香灰菌产凝集素培养条件的优化和香灰凝集素的分离纯化及部分性质的研究
| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 1 引言 | 第13-28页 |
| ·凝集素的概念和分类 | 第13-15页 |
| ·凝集素的概念 | 第13-14页 |
| ·凝集素的分类 | 第14-15页 |
| ·凝集素的结构 | 第15-18页 |
| ·凝集素的糖链结构 | 第15-16页 |
| ·凝集素的亚基结构 | 第16-17页 |
| ·凝集素的晶体结构 | 第17-18页 |
| ·凝集素的分离方法 | 第18-19页 |
| ·凝集素的生物学功能 | 第19-23页 |
| ·植物凝集素的生物学功能 | 第20-21页 |
| ·防卫作用 | 第20页 |
| ·植物储存蛋白和专化的识别因子 | 第20-21页 |
| ·动物凝集素的生物学功能 | 第21-22页 |
| ·机体防御功能 | 第21页 |
| ·进行识别与结合对细胞产生信号作用 | 第21页 |
| ·调节细胞-细胞、细胞-基质间的反应 | 第21-22页 |
| ·真菌凝集素的生物学功能 | 第22-23页 |
| ·生长发育与形态发生 | 第22页 |
| ·休眠 | 第22页 |
| ·为便于寄生感染而作的形态变化 | 第22页 |
| ·菌根形成早期的分子识别 | 第22-23页 |
| ·凝集素的应用 | 第23-27页 |
| ·研究细胞表面的特征、鉴定糖链结构 | 第23页 |
| ·分离和纯化含糖高分子 | 第23-24页 |
| ·用于分离细胞 | 第24页 |
| ·利用凝集素设计抗菌、抗病毒药物 | 第24-25页 |
| ·用于恶性肿瘤等疾病的诊断 | 第25页 |
| ·作为抗肿瘤药物的研究 | 第25-27页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
| 2 材料和方法 | 第28-38页 |
| ·实验材料 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28页 |
| ·PDA培养基 | 第28页 |
| ·种子培养基 | 第28页 |
| ·牛肉膏蛋白胨培养基 | 第28页 |
| ·主要试剂配置 | 第28-30页 |
| ·Schiff试剂 | 第28-29页 |
| ·Alsevers氏抗凝剂 | 第29页 |
| ·磷酸缓冲液配置 | 第29页 |
| ·考马斯亮蓝R-250染色液 | 第29页 |
| ·考马斯亮蓝脱色液 | 第29页 |
| ·考马斯亮蓝G-250 | 第29页 |
| ·SDS-PAGE分离胶制备 | 第29-30页 |
| ·SDS-浓缩胶的制备 | 第30页 |
| ·实验试剂 | 第30-32页 |
| ·实验设备 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-38页 |
| ·鼠红细胞的分离 | 第32-33页 |
| ·透析袋的处理方法 | 第33页 |
| ·血凝集活性的测定方法 | 第33页 |
| ·不同碳氮源对香灰菌丝合成凝集素的影响 | 第33-34页 |
| ·斜面菌种活化培养 | 第33页 |
| ·摇瓶种子培养 | 第33页 |
| ·碳源的选择优化 | 第33页 |
| ·氮源的选择优化 | 第33-34页 |
| ·碳氮比的选择优化 | 第34页 |
| ·凝集素活性的测定 | 第34页 |
| ·HSL的分离纯化 | 第34-35页 |
| ·硫酸铵沉淀的最佳分级范围确定 | 第34页 |
| ·HSL粗品的制备 | 第34-35页 |
| ·DEAE-Cellulose离子交换柱层析 | 第35页 |
| ·Sephadex G-100分子凝胶过滤层析 | 第35页 |
| ·凝集素纯度和亚基分子量的测定 | 第35页 |
| ·电泳凝胶的糖染色法 | 第35-36页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第36页 |
| ·凝集素中性糖含量测定 | 第36页 |
| ·凝集素糖肽键特征分析 | 第36页 |
| ·凝集素紫外扫描 | 第36页 |
| ·HSL的生化特性 | 第36-37页 |
| ·糖抑制实验 | 第36-37页 |
| ·热稳定性测定 | 第37页 |
| ·酸碱稳定性测定 | 第37页 |
| ·金属离子对凝集素活性的影响 | 第37页 |
| ·凝集素的抑菌实验 | 第37-38页 |
| ·对真菌的抑菌实验 | 第37页 |
| ·对细菌的抑菌试验 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-50页 |
| ·血凝集活性的测定 | 第38-39页 |
| ·碳氮源优化的结果 | 第39-41页 |
| ·碳源的选择结果 | 第39页 |
| ·氮源的选择结果 | 第39-40页 |
| ·碳氮比的选择结果 | 第40-41页 |
| ·HSL的分离纯化 | 第41-43页 |
| ·硫酸铵沉淀的最佳分级范围 | 第41页 |
| ·DEAE-纤维素离子交换层析 | 第41-42页 |
| ·Sephadex G-100凝胶过滤层析 | 第42-43页 |
| ·HSL的纯度鉴定 | 第43页 |
| ·HSL亚基分子量和糖蛋白染色 | 第43-45页 |
| ·HSL中性糖含量 | 第45页 |
| ·HSL糖肽键特征分析 | 第45-46页 |
| ·紫外吸收光谱的测定 | 第46页 |
| ·HSL的生化特性 | 第46-49页 |
| ·HSL的糖抑制实验 | 第46-47页 |
| ·HSL的热稳定测定 | 第47-48页 |
| ·HSL的酸碱稳定性 | 第48页 |
| ·金属离子对HSL的凝集活性的影响 | 第48-49页 |
| ·HSL的抑菌实验 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| ·香灰菌的培养优化 | 第50页 |
| ·HSL的分离纯化 | 第50-51页 |
| ·HSL对血红细胞凝集的作用机理 | 第51-53页 |
| ·HSL的抑菌作用 | 第53页 |
| 5 总结 | 第53-55页 |
| ·碳氮源优化的结果 | 第53页 |
| ·凝集素的分离纯化 | 第53页 |
| ·凝集素的生物学性质 | 第53-54页 |
| ·凝集素的抑菌作用 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 附录 | 第63页 |
