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核转运受体蛋白质KPNA2与转录因子c-Jun相互作用及其生物学意义初探

主要英文缩略词第1-8页
摘要第8-10页
ABSTRACT第10-12页
前言第12-21页
材料与方法第21-27页
 一、实验材料第21-22页
  1. 菌株、质粒及cDNA 文库第21页
  2. 主要试剂第21页
  3. 主要仪器设备第21-22页
 二、 实验方法第22-27页
  1. 分子克隆技术第22页
  2. Y2H 相互作用蛋白质回转验证第22-24页
  3. 蛋白质免疫印记第24-25页
  4. 免疫共沉淀第25页
  5. GST- pull down第25页
  6. 双荧光素酶报告基因实验第25-26页
  7. RT-PCR第26页
  8. 实时定量PCR第26页
  9. 胞核胞质蛋白质的提取第26页
  10. 免疫荧光第26页
  11. 统计学分析第26-27页
结果与分析第27-44页
 一、KPNA2 与c-Jun 存在相互作用第27-34页
  1. Y2H 回转验证第27页
  2. 免疫共沉淀验证第27-29页
  3. GST- pull down 验证第29-31页
  4. KPNA2 的C 端酸性结构域与c-Jun 的C 端亮氨酸拉链区域介导二者相互作用第31-34页
 二、高表达KPNA2 对c-Jun 的亚细胞定位以及AP-1 的转录活性均无影响第34-36页
  1. 高表达KPNA2对c-Jun的亚细胞定位没有影响第34-35页
  2. 高表达KPNA2对AP-1的转录活性没有影响第35-36页
 三、KPNA2 与c-Jun 的相互作用在调节c-Jun 的亚细胞定位及AP-1 转录活性中起重要作用第36-40页
  1. AICAR 处理解离KPNA2 与c-Jun 的相互作用第36-37页
  2. AICAR 处理阻断c-Jun 的核转位第37-38页
  3. AICAR 处理降低AP-1 的转录活性第38页
  4. RNA 干扰KPNA2 体系的建立第38-40页
 四、Importin α家族的其他成员也可以与c-Jun 发生相互作用第40-42页
  1. 载体pDBleu-KPNA1和pFLAG-CMV-2-KPNA1的构建和表达第40-41页
  2. 酵母双杂交检测KPNA1与c-Jun的相互作用第41页
  3. 免疫共沉淀检测KPNA1与c-Jun的相互作用第41-42页
 五、高表达KPNA2 对AP-1 下游基因的影响第42-44页
讨论第44-46页
结论第46-47页
参考文献第47-50页
附录第50-56页
文献综述第56-64页
在读期间发表或投稿的论文第64-65页
个人简历第65-66页
致谢第66页

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