| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 縮略语表 | 第9-10页 |
| 1. 前言 | 第10-23页 |
| ·生物固氮 | 第10页 |
| ·根瘤菌与豆科植物共生固氮体系 | 第10-11页 |
| ·宿主豆科植物对根瘤菌类菌体分化的控制 | 第11页 |
| ·变形细菌中的不对称分化现象 | 第11-16页 |
| ·细胞周期 | 第11-14页 |
| ·不对称分化 | 第14-16页 |
| ·ctrA基因及其调控作用 | 第16-21页 |
| ·CtrA对细胞周期的调控作用 | 第16-17页 |
| ·CtrA相关的调控通路和机制 | 第17-20页 |
| ·ctrA Box的发现和保守性 | 第20-21页 |
| ·研究目的与意义 | 第21-23页 |
| 2. 材料和方法 | 第23-34页 |
| ·材料 | 第23-31页 |
| ·菌株质粒和植物 | 第23-24页 |
| ·培养基 | 第24-28页 |
| ·抗生素 | 第28-29页 |
| ·缓冲液与其它分子生物学试剂 | 第29-30页 |
| ·主要实验仪器及及耗材等 | 第30-31页 |
| ·方法 | 第31-34页 |
| ·基本分子生物学操作 | 第31页 |
| ·SOE-PCR | 第31页 |
| ·三亲本结合转移 | 第31-32页 |
| ·紫云英盆栽 | 第32页 |
| ·固氮酶活测定(乙炔还原法) | 第32-33页 |
| ·荧光定量PCR | 第33-34页 |
| 3. 结果与分析 | 第34-58页 |
| ·ctrA基因插入失活突变体的构建与筛选 | 第34-38页 |
| ·ctrA基因克隆 | 第34-35页 |
| ·获得kan基因 | 第35页 |
| ·soe PCR扩增ctrA-kan片段 | 第35-36页 |
| ·构建pJQ-ctrA-kan重组质粒 | 第36-37页 |
| ·重组质粒pJQ-ctrA-kan导入华癸根瘤菌7653R | 第37-38页 |
| ·根瘤菌7653R ctrA插入失活突变体的筛选 | 第38页 |
| ·ctrA渗漏表达重组质粒的构建 | 第38-41页 |
| ·构建pJQ-ctrA-kan2质粒 | 第38-39页 |
| ·构建pHN-ctrA质粒 | 第39页 |
| ·筛选ctrA双交换突变体7653R | 第39-41页 |
| ·引入额外拷贝、组成型表达ctrA对于根瘤菌生长及固氮的影响 | 第41-45页 |
| ·组成型表达质粒pBBR-ctrA的构建 | 第41-42页 |
| ·引入额外拷贝ctrA对于根瘤菌自生生长的影响 | 第42页 |
| ·引入额外拷贝ctrA对于根瘤菌共生固氮的影响 | 第42-43页 |
| ·ctrA表达量的比较测定 | 第43-45页 |
| ·与CtrA发生相互作用的宿主蛋白初步筛选 | 第45-50页 |
| ·构建诱饵质粒pGBKT7-ctrA | 第45页 |
| ·诱饵质粒pGBKT7-ctrA转化酵母菌株Y187 | 第45页 |
| ·诱饵质粒自激活性及毒性检测 | 第45-47页 |
| ·紫云英酵母双杂交AD cDNA文库的筛选 | 第47-48页 |
| ·阳性克隆结果分析 | 第48-50页 |
| ·根瘤菌7653R受CtrA调控的基因预测及分析 | 第50-58页 |
| ·利用ctrA Box预测其调控基因 | 第50-56页 |
| ·CtrA可能调控共生结瘤相关功能基因 | 第56页 |
| ·CtrA蛋白系统发育分析 | 第56-58页 |
| 4. 讨论与展望 | 第58-60页 |
| ·讨论 | 第58-59页 |
| ·展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 附录 | 第64-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
