中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
目录 | 第9-12页 |
符号说明 | 第12-13页 |
文献综述 | 第13-25页 |
1 肠炎沙门氏菌感染的研究进展 | 第13-16页 |
·肠炎沙门氏菌的生物学特性 | 第13-14页 |
·肠炎沙门氏菌的毒力因子 | 第14-16页 |
·毒力质粒 | 第14页 |
·脂多糖(LPS) | 第14-15页 |
·菌毛 | 第15-16页 |
·Ⅲ型分泌系统(TTSS) | 第16页 |
3 SEF21菌毛的研究进展 | 第16-17页 |
·SEF21菌毛的编码基因 | 第16-17页 |
·SEF21菌毛的功能 | 第17页 |
4 SEF14菌毛的研究进展 | 第17-18页 |
·SEF14菌毛的编码基因 | 第17-18页 |
·SEF14菌毛的作用 | 第18页 |
5 Red同源重组技术研究进展 | 第18-21页 |
·Red重组系统的主要蛋白及重组机制 | 第19-20页 |
·Red同源重组系统的应用 | 第20-21页 |
参考文献 | 第21-25页 |
研究一 肠炎沙门氏菌SEF21菌毛主要亚单位基因fimA缺失突变株的构建 | 第25-37页 |
摘要 | 第25页 |
Abstract | 第25-26页 |
1 材料 | 第26-28页 |
·菌株与质粒 | 第26-27页 |
·培养基和主要试剂 | 第27-28页 |
·主要仪器 | 第28页 |
2 方法 | 第28-33页 |
·fimA基因PCR引物的设计 | 第28页 |
·融合PCR产物的制备和纯化 | 第28-29页 |
·感受态细胞的制备及转化 | 第29-30页 |
·感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
·质粒pKD46的转化 | 第30页 |
·Red重组功能的诱导和感受态细胞的制备 | 第30页 |
·电转化 | 第30页 |
·消除质粒pKD46 | 第30-31页 |
·第一次同源重组菌ΔfimA::Cat的PCR鉴定 | 第31页 |
·煮沸法制备PCR模板 | 第31页 |
·PCR反应体系及程序 | 第31页 |
·FLP位点专一性重组 | 第31-32页 |
·第二次重组菌△fimA的鉴定 | 第32-33页 |
3 结果 | 第33-35页 |
·融合PCR产物的制备 | 第33页 |
·同源重组菌的PCR鉴定 | 第33-34页 |
·鉴定引物P3、P4扩增XΔfimA菌株的序列分析 | 第34-35页 |
4 讨论 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-37页 |
研究二 肠炎沙门氏菌SEF14、SEF21菌毛与相关细胞的作用 | 第37-50页 |
摘要 | 第37页 |
Abstract | 第37-38页 |
1 材料 | 第38-40页 |
·菌株、质粒、细胞系 | 第38-39页 |
·培养基 | 第39页 |
·主要试剂及配制 | 第39页 |
·试验动物 | 第39页 |
·仪器设备 | 第39-40页 |
2 方法 | 第40-42页 |
·构建回补株 | 第40页 |
·细胞粘附试验 | 第40页 |
·Caco-2细胞的培养和传代 | 第40页 |
·Caco-2细胞粘附试验 | 第40页 |
·小鼠腹腔巨噬细胞的分离与试验 | 第40-42页 |
·小鼠腹腔巨噬细胞的分离 | 第40-41页 |
·分离后巨噬细胞的形态学检查 | 第41页 |
·细菌的准备 | 第41页 |
·小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验 | 第41-42页 |
·小鼠腹腔巨噬细胞内存活试验 | 第42页 |
·数据处理 | 第42页 |
3 结果 | 第42-47页 |
·细胞粘附试验 | 第42-44页 |
·分离培养的小鼠巨噬细胞的观察 | 第44页 |
·小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验 | 第44-45页 |
·小鼠腹腔巨噬细胞存活试验 | 第45-47页 |
4 讨论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-50页 |
研究三 肠炎沙门氏菌及SEF14、SEF21突变株对Balb/c小鼠LD_(50)的测定 | 第50-60页 |
摘要 | 第50页 |
Abstract | 第50-51页 |
1 材料和方法 | 第51-54页 |
·材料 | 第51-52页 |
·菌株 | 第51页 |
·实验动物 | 第51页 |
·主要试剂与仪器 | 第51-52页 |
·方法 | 第52-54页 |
·半数致死量试验设计和分组 | 第52-53页 |
·细菌培养与计数 | 第53页 |
·试验动物的攻毒 | 第53页 |
·试验动物状态的观察与剖检 | 第53页 |
·细菌分离与鉴定 | 第53-54页 |
2 结果 | 第54-57页 |
·细菌计数结果 | 第54-55页 |
·临床变化和病理剖检变化 | 第55页 |
·细菌的分离鉴定 | 第55-57页 |
·半数致死量结果 | 第57页 |
3 讨论 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-60页 |
全文总结 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |