| 致谢 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 图目录 | 第11-12页 |
| 符号说明 | 第12-13页 |
| 1. 前言 | 第13-29页 |
| ·手性与手性药物 | 第13-19页 |
| ·手性的基本概念 | 第13-14页 |
| ·手性与生物活性 | 第14-15页 |
| ·手性物质纯度的计算方法 | 第15-17页 |
| ·手性药物及其发展前景 | 第17-19页 |
| ·酮还原酶及其应用 | 第19-22页 |
| ·酶与酮还原酶 | 第19页 |
| ·酮还原酶的催化机理 | 第19-20页 |
| ·酮还原酶的活性测定 | 第20-21页 |
| ·酮还原酶在手性合成中的应用进展 | 第21-22页 |
| ·α-和β-羟基酸 | 第22-24页 |
| ·α-羟基酸的应用 | 第22-23页 |
| ·生物法合成(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯(EHPB) | 第23-24页 |
| ·β-羟基酸的应用 | 第24页 |
| ·生物法合成(R)-3-羟基丁酸乙酯 | 第24页 |
| ·全细胞与酶催化 | 第24-25页 |
| ·辅酶再生 | 第25-29页 |
| ·电化学再生法 | 第25页 |
| ·化学再生法 | 第25-26页 |
| ·双反应耦合再生法 | 第26-28页 |
| ·常用的辅助酶 | 第28-29页 |
| 2. EOPB酮还原酶的筛选及酶学性质的初步研究 | 第29-39页 |
| ·试验仪器与试剂 | 第29-32页 |
| ·试验主要仪器 | 第29-30页 |
| ·试验主要试剂 | 第30-31页 |
| ·培养基 | 第31-32页 |
| ·(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的制备 | 第32-35页 |
| ·目标反应 | 第32页 |
| ·分析方法 | 第32-33页 |
| ·试验方法 | 第33-35页 |
| ·结果和讨论 | 第35-38页 |
| ·酮还原酶的筛选结果 | 第35页 |
| ·NADPH标准曲线的绘制 | 第35-36页 |
| ·辅酶依赖型的确定 | 第36页 |
| ·pH对酶活力的影响 | 第36-37页 |
| ·温度对酶活力的影响及热稳定性 | 第37-38页 |
| ·本章小结 | 第38-39页 |
| 3. EOPB酮还原酶与葡萄糖脱氢酶共表达 | 第39-44页 |
| ·实验仪器与试剂 | 第39页 |
| ·主要实验仪器 | 第39页 |
| ·主要实验试剂 | 第39页 |
| ·试验方法 | 第39-40页 |
| ·共表达体系的构建 | 第39页 |
| ·目的蛋白的诱导表达 | 第39-40页 |
| ·酶活性测定 | 第40页 |
| ·优化反应条件后催化还原EOPB | 第40页 |
| ·结果与讨论 | 第40-43页 |
| ·共表达体系的构建 | 第40-41页 |
| ·酶活性的测定 | 第41-43页 |
| ·全细胞催化还原EOPB | 第43页 |
| ·本章小结 | 第43-44页 |
| 4. 乙酰乙酸乙酯酮还原酶与葡萄糖脱氢酶共表达及细胞固定化 | 第44-53页 |
| ·实验仪器与试剂 | 第44-45页 |
| ·主要实验仪器 | 第44页 |
| ·主要实验试剂 | 第44-45页 |
| ·试验方法 | 第45-48页 |
| ·共表达体系的构建 | 第45页 |
| ·目的蛋白的诱导表达 | 第45页 |
| ·酶活性测定 | 第45-46页 |
| ·酮还原酶对乙酰乙酸乙酯的还原 | 第46页 |
| ·全细胞的固定 | 第46页 |
| ·固定化细胞的循环利用性 | 第46页 |
| ·自诱导原理 | 第46-47页 |
| ·目的蛋白的自诱导表达 | 第47页 |
| ·初始反应速率的测定 | 第47-48页 |
| ·KE31对不同浓度乙酰乙酸乙酯的催化效率 | 第48页 |
| ·结果与讨论 | 第48-52页 |
| ·全细胞催化乙酰乙酸乙酯还原 | 第48页 |
| ·两种酶的酶学性质 | 第48-50页 |
| ·全细胞固定 | 第50页 |
| ·固定化全细胞的循环利用性 | 第50页 |
| ·目的蛋白的自诱导表达 | 第50-51页 |
| ·初始反应速率的测定 | 第51页 |
| ·KE31对不同浓度乙酰乙酸乙酯的催化效率 | 第51-52页 |
| ·本章小结 | 第52-53页 |
| 5. 结论与展望 | 第53-55页 |
| ·主要结论 | 第53-54页 |
| ·工作展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 附录 | 第60-61页 |