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肠炎沙门氏菌SEF21和SEF14菌毛致病作用分析

中文摘要第1-6页
Abstract第6-9页
目录第9-12页
符号说明第12-13页
文献综述第13-25页
 1 肠炎沙门氏菌感染的研究进展第13-16页
   ·肠炎沙门氏菌的生物学特性第13-14页
   ·肠炎沙门氏菌的毒力因子第14-16页
     ·毒力质粒第14页
     ·脂多糖(LPS)第14-15页
     ·菌毛第15-16页
     ·Ⅲ型分泌系统(TTSS)第16页
 3 SEF21菌毛的研究进展第16-17页
   ·SEF21菌毛的编码基因第16-17页
   ·SEF21菌毛的功能第17页
 4 SEF14菌毛的研究进展第17-18页
   ·SEF14菌毛的编码基因第17-18页
   ·SEF14菌毛的作用第18页
 5 Red同源重组技术研究进展第18-21页
   ·Red重组系统的主要蛋白及重组机制第19-20页
   ·Red同源重组系统的应用第20-21页
 参考文献第21-25页
研究一 肠炎沙门氏菌SEF21菌毛主要亚单位基因fimA缺失突变株的构建第25-37页
 摘要第25页
 Abstract第25-26页
 1 材料第26-28页
   ·菌株与质粒第26-27页
   ·培养基和主要试剂第27-28页
   ·主要仪器第28页
 2 方法第28-33页
   ·fimA基因PCR引物的设计第28页
   ·融合PCR产物的制备和纯化第28-29页
   ·感受态细胞的制备及转化第29-30页
     ·感受态细胞的制备第29-30页
     ·质粒pKD46的转化第30页
     ·Red重组功能的诱导和感受态细胞的制备第30页
   ·电转化第30页
   ·消除质粒pKD46第30-31页
   ·第一次同源重组菌ΔfimA::Cat的PCR鉴定第31页
     ·煮沸法制备PCR模板第31页
     ·PCR反应体系及程序第31页
   ·FLP位点专一性重组第31-32页
   ·第二次重组菌△fimA的鉴定第32-33页
 3 结果第33-35页
   ·融合PCR产物的制备第33页
   ·同源重组菌的PCR鉴定第33-34页
   ·鉴定引物P3、P4扩增XΔfimA菌株的序列分析第34-35页
 4 讨论第35-36页
 参考文献第36-37页
研究二 肠炎沙门氏菌SEF14、SEF21菌毛与相关细胞的作用第37-50页
 摘要第37页
 Abstract第37-38页
 1 材料第38-40页
   ·菌株、质粒、细胞系第38-39页
   ·培养基第39页
   ·主要试剂及配制第39页
   ·试验动物第39页
   ·仪器设备第39-40页
 2 方法第40-42页
   ·构建回补株第40页
   ·细胞粘附试验第40页
     ·Caco-2细胞的培养和传代第40页
     ·Caco-2细胞粘附试验第40页
   ·小鼠腹腔巨噬细胞的分离与试验第40-42页
     ·小鼠腹腔巨噬细胞的分离第40-41页
     ·分离后巨噬细胞的形态学检查第41页
     ·细菌的准备第41页
     ·小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验第41-42页
     ·小鼠腹腔巨噬细胞内存活试验第42页
   ·数据处理第42页
 3 结果第42-47页
   ·细胞粘附试验第42-44页
   ·分离培养的小鼠巨噬细胞的观察第44页
   ·小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验第44-45页
   ·小鼠腹腔巨噬细胞存活试验第45-47页
 4 讨论第47-48页
 参考文献第48-50页
研究三 肠炎沙门氏菌及SEF14、SEF21突变株对Balb/c小鼠LD_(50)的测定第50-60页
 摘要第50页
 Abstract第50-51页
 1 材料和方法第51-54页
   ·材料第51-52页
     ·菌株第51页
     ·实验动物第51页
     ·主要试剂与仪器第51-52页
   ·方法第52-54页
     ·半数致死量试验设计和分组第52-53页
     ·细菌培养与计数第53页
     ·试验动物的攻毒第53页
     ·试验动物状态的观察与剖检第53页
     ·细菌分离与鉴定第53-54页
 2 结果第54-57页
   ·细菌计数结果第54-55页
   ·临床变化和病理剖检变化第55页
   ·细菌的分离鉴定第55-57页
   ·半数致死量结果第57页
 3 讨论第57-59页
 参考文献第59-60页
全文总结第60-61页
致谢第61-62页

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