISA检测抗体效价 | 第57-58页 |
| ·AB型间的交互免疫试验实验 | 第58-59页 |
| ·结果 | 第59-65页 |
| ·疫苗配制 | 第59页 |
| ·疫苗成品检验 | 第59-60页 |
| ·ELISA建立及检测结果 | 第60-64页 |
| ·AB型间交互免疫试验结果 | 第64-65页 |
| ·讨论 | 第65-68页 |
| 第6章 结论 | 第68-70页 |
| ·ahpA基因及其表达蛋白研究 | 第68页 |
| ·灭活疫苗侯选株筛选 | 第68页 |
| ·灭活疫苗的检验 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 附表 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78-80页 |
| 攻读硕士期间发表论文 | 第80页 |
