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禽流感H5N1亚型病毒黄爪隼分离株的基因特征及致病性分析

摘要第1-4页
Abstract第4-11页
1 绪论第11-18页
   ·课题背景(或引言)第11页
   ·禽流感病原学第11-16页
     ·禽流感病毒分类第13页
     ·禽流感病毒的命名第13-14页
     ·禽流感病毒的理化特性第14页
     ·禽流感病毒的宿主第14页
     ·禽流感病毒的致病力第14-15页
     ·禽流感病毒的抗原变异第15-16页
   ·1996-2007 H5N1病毒的流行史第16-18页
2 材料和方法第18-30页
   ·实验材料第18-20页
     ·病毒分离第18页
     ·实验动物第18页
     ·受体菌第18页
     ·标准品质粒第18页
     ·实验试剂第18页
     ·实验仪器第18-19页
     ·特异性引物第19-20页
     ·红细胞及抗血清第20页
   ·实验方法第20-30页
     ·血凝试验(HA)第20页
     ·血凝抑制试验(HI)第20-21页
     ·神经氨酸酶抑制实验(NI)第21-22页
     ·病毒RNA的提取第22页
     ·Real-time PCR检测禽流感病毒第22-23页
     ·cDNA合成第23-24页
     ·PCR体系配置及扩增反应条件第24-26页
     ·琼脂糖凝胶电泳第26页
     ·PCR产物的纯化回收第26-27页
     ·连接第27页
     ·感受态细胞的制备第27页
     ·转化第27-28页
     ·质粒的提取第28页
     ·PCR方法鉴定重组质粒第28-29页
     ·序列测定第29页
     ·序列分析第29页
     ·动物试验第29-30页
3 结果第30-58页
   ·血凝价及血凝抑制价第30页
   ·Real-Time PCR检测结果第30-32页
     ·紫外分光光度计的检测结果第30页
     ·SYBR Green Ⅰ RT-PCR溶解曲线第30-31页
     ·SYBR Green Ⅰ RT-PCR扩增曲线第31-32页
   ·SYBR Green Ⅰ RT-PCR检测结果第32页
   ·A/Lesser Kestrel/Harbin/194/2007(H5N1)基因组序列第32-40页
   ·A/Lesser Kestrel/Harbin/194/2007(H5N1)遗传进化树绘制第40-56页
     ·血凝素基因(HA)遗传进化树第40-45页
     ·神经氨酸酶基因(NA)遗传进化树第45-46页
     ·RNA聚合酶基因(PB2,PB1,PA)第46-49页
     ·核糖核蛋白基因(NP)遗传进化树第49-50页
     ·基质蛋白基因(M)遗传进化树第50-51页
     ·非结构蛋白基因(NS)遗传进化树第51-52页
     ·A/Lesser Kestrel/Harbin/194/2007(H5N1)株基因组同源率分析第52-55页
     ·血凝素基因(HA)潜在糖基化位点第55页
     ·血凝素基因(HA)裂解位点第55页
     ·A/Lesser Kestrel/Harbin/194/2007(H5N1)分离株基因特征第55-56页
   ·动物实验结果第56-58页
     ·鸡胚半数致死量EID_(50)第56页
     ·静脉内接种致病指数IVPI第56页
     ·BALB/c鼠致病试验结果第56-58页
4 讨论第58-65页
   ·禽流感病毒的鉴定第58页
   ·A/Lesser Kestrel/Harbin/194/2007(H5N1)株各基因的遗传进化关系分析及同源率分析第58-60页
   ·Lesser Kestrel/Harbin/194/2007(H5N1)株的基因特征第60-64页
   ·猛禽对H5N1病毒传播的初步探讨第64-65页
5 结论第65-66页
参考文献第66-76页
攻读学位期间发表的学术论文第76-77页
致谢第77-78页

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