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紫花苜蓿再生体系及遗传转化的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-9页
目录第9-13页
缩略词中英文对照表第13-14页
第一章 文献综述第14-28页
   ·紫花苜蓿再生途径第15-16页
   ·影响紫花苜蓿再生体系建立的因素第16-19页
     ·外植体的选择第16-17页
     ·外源激素第17页
     ·基因型第17-18页
     ·培养基第18页
     ·添加物的使用第18-19页
   ·苜蓿体细胞超微结构研究第19-20页
   ·苜蓿转基因技术第20-23页
     ·根癌农杆菌介导的基因转移第20-21页
     ·基因枪法第21-22页
     ·花粉管通道法第22页
     ·其他方法第22-23页
   ·支付耐盐基因及研究进展第23-26页
     ·植物耐盐基因第23-24页
     ·Na~+/H~+逆向转运蛋白基因SeNHX1转基因研究第24-25页
     ·耐盐转基因苜蓿第25-26页
   ·本课题研究目标及研究内容第26-28页
第二章 六个紫花苜蓿栽培品种再生体系的建立第28-42页
   ·材料和方法第28-29页
     ·植物材料第28页
     ·植物激素第28页
     ·培养基第28-29页
     ·主要设备第29页
   ·实验方法第29-31页
     ·紫花苜蓿无菌苗的培养第29-30页
     ·不同类型外植体愈伤组织的诱导第30页
     ·不同类型外植体愈伤组织的分化培养第30页
     ·子叶愈伤组织诱导过程中2,4-D及2,4-D与KT的确定第30页
     ·植物激素在子叶愈伤组织分化中的作用第30页
     ·愈伤组织诱导时间对不定芽分化的影响第30页
     ·紫花苜蓿再生植株的获得第30-31页
     ·数据统计与分析第31页
     ·紫花苜蓿组织形态学观察第31页
   ·结果与分析第31-38页
     ·不同外植体愈伤组织的诱导第31-32页
     ·不同部位外植体愈伤组织不定芽的分化第32页
     ·不同2,4-D与KT组合对紫花苜蓿愈伤组织诱导的影响第32-34页
     ·不同2,4-D与KT组合对紫花苜蓿愈伤组织不定芽的分化第34-36页
     ·愈伤组织诱导时间对紫花苜蓿不定芽分化的影响第36-37页
     ·外植体诱导形成愈伤组织过程的形态分析第37-38页
     ·紫花苜蓿愈伤组织电镜观察第38页
   ·讨论第38-42页
     ·紫花苜蓿6个栽培品种再生能力的比较第38-39页
     ·不同外植体的选择对紫花苜蓿再生的影响第39页
     ·植物外源激素对紫花苜蓿组织培养的影响第39-41页
     ·紫花苜蓿组织培养形态学观察第41-42页
第三章 农杆菌介导SeNHX1基因转化紫花苜蓿的研究第42-62页
   ·材料和方法第42-44页
     ·植物材料第42页
     ·大肠杆菌和农杆菌工程菌及质粒第42-43页
     ·主要试剂第43页
     ·培养基第43-44页
     ·主要仪器设备第44页
   ·方法第44-48页
     ·载体pB1121-SeNHX1的检测第44-45页
     ·农杆菌介导紫花苜蓿子叶遗传转化方法第45-46页
     ·头孢霉素抑菌素浓度的选择第46页
     ·选择培养基中卡那霉素选择压的确定第46页
     ·根癌农杆菌适宜侵染浓度和侵染时间的确定第46页
     ·超声波处理——根癌农杆菌介导的紫花苜蓿遗传转化第46-47页
     ·转化体的分子生物学检测第47-48页
   ·结果与分析第48-58页
     ·载体pBl121-SeNHX1鉴定结果分析第48-52页
     ·头孢霉素抑菌浓度的确定第52页
     ·卡那霉素选择压的确立第52-54页
     ·根癌农杆菌侵染浓度及侵染时间对转化的影响第54-55页
     ·超声波处理对转化效率的影响第55-56页
     ·部分抗生愈伤组织PCR检测第56-58页
   ·讨论第58-62页
     ·抗生素在紫花苜蓿遗传转化中作用及其影响第58-59页
     ·菌液浓度及侵染时间的选择对转化的影响第59-60页
     ·超声波处理有利于提高农杆菌介导法转化效率第60-62页
第四章 结论与讨论第62-66页
   ·紫花苜蓿高效再生体系的建立第62页
   ·根癌农杆菌介导的紫花苜蓿子叶遗传转化的研究第62-63页
   ·超声波辅助根癌农杆菌介导法第63页
   ·部分卡那霉素抗生愈伤组织的PCR检测第63页
   ·本研究的创新点第63页
   ·下一步研究工作的设想第63-66页
参考文献第66-72页
附录第72-74页
附图A第74-76页
附图B第76-78页
致谢第78-80页
攻读学位期间发表的学术论文第80页

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