摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-37页 |
1 cDNA 文库研究进展 | 第14-21页 |
·cDNA 文库的概念及构建原理 | 第14页 |
·cDNA 文库的分类 | 第14-15页 |
·全长cDNA 文库的概述 | 第15-17页 |
·全长cDNA 文库的构建方法、原理及优缺点 | 第17-21页 |
2 DNA 测序技术及研究进展 | 第21-23页 |
3 EST 技术研究进展 | 第23-27页 |
·EST 概念及研究概况 | 第23页 |
·EST 技术形成的原理 | 第23-24页 |
·EST 技术的主要应用 | 第24-26页 |
·EST 技术的局限性 | 第26-27页 |
4 生物信息学在EST 中的应用 | 第27-34页 |
·生物信息学概念、产生背景及研究内容 | 第27-28页 |
·生物信息学相关数据库 | 第28-29页 |
·生物信息学在EST 技术中的应用 | 第29-34页 |
5 甘蔗EST 的研究现状 | 第34-35页 |
6 本研究目的及技术路线 | 第35-37页 |
·研究目的 | 第35页 |
·技术路线 | 第35-37页 |
第二章 甘蔗叶片及茎全长cDNA 文库构建 | 第37-53页 |
1 材料与方法 | 第37-46页 |
·材料 | 第37-38页 |
·方法 | 第38-46页 |
2 结果与分析 | 第46-49页 |
·甘蔗叶片和茎总RNA 的提取及mRNA 的分离纯化 | 第46-47页 |
·双链cDNA(dscDNA)的合成及检测 | 第47页 |
·文库的质量鉴定 | 第47-49页 |
3 讨论 | 第49-53页 |
·总RNA 和mRNA 质量 | 第49页 |
·构建cDNA 文库所用载体的选择 | 第49-50页 |
·全长cDNA 文库构建方法的选择及改进 | 第50-51页 |
·cDNA 全长判定 | 第51-53页 |
第三章 甘蔗叶片和茎表达序列标签(EST)测序和分析 | 第53-68页 |
1 材料与方法 | 第53-59页 |
·材料 | 第53-54页 |
·方法 | 第54-59页 |
2 结果与分析 | 第59-64页 |
·大规模质粒DNA 的提取及EST 产生 | 第59页 |
·有效EST 的获得 | 第59-61页 |
·EST 序列的拼接结果 | 第61页 |
·EST 序列注释及功能分类 | 第61-64页 |
3 讨论 | 第64-68页 |
·EST 测序 | 第64-66页 |
·EST 序列生物信息学分析 | 第66-68页 |
第四章 几个抗逆基因的生物信息学分析及原核表达和Real-time PCR 分析 | 第68-125页 |
1 材料与方法 | 第69-77页 |
·材料 | 第69-70页 |
·方法 | 第70-77页 |
2 结果与分析 | 第77-115页 |
·Sc-Lea 的生物信息学分析及原核表达和表达特性分析 | 第77-81页 |
·Sc-MnSOD 的生物信息学分析及原核表达和表达特性分析 | 第81-86页 |
·Sc-zf 的生物信息学分析及原核表达和表达特性分析 | 第86-92页 |
·Sc-SAMDC 的生物信息学分析及原核表达和表达特性分析 | 第92-99页 |
·Sc-WRKY 的生物信息学分析及原核表达和表达特性分析 | 第99-105页 |
·Sc-GST 的生物信息学分析及原核表达和表达特性分析 | 第105-110页 |
·Sc-CyP 的生物信息学分析及原核表达和表达特性分析 | 第110-115页 |
3 讨论 | 第115-125页 |
·甘蔗胚胎晚期丰富蛋白基因(Sc-Lea) | 第115-117页 |
·甘蔗锰超氧化物歧化酶基因(Sc-MnSOD) | 第117-118页 |
·甘蔗锌指蛋白基因(Sc-zf) | 第118-119页 |
·甘蔗S-腺苷蛋氨酸脱羧酶基因(Sc-SAMDC) | 第119-121页 |
·甘蔗WRKY 转录因子(Sc-WRKY) | 第121-122页 |
·甘蔗谷胱甘肽硫转移酶基因(Sc-GST) | 第122-123页 |
·甘蔗亲环蛋白基因(Sc-CyP) | 第123-125页 |
第五章 结论与展望 | 第125-128页 |
参考文献 | 第128-143页 |
附表及附录 | 第143-157页 |
附表1 甘蔗叶片117 个EST 所代表的87 种功能已知蛋白功能分类表 | 第144-148页 |
附表2 甘蔗茎134 个EST 所代表的103 种功能已知蛋白功能分类表 | 第148-154页 |
附表3 缩略词表 | 第154-155页 |
附表4 主要试剂溶液及其配制表 | 第155-156页 |
附录Ⅰ Honglang 营养液的配制 | 第156-157页 |
致谢 | 第157页 |