| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-11页 |
| 1 绪论 | 第11-19页 |
| ·病原学 | 第11页 |
| ·ASF的流行病学 | 第11-13页 |
| ·森林循环 | 第11-12页 |
| ·家猪 | 第12页 |
| ·森林循环和家猪间的传播 | 第12页 |
| ·分子流行病学 | 第12-13页 |
| ·ASF传入亚洲的风险分析 | 第13页 |
| ·ASFV感染机制 | 第13-17页 |
| ·病毒侵入宿主细胞的胞吞机制 | 第13-14页 |
| ·ASFV在侵入宿主细胞后的DNA复制机制 | 第14-15页 |
| ·参与ASFV装配过程的蛋白及装配机制 | 第15-16页 |
| ·成熟病毒粒子向胞外的运输与释放机制 | 第16页 |
| ·与病毒毒力有关的蛋白及其作用 | 第16-17页 |
| ·参与ASFV逃避宿主免疫防御机制的蛋白及其作用机制 | 第17页 |
| ·ASFV检测方法 | 第17-19页 |
| ·病毒核酸检测 | 第18-19页 |
| ·酶联免疫吸附法(ELISA) | 第19页 |
| 2 ASFV实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用 | 第19-30页 |
| ·材料和方法 | 第19-23页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-23页 |
| ·实验结果 | 第23-28页 |
| ·引物和探针的设计 | 第23页 |
| ·pMD18T-316质粒的PCR扩增 | 第23页 |
| ·实时荧光定量PCR退火温度的优化 | 第23-25页 |
| ·Mg2+浓度的优化 | 第25页 |
| ·引物探针浓度的优化 | 第25页 |
| ·标准曲线的建立 | 第25-26页 |
| ·重复性试验 | 第26-27页 |
| ·敏感性试验 | 第27页 |
| ·特异性试验 | 第27-28页 |
| ·样品检测 | 第28页 |
| ·讨论 | 第28-30页 |
| 3 ASFV VP73蛋白主要抗原表位区的原核表达及多克隆抗体的制备 | 第30-43页 |
| ·材料 | 第30-32页 |
| ·质粒 | 第30页 |
| ·试剂及材料 | 第30-31页 |
| ·仪器 | 第31页 |
| ·常用试剂配制 | 第31-32页 |
| ·实验动物 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-38页 |
| ·ASFV VP73蛋白主要抗原表位区的原核表达 | 第32-36页 |
| ·VP73主要抗原区融合蛋白多克隆抗体的制备 | 第36-38页 |
| ·结果 | 第38-41页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定及酶切鉴定 | 第38-39页 |
| ·重组质粒的序列测定 | 第39页 |
| ·重组质粒pET32a-VP73的诱导时间优化 | 第39页 |
| ·VP73融合蛋白的大量表达与纯化 | 第39-40页 |
| ·VP73融合蛋白的Western Blot鉴定 | 第40-41页 |
| ·VP73主要抗原表位区蛋白的免疫特异性测定 | 第41页 |
| ·间接ELISA效价测定多克隆抗体 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 4 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 作者简介 | 第52页 |
