| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-23页 |
| ·奶牛乳腺发育的研究进展 | 第13-15页 |
| ·胚胎期乳腺发育 | 第13页 |
| ·青春期乳腺发育 | 第13-14页 |
| ·妊娠期乳腺发育 | 第14页 |
| ·泌乳期乳腺发育 | 第14页 |
| ·退化期乳腺发育 | 第14-15页 |
| ·激素、生长因子与奶牛乳腺的发育和泌乳 | 第15-18页 |
| ·激素调控奶牛乳腺发育和泌乳 | 第15-17页 |
| ·生长因子调控奶牛乳腺发育和泌乳 | 第17-18页 |
| ·胰岛素样生长因子家族 | 第18-22页 |
| ·IGFs及其受体的结构 | 第19-20页 |
| ·IGF-ⅠR的信号传导途径 | 第20-21页 |
| ·IGFs及其受体在乳腺发育过程中的作用 | 第21-22页 |
| ·研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-37页 |
| ·不同发育时期奶牛乳腺组织Igf-Ⅰ、Igf-Ⅱ、Igf-Ⅰr、Igfbp5 mRNA的表达 | 第23-26页 |
| ·总RNA的提取 | 第23-24页 |
| ·荧光定量RT-PCR检测mRNA的表达 | 第24-26页 |
| ·泌乳期奶牛乳腺上皮细胞的培养 | 第26-28页 |
| ·实验材料 | 第26页 |
| ·培养器皿预处理 | 第26-27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·主要试剂及配制 | 第27-28页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的原代培养 | 第28页 |
| ·IGF-Ⅰ对奶牛乳腺上皮细胞的作用 | 第28-30页 |
| ·乳腺上皮细胞培养 | 第28页 |
| ·实验分组 | 第28-29页 |
| ·IGF-Ⅰ对奶牛乳腺上皮细胞Igf-Ⅰr mRNA表达的影响 | 第29页 |
| ·IGF-Ⅰ对奶牛乳腺上皮细胞增殖的影响 | 第29-30页 |
| ·IGF-Ⅰ对奶牛乳腺上皮细胞β-Casein mRNA表达的影响 | 第30页 |
| ·Igf-Ⅰr基因沉寂试验 | 第30-37页 |
| ·乳腺上皮细胞的培养 | 第30页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·RNA干扰试剂的配制 | 第30-31页 |
| ·转染操作步骤 | 第31页 |
| ·高效siRNA及最佳时间的筛选 | 第31-32页 |
| ·转染效率检测 | 第32页 |
| ·Igf-Ⅰr基因沉寂对乳腺上皮细胞相关蛋白的影响 | 第32-35页 |
| ·Igf-Ⅰr基因沉寂对奶牛乳腺上皮细胞增殖的影响 | 第35页 |
| ·Igf-Ⅰr基因沉寂对奶牛乳腺上皮细胞β-Casein表达的影响 | 第35-37页 |
| 3 结果 | 第37-53页 |
| ·不同发育时期奶牛乳腺组织Igf-Ⅰ、Igf-Ⅱ、Igf-Ⅰr、Igfbp5 mRNA的表达 | 第37-44页 |
| ·奶牛乳腺组织总RNA提取及检测 | 第37-38页 |
| ·不同发育时期奶牛乳腺组织Igf-ⅠmRNA的表达 | 第38-40页 |
| ·不同发育时期奶牛乳腺组织Ig-Ⅱ mRNA的表达 | 第40-41页 |
| ·不同发育时期奶牛乳腺组织Igfbp5 mRNA的表达 | 第41-43页 |
| ·不同发育时期奶牛乳腺组织Igf-Ⅰr mRNA的表达 | 第43-44页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞分离培养 | 第44-45页 |
| ·IGF-Ⅰ对奶牛乳腺上皮细胞的作用 | 第45-46页 |
| ·IGF-Ⅰ对奶牛乳腺上皮细胞Igf-Ⅰr mRNA表达的影响 | 第45页 |
| ·IGF-Ⅰ对奶牛乳腺上皮细胞增殖的影响 | 第45-46页 |
| ·IGF-Ⅰ对奶牛乳腺上皮细胞β-Casein mRNA表达的影响 | 第46页 |
| ·Igf-Ⅰr基因沉寂试验结果 | 第46-53页 |
| ·高效抑制序列及最佳干扰时间筛选结果 | 第46-47页 |
| ·最佳siRNA转染量的筛选结果 | 第47-48页 |
| ·转染效率的检测结果 | 第48页 |
| ·Igf-Ⅰr基因沉寂对乳腺上皮细胞相关蛋白的影响 | 第48-51页 |
| ·Igf-Ⅰr基因沉寂对奶牛乳腺上皮细胞增殖的影响 | 第51-52页 |
| ·Igf-Ⅰr基因沉寂对奶牛乳腺上皮细胞β-Casein mRNA的影响 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-58页 |
| ·奶牛乳腺中IGFs及其受体的表达 | 第53页 |
| ·添加IGF-Ⅰ对奶牛乳腺上皮细胞的影响 | 第53-54页 |
| ·Igf-Ⅰr基因沉寂对奶牛乳腺上皮细胞的影响 | 第54-56页 |
| ·RNA干扰机制 | 第54-55页 |
| ·细胞转染技术 | 第55页 |
| ·转染条件的优化 | 第55-56页 |
| ·Igf-Ⅰr基因沉寂对乳腺上皮细胞相关蛋白的影响 | 第56页 |
| ·研究展望 | 第56-58页 |
| 5 结论 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 附录：缩略语表 | 第67-68页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第68页 |
