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人BAFF基因的克隆、表达及抗体制备

中文摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
英文缩略语第8-10页
前言第10-12页
材料和方法第12-32页
 1.实验材料第12-19页
   ·主要化学试剂及抗体第12页
   ·主要工具酶、分子量标准和试剂盒第12页
   ·引物第12-13页
   ·菌株及质粒载体第13-14页
   ·细胞株第14页
   ·仪器设备第14-15页
   ·实验动物第15页
   ·溶液配制第15-19页
 2.方法第19-32页
   ·hBAFF_(83-285)基因的克隆和表达载体的构建第19-21页
   ·hBAFF_(83-285)-His蛋白的原核表达及纯化第21-22页
   ·hsBAFF基因的克隆、原核表达及纯化第22页
   ·pGEX-4T-1/hsBAFF表达载体的构建第22页
   ·GST-hsBAFF蛋白的原核表达及纯化第22-23页
   ·蛋白质浓度测定第23-24页
   ·抗hBAFF_(83-285)单克隆抗体的制备第24-26页
   ·抗hBAFF_(83-285)单克隆抗体特异性鉴定第26-27页
   ·单克隆抗体的亚类鉴定及纯化第27-28页
   ·辣根过氧化物酶标记抗体第28-29页
   ·ELISA检测HRP标记抗体的合适稀释度第29页
   ·抗hsBAFF蛋白单克隆抗体之间配对实验和可配对抗体灵敏度检测第29-30页
   ·抗GST-hsBAFF多克隆抗体的制备第30页
   ·兔多抗血清的鉴定第30-32页
结果第32-53页
 1.pET-30a(+)/hBAFF_(83-285)重组质粒的构建及鉴定第32页
 2.hBAFF_(83-285)基因的原核表达及纯化第32-34页
 3.hsBAFF基因的克隆、原核表达及纯化第34-36页
 4.重组蛋白浓度测定第36-38页
 5.重组hBAFF_(83-285)-His蛋白免疫小鼠效果检测第38-39页
 6.抗hsBAFF单克隆抗体特异性鉴定第39-44页
 7.抗hsBAFF单克隆抗体的亚类鉴定及纯化第44-45页
 8.HRP标记单克隆抗体结果检测第45-46页
 9.抗hsBAFF单抗初步建立检测hsBAFF的双抗体夹心ELISA方法第46-47页
 10.pGEX-4T-1/hsBAFF表达载体的构建第47页
 11.GST-hsBAFF蛋白的原核表达第47-48页
 12.GST-hsBAFF蛋白的纯化第48-49页
 13.GST融合蛋白定量及免疫新西兰兔免疫效果检测第49-50页
 14.兔多抗血清的鉴定第50-53页
讨论第53-57页
小结第57-58页
参考文献第58-60页
综述第60-68页
附录第68-72页
致谢第72页

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