摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-10页 |
引言 | 第10-11页 |
第一章 褐藻胶裂解酶研究现状 | 第11-18页 |
1 褐藻裂解酶来源及分类 | 第11-14页 |
·来源 | 第11-12页 |
·分类 | 第12-13页 |
·酶的结构特点 | 第13页 |
·酶的作用方式以及降解产物 | 第13-14页 |
2 褐藻裂解酶的分离纯化方法及性质 | 第14-15页 |
3 褐藻裂解酶分子生物学研究 | 第15-16页 |
4 褐藻裂解酶的研究及应用展望 | 第16-18页 |
第二章 短滨螺褐藻胶裂解酶的纯化 | 第18-27页 |
1 试验材料 | 第18-19页 |
·试验贝类 | 第18页 |
·试验试剂及仪器 | 第18页 |
·试验仪器 | 第18-19页 |
2 试验方法 | 第19-21页 |
·粗酶的提取 | 第19页 |
·硫酸铵分段盐析纯化 | 第19页 |
·阳离子交换柱层析纯化褐藻胶裂解酶 | 第19-20页 |
·蛋白质浓度测定 | 第20页 |
·褐藻胶裂解酶活力测定 | 第20页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳法 | 第20-21页 |
3 试验结果 | 第21-24页 |
·CM-TOYOPEARL-650M 柱层析纯化 | 第21-22页 |
·纯化结果 | 第22-24页 |
4 讨论 | 第24-27页 |
第三章 短滨螺褐藻胶裂解酶 N-端序列测定 | 第27-35页 |
1 试验材料 | 第27-28页 |
·试验样品 | 第27-28页 |
·实验仪器 | 第28页 |
·试验试剂 | 第28页 |
2 试验方法 | 第28-31页 |
·SDS-PAGE 及电印迹反应 | 第28-29页 |
·N-端氨基酸测序原理及操作步骤 | 第29-31页 |
3 实验结果 | 第31-32页 |
·N-端序列测定 | 第31-32页 |
4 讨论 | 第32-35页 |
·短滨螺褐藻胶裂解酶 N-端序列比较 | 第32-33页 |
·短滨螺与皱纹盘鲍褐藻胶裂解酶 N-端序列比较 | 第33-35页 |
第四章 短滨螺褐藻胶裂解酶(LbAly35)基因全长克隆 | 第35-64页 |
1 材料与方法 | 第35-46页 |
·试验材料 | 第35-36页 |
·试验方法 | 第36-46页 |
2 试验结果 | 第46-59页 |
·RNA 提取 | 第46-47页 |
·短滨螺褐藻胶裂解酶 LbAly35 部分片段扩增结果 | 第47-50页 |
·短滨螺褐藻胶裂解酶 LbAly35-3′RACE 扩增结果 | 第50-53页 |
·短滨螺褐藻胶裂解酶 LbAly35-5′RACE 扩增结果 | 第53-55页 |
·短滨螺褐藻胶裂解酶 LbAly35 基因全长扩增结果 | 第55-59页 |
3 讨论 | 第59-64页 |
·生物信息学分析 | 第59-60页 |
·同源性比较 | 第60-64页 |
第五章 褐藻胶裂解酶(LbAly35 和 LbAly28)质谱分析 | 第64-69页 |
1 试验试剂及仪器 | 第64-65页 |
·试验仪器 | 第64页 |
·试验试剂 | 第64-65页 |
2 试验方法 | 第65页 |
3 试验结果 | 第65-67页 |
4 讨论 | 第67-69页 |
小结 | 第69-71页 |
附录 | 第71-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-77页 |