ACA对CRM1依赖的出核运输抑制作用的初步研究
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-12页 |
| 前言 | 第12-26页 |
| 一、ACA 的结构特点 | 第12-13页 |
| 二、ACA 的生物活性 | 第13-17页 |
| 1. ACA 的抗肿瘤活性 | 第13-15页 |
| 2. ACA 的抗炎症活性 | 第15-16页 |
| 3. ACA 抗胃溃疡活性 | 第16-17页 |
| 4. ACA 与骨质疏松症 | 第17页 |
| 5. ACA 的抗菌活性 | 第17页 |
| 三、ACA 的作用机制与所参与的信号通路 | 第17-20页 |
| 1. NF-κB 信号途径 | 第17-19页 |
| 2. ACA 在NF-κB 激活通路中的作用位点 | 第19-20页 |
| 四、CRM1 蛋白 | 第20-26页 |
| 1. CRM1 的结构概况 | 第20-23页 |
| 2. CRM1 的蛋白与 RNA 核输出功能 | 第23-24页 |
| 3. LMB 与CRM1 的结合 | 第24-26页 |
| 材料与方法 | 第26-43页 |
| 一、主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 二、主要试剂来源 | 第27-28页 |
| 三、主要试剂配制 | 第28-32页 |
| 四、实验方法 | 第32-43页 |
| 1. 测试ACA的细胞毒性 | 第32页 |
| 2. 酵母转化 | 第32-33页 |
| 3. GFP 融合蛋白的表达和观察 | 第33页 |
| 4. 竞争性分析 | 第33-34页 |
| 5. 使用TRIzol 提取RNA | 第34页 |
| 6. 反转录 | 第34-36页 |
| 7. 构建载体 | 第36-38页 |
| 8. 超级感受态细胞的制备 | 第38-39页 |
| 9. 诱导表达 | 第39-41页 |
| 10. Western 杂交 | 第41-42页 |
| 11. 胶迁移分析 | 第42页 |
| 12. MTT 分析 | 第42-43页 |
| 结果与分析 | 第43-56页 |
| 一、ACA 对肿瘤细胞的抑制作用 | 第43-45页 |
| 二、ACA 对核运输的抑制 | 第45-46页 |
| 三、竞争性分析 | 第46-47页 |
| 四、CRM1 的获得 | 第47-49页 |
| 五、CRM1 真核原核表达载体的构建 | 第49-54页 |
| 六、ACA与CRM1相互作用的分析 | 第54-56页 |
| 讨论 | 第56-59页 |
| 一、ACA 对肿瘤细胞的抑制作用 | 第56页 |
| 二、ACA对CRM1依赖的细胞出核运输的抑制 | 第56页 |
| 三、ACA与CRM1可能的作用方式 | 第56-57页 |
| 四、ACA 可能的作用机制 | 第57-59页 |
| 结论与展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 附录 | 第64-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
