| 摘要 | 第1-3页 |
| Summary | 第3-4页 |
| 缩略词 | 第4-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-26页 |
| 1 高等植物与乙烯 | 第8-12页 |
| ·乙烯与果实成熟 | 第8-9页 |
| ·乙烯的生物合成 | 第9页 |
| ·乙烯生物合成的基因工程 | 第9-12页 |
| ·ACC 合成酶基因 | 第9-11页 |
| ·ACC 氧化酶基因 | 第11-12页 |
| 2 反义技术 | 第12-14页 |
| ·反义基因的基本概念 | 第12-13页 |
| ·反义RNA 技术在在果实性状上的控制 | 第13-14页 |
| 3 选择标记基因 | 第14-15页 |
| ·选择标记基因在遗传转化中的作用 | 第14页 |
| ·选择标记基因存在的弊端 | 第14-15页 |
| 4 选用安全的标记基因 | 第15-16页 |
| 5 去除选择标记基因的方法及研究进展 | 第16-25页 |
| ·转座子法 | 第16-18页 |
| ·同源重组法 | 第18页 |
| ·共转化法 | 第18-23页 |
| ·位点特异性重组法 | 第23-25页 |
| 6 本文立题思想 | 第25-26页 |
| 第二章 甜瓜A-AC01 基因共转化载体的构建及对烟草的共转化 | 第26-44页 |
| 1 实验材料 | 第26页 |
| ·菌株及质粒载体 | 第26页 |
| ·工具酶和试剂 | 第26页 |
| ·细菌培养基 | 第26页 |
| 2 实验方法 | 第26-35页 |
| ·质粒的小量提取 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌DH5A感受态细胞的制备与转化 | 第27-28页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第27页 |
| ·质粒DNA 转化大肠杆菌感受态细胞 | 第27-28页 |
| ·用回收试剂盒回收目的片段 | 第28页 |
| ·无选择标记共转化植物表达载体系统的构建过程 | 第28-31页 |
| ·PCD-AAC01 的获取 | 第28-29页 |
| ·PCAMBIA2302 的获取 | 第29-31页 |
| ·植物表达载体导入农杆菌及其鉴定 | 第31-32页 |
| ·农杆菌LBA4404 感受态细胞的制备 | 第31页 |
| ·冻融法将导入根癌农杆菌LBA4404 | 第31页 |
| ·PCR 快速鉴定 | 第31-32页 |
| ·共转化烟草 | 第32-34页 |
| ·工程菌的准备 | 第32-33页 |
| ·受体材料准备 | 第33页 |
| ·侵染 | 第33页 |
| ·共培养 | 第33页 |
| ·选择分化培养 | 第33-34页 |
| ·生根培养 | 第34页 |
| ·共转化植株的检测 | 第34-35页 |
| ·抗性筛选 | 第34页 |
| ·PCR 检测 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-40页 |
| ·无选择标记反义ACC 氧化酶基因植物表达外植体载体的构建及鉴定 | 第35-36页 |
| ·无选择标记基因植物表达载体pCD-aAC01 的构建及鉴定 | 第35-36页 |
| ·只含选择标记基因植物表达载体pCAMBIA2302 的获取及鉴定 | 第36页 |
| ·农杆菌的转化及PCR 鉴定 | 第36-38页 |
| ·无选择标记基因植物表达载体pCD-aAC01 转化农杆菌及PCR 鉴定 | 第36-37页 |
| ·植物表达载体 pCAMBIA2302 转化农杆菌及 PCR 鉴定 | 第37-38页 |
| ·共转化烟草 | 第38-40页 |
| ·Kan 抗性烟草的培养 | 第38-39页 |
| ·共转化植株的PCR 检测 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| ·载体构建 | 第40页 |
| ·农杆菌的转化及鉴定 | 第40-41页 |
| ·烟草的转化 | 第41页 |
| ·共转化 | 第41-42页 |
| 5 结论 | 第42-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 个人简介 | 第52-53页 |
| 导师简介 | 第53-54页 |
