| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略词对照表 | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-25页 |
| 一 植物体内蛋白水解酶 | 第11-16页 |
| ·植物体内蛋白水解酶的分类 | 第11-13页 |
| ·枯草杆菌类蛋白酶 | 第13-16页 |
| 二 内肽酶的研究方法 | 第16-23页 |
| ·蛋白水平上内肽酶的研究方法 | 第16-17页 |
| ·基因水平上内肽酶的研究方法 | 第17-23页 |
| 三 研究目的和意义 | 第23-25页 |
| 第一章 小麦TASSP1基因的克隆与表达 | 第25-45页 |
| 1 研究背景 | 第25页 |
| 2 实验材料 | 第25-27页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·菌株与载体 | 第25页 |
| ·试剂 | 第25页 |
| ·溶液配置 | 第25-27页 |
| ·仪器 | 第27页 |
| 3 实验方法 | 第27-34页 |
| ·PCR获得各目的片段 | 第27-29页 |
| ·琼脂糖凝胶产物的回收 | 第29-30页 |
| ·目的片段与pMD19-T载体的连接 | 第30页 |
| ·超级感受态细胞的制备 | 第30页 |
| ·重组质粒转化 | 第30-31页 |
| ·T-A克隆的鉴定 | 第31-32页 |
| ·目的片段与表达载体相连 | 第32-33页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第33页 |
| ·诱导表达 | 第33-34页 |
| 4. 实验结果 | 第34-42页 |
| ·TaSSP1结构分析 | 第34-35页 |
| ·PCR获得各目的片段的鉴定 | 第35页 |
| ·T-A克隆的鉴定 | 第35-37页 |
| ·目的片段与表达载体相连 | 第37-39页 |
| ·诱导表达的结果与分析 | 第39-40页 |
| ·重组蛋白在菌体中的主要存在形式及纯化 | 第40-41页 |
| ·明胶-聚丙烯酰胺凝胶活性电泳检测蛋白酶活性 | 第41-42页 |
| 5 本章小结 | 第42页 |
| 6 本章讨论 | 第42-45页 |
| 第二章 小麦TASSP1基因生理功能的初步研究 | 第45-57页 |
| 1 前言 | 第45页 |
| 2 材料 | 第45-46页 |
| ·植物材料及处理 | 第45-46页 |
| ·试剂与溶液配制 | 第46页 |
| ·仪器 | 第46页 |
| 3 实验方法 | 第46-50页 |
| ·半定量RT-PCR分析不同激素不同时间处理下TaSSP1基因的表达 | 第46-48页 |
| ·实时荧光定量PCR分析不同激素不同时间处理下TaSSP1基因的表达 | 第48-49页 |
| ·Western-blot分析不同激素不同时间处理下小麦TaSSP1基因在蛋白水平的表达 | 第49页 |
| ·蛋白酶活性检测 | 第49-50页 |
| 4 结果分析 | 第50-54页 |
| ·电泳检测RNA质量 | 第50页 |
| ·半定量RT-PCR分析不同激素和不同时间处理下叶片TaSSP1基因转录本的变化 | 第50-51页 |
| ·实时荧光定量PCR分析不同激素不同处理下叶片TaSSP1基因转录本的变化 | 第51-52页 |
| ·Western-blot分析不同激素不同时间处理下小麦TaSSP1基因在蛋白水平上的变化 | 第52页 |
| ·暗处理小麦叶片TaSSP1的Western-blot及活性电泳检测 | 第52-54页 |
| 5. 本章小结 | 第54页 |
| 6. 本章讨论 | 第54-57页 |
| 全文总结 | 第57-59页 |
| 创新之处 | 第59-61页 |
| 存在问题和展望 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
