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相容性溶质结合蛋白OpuCC和粘蛋白结合蛋白Spr1345结构功能研究

摘要第1-12页
Abstract第12-15页
第一部分 相容性溶质结合蛋白OpuCC的结构与功能研究第15-64页
 第一章 枯草芽孢杆菌蛋白OpuCC的研究背景第15-33页
   ·引言第15-16页
   ·相容性溶质的特性与功能第16-18页
   ·枯草芽孢杆菌的渗透压调节系统第18-24页
     ·枯草芽孢杆菌对于渗透压胁迫的细胞响应第19-20页
     ·枯草芽孢杆菌对于高渗胁迫的初始响应第20-21页
     ·枯草芽孢杆菌对于脯氨酸的专一性摄入第21页
     ·枯草芽孢杆菌对甘氨酸甜菜碱等的获取第21-23页
     ·枯草芽孢杆菌中甘氨酸甜菜碱的合成途径第23页
     ·相容性溶质的流出第23-24页
   ·枯草芽孢杆菌OpuC转运系统第24-27页
   ·枯草芽孢杆菌蛋白OpuCC的研究背景第27-33页
     ·底物结合蛋白的特点和分类第27-29页
     ·底物结合蛋白基于结构的分类第29-31页
     ·相容性溶质结合蛋白结构的研究背景第31-33页
 第二章 实验材料、设备与方法第33-45页
   ·实验材料和设备第33-34页
     ·菌株、载体第33页
     ·试剂、酶第33页
     ·实验仪器和设备第33-34页
   ·实验方法第34-45页
     ·重组表达载体的构建第34-37页
     ·OpuCC蛋白的表达与纯化第37-39页
     ·OpuCC晶体生长和结构解析第39-43页
     ·OpuCC的生化分析第43-45页
       ·OpuCC及其突变体荧光光谱分析第43页
       ·OpuCC及其突变体的ELISA分析第43-45页
 第三章 结果与讨论第45-57页
   ·OpuCC的多种相容性溶质结合特性第45-46页
   ·OpuCC的整体结构和诱导契合效应第46-49页
   ·OpuCC底物结合口袋的结构柔韧性第49-51页
   ·OpuCC的单碱基突变导致的多底物结合特性第51-53页
   ·OpuCC很可能是一个粘蛋白结合蛋白第53-55页
   ·OpuCC和底物分子的对接计算分析第55-57页
 本篇小结第57-59页
 参考文献第59-64页
第二部分 粘蛋白结合蛋白Spr1345 的结构与功能研究第64-110页
 第四章 肺炎链球菌蛋白Spr1345 的研究背景第64-81页
   ·引言第64-66页
   ·肺炎链球菌鼻咽部的定植机理第66-69页
   ·肺炎链球菌表面蛋白的功能和分类第69-75页
     ·胆碱结合蛋白第71-72页
     ·脂蛋白:参与底物转运和毒力的相关性第72-73页
     ·含有LPxTG基序的多样化蛋白家族第73-75页
   ·粘蛋白和粘蛋白结合蛋白第75-81页
     ·粘蛋白(mucin)的功能及其分类第75-79页
     ·粘蛋白和癌症之间的内在联系第79-81页
 第五章 实验材料、设备与方法第81-87页
   ·实验材料和设备第81-82页
     ·菌株、载体第81页
     ·试剂、酶第81页
     ·实验仪器和设备第81-82页
   ·实验方法第82-87页
     ·MucBD及相关版本蛋白克隆、表达与纯化第82-83页
     ·MucBD蛋白晶体生长和结构解析第83-85页
     ·Spr1345-MucBD的功能分析第85-87页
       ·MucBD及相关版本的ELISA分析第85页
       ·MucBD荧光细胞实验第85-87页
 第六章 结果与讨论第87-102页
   ·Spr1345 的序列分析和蛋白纯化第87-88页
   ·MF171 和MucBD的结构与功能比较第88-91页
   ·MucBD可以粘附在人A549 上皮癌细胞上第91-92页
   ·MucBD的整体结构第92-94页
   ·MucBD和同源结构的比较分析第94页
   ·MucBP家族蛋白的组成和系统分析第94-98页
     ·MucBP的多样性第94-95页
     ·PRD结构域可能的功能角色第95-97页
     ·MucBD可能的糖结合位点第97-98页
   ·Spr1345 和Spr1677S之间的结构与功能比较第98-102页
     ·Spr1677S的晶体结构第98-100页
     ·MucBD和Spr1677S的粘蛋白结合活性比较第100-102页
 本篇小结第102-103页
 参考文献第103-110页
第三部分 高铁下酿酒酵母转录组研究概述第110-128页
 第七章 酵母转录组研究背景第110-112页
 第八章 实验方法第112-114页
   ·酵母菌株的准备和生长曲线的测定第112页
   ·RNA的抽提和单链RNA的合成第112页
   ·基因芯片的构建与杂交第112页
   ·半定量RT-PCR的测定第112-113页
   ·细胞GFP荧光标记与检测第113-114页
 第九章 结果与讨论第114-126页
   ·高铁对酵母细胞生长的促进作用第114页
   ·高铁下酵母的转录组应答第114-123页
   ·高铁作为一种压力是受Msn4 调控的第123-125页
   ·酵母对于细胞代谢的双重效应第125-126页
 参考文献第126-128页
附录第128-132页
 A:pET28b(+)质粒图谱第128-129页
 B:FITC荧光分子的蛋白标记第129页
 C:大肠杆菌感受态细胞的制备第129-130页
 D:蛋白的表达检测第130页
 E:酿酒酵母细胞的GFP融合质粒转化第130-132页
致谢第132-133页
攻读学位期间发表的学术论文与参加的学术会议第133-134页

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