蒙古绵羊绒毛膜滋养层细胞的体外培养与鉴定
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-22页 |
| ·绵羊滋养层细胞概述 | 第9-11页 |
| ·合体滋养细胞 | 第9页 |
| ·单核立方上皮细胞 | 第9-10页 |
| ·双核上皮细胞 | 第10-11页 |
| ·胎盘的形成及妊娠期的变化 | 第11-13页 |
| ·胎盘的功能 | 第13页 |
| ·胎盘的种类 | 第13-14页 |
| ·蒙古绵羊胚胎发育特征 | 第14-15页 |
| ·滋养层细胞的建系 | 第15-17页 |
| ·细胞系的建立方法 | 第15页 |
| ·BEWO细胞 | 第15-17页 |
| ·滋养层细胞的应用 | 第17页 |
| ·滋养层细胞的体外分离 | 第17-20页 |
| ·细胞分离方法 | 第17-19页 |
| ·滋养层细胞原代培养方法的缺陷 | 第19-20页 |
| ·原代培养滋养层细胞的质量鉴定 | 第20-21页 |
| ·细胞角蛋白 | 第20页 |
| ·波形纤维蛋白 | 第20-21页 |
| ·人绒毛膜促性腺激素 | 第21页 |
| ·绵羊滋养层蛋白-1 | 第21页 |
| ·研究意义 | 第21-22页 |
| 2 试验材料与方法 | 第22-30页 |
| ·试验材料 | 第22-23页 |
| ·试验动物 | 第22页 |
| ·试验药品及试剂 | 第22页 |
| ·仪器设备 | 第22-23页 |
| ·试验方法 | 第23-30页 |
| ·试剂配置 | 第23页 |
| ·细胞的原代培养方法筛选 | 第23-24页 |
| ·组织块培养法 | 第23-24页 |
| ·消化法 | 第24页 |
| ·绵羊滋养层细胞纯化及活力检测 | 第24-25页 |
| ·不同的孕期对滋养层细胞的影响 | 第25页 |
| ·蒙古绵羊滋养层细胞培养体系的筛选 | 第25页 |
| ·细胞冻存试验 | 第25-26页 |
| ·滋养层细胞的复苏试验 | 第26页 |
| ·透射电镜观察 | 第26-27页 |
| ·细胞免疫组化染色 | 第27页 |
| ·HE染色 | 第27-28页 |
| ·PCR检测滋养蛋白-1 | 第28-29页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第28页 |
| ·cDNA合成 | 第28-29页 |
| ·PCR反应 | 第29页 |
| ·不同孕期的绵羊胎盘绒毛膜的免疫组化检测 | 第29-30页 |
| 3 结果 | 第30-44页 |
| ·培养方法筛选结果 | 第30页 |
| ·原代培养细胞的生长及形态观察 | 第30-32页 |
| ·胎龄对细胞活性的影响 | 第32-33页 |
| ·滋养层细胞培养体系的筛选 | 第33-34页 |
| ·滋养层细胞的冷冻及复苏对细胞的形态、活性的影响 | 第34-35页 |
| ·透射电镜观察滋养层细胞超微结构结构 | 第35-37页 |
| ·RNA分析与定量 | 第37-38页 |
| ·RT-PCR检测的结果 | 第38页 |
| ·绵羊胎盘绒毛膜免疫组化结果 | 第38-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |
