| 中文摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-17页 |
| 符号说明 | 第17-18页 |
| 第一章 前言 | 第18-42页 |
| ·耐旱相关基因的研究进展 | 第18-36页 |
| ·功能基因 | 第18-27页 |
| ·渗透物质生物合成基因 | 第19-24页 |
| ·胚胎晚期丰富蛋白基因 | 第24-25页 |
| ·植物水通道蛋白基因 | 第25-26页 |
| ·细胞抗氧化及活性氧清除相关基因 | 第26页 |
| ·蛋白酶类基因 | 第26-27页 |
| ·调节基因 | 第27-33页 |
| ·信号转导相关基因 | 第27-31页 |
| ·转录因子基因 | 第31-33页 |
| ·胁迫信号转导及诱导基因表达的调控 | 第33-36页 |
| ·差异表达基因克隆技术的研究进展 | 第36-41页 |
| ·差异显示技术 | 第36-37页 |
| ·代表性差异分析 | 第37-38页 |
| ·cDNA-AFLP技术 | 第38页 |
| ·抑制性消减杂交 | 第38-39页 |
| ·基因芯片技术 | 第39-41页 |
| ·本工作的研究意义 | 第41-42页 |
| 第二章 利用SSH和DNA CHIP技术研究干旱胁迫对抽雄开花期玉米叶片基因表达的影响 | 第42-69页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·玉米材料 | 第42页 |
| ·材料的培养和处理 | 第42页 |
| ·实验试剂 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-55页 |
| ·玉米叶片总RNA的提取 | 第42-43页 |
| ·抑制性消减杂交(SSH)实验方法 | 第43-47页 |
| ·叶片mRNA的分离 | 第43-44页 |
| ·cDNA的合成 | 第44页 |
| ·cDNA的Rsa I酶切 | 第44页 |
| ·酶切后cDNA的连接 | 第44-45页 |
| ·两轮消减杂交 | 第45页 |
| ·两轮PCR扩增 | 第45页 |
| ·消减cDNA文库的构建 | 第45-46页 |
| ·对文库插入片断大小检测 | 第46页 |
| ·文库部分克隆的测序和序列分析 | 第46-47页 |
| ·基因芯片(DNA chip)实验方法 | 第47-55页 |
| ·荧光标记cDNA的合成 | 第47-51页 |
| ·芯片杂交 | 第51-52页 |
| ·芯片的扫描和数据分析 | 第52-54页 |
| ·定量RT-PCR验证芯片结果 | 第54-55页 |
| ·结果与讨论 | 第55-69页 |
| ·干旱处理的鉴定 | 第55页 |
| ·叶片总RNA的提取 | 第55页 |
| ·SSH文库构建和EST序列分析 | 第55-59页 |
| ·双链cDNA的合成 | 第55-56页 |
| ·消减杂交后两次PCR的结果分析 | 第56-57页 |
| ·SSH文库的质量分析 | 第57页 |
| ·EST序列分析 | 第57-59页 |
| ·DNA芯片杂交结果分析 | 第59-69页 |
| ·芯片杂交结果 | 第59-61页 |
| ·Real-time PCR对芯片结果的验证 | 第61-62页 |
| ·短期胁迫诱导的信号转导相关基因 | 第62-63页 |
| ·长期胁迫诱导的渗透调节物质代谢相关基因 | 第63-68页 |
| ·芯片数据的获取 | 第68-69页 |
| 第三章 玉米基因ZMFTSH2A与ZMFTSH2B的克隆及分析 | 第69-103页 |
| ·FtsH的研究进展 | 第69-71页 |
| ·实验材料 | 第71-72页 |
| ·植物材料培养 | 第71页 |
| ·菌株及质粒载体 | 第71-72页 |
| ·实验方法 | 第72-87页 |
| ·玉米FtsH2基因全长的克隆 | 第72-74页 |
| ·玉米双链cDNA的合成 | 第72-73页 |
| ·玉米FtsH2的电子克隆 | 第73页 |
| ·引物设计和PCR反应 | 第73-74页 |
| ·PCR产物的回收、克隆及测序 | 第74页 |
| ·玉米FtsH2基因组全长的克隆 | 第74-75页 |
| ·玉米FtsH2基因拷贝数的分析 | 第75-77页 |
| ·采用CTAB法提取玉米叶片基因组DNA | 第75-76页 |
| ·Southern blot杂交步骤 | 第76-77页 |
| ·玉米 ZmFtsH2基因的表达模式分析 | 第77-78页 |
| ·RT-PCR分析ZmFtsH2基因在不同器官中的表达模式 | 第77-78页 |
| ·Real-time RT-PCR分析ZmFtsH2基因在不同处理下的表达模式 | 第78页 |
| ·玉米ZmFtsH2基因在大肠杆菌中的表达 | 第78-82页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第78-79页 |
| ·转化大肠杆菌BL21(DE3) | 第79-80页 |
| ·ZmFtsH2在大肠杆菌中的诱导表达 | 第80页 |
| ·目的蛋白的SDS-PAGE电泳检测 | 第80-82页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第82-83页 |
| ·质粒DNA的提取和酶切 | 第82页 |
| ·DNA片段的回收和定量 | 第82页 |
| ·DNA片段的去磷酸化 | 第82页 |
| ·单链寡核苷酸退火和接头磷酸化 | 第82-83页 |
| ·外源DNA片段与载体片段的连接 | 第83页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备和转化 | 第83页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第83页 |
| ·农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第83-84页 |
| ·材料和培养基 | 第83-84页 |
| ·重组质粒转入农杆菌 | 第84页 |
| ·农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第84页 |
| ·转基因烟草植株的分子检测 | 第84-85页 |
| ·转基因烟草植株的PCR检测 | 第84页 |
| ·转基因烟草植株的RT-PCR检测 | 第84-85页 |
| ·转基因烟草植株的耐旱性测试 | 第85-87页 |
| ·烟草植株的干旱胁迫 | 第85页 |
| ·生理指标的测定 | 第85-87页 |
| ·结果与分析 | 第87-101页 |
| ·玉米基因ZmFtsH2A和ZmFtsH2B的克隆 | 第87-88页 |
| ·ZmFtsH2A和ZmFtsH2B的序列分析 | 第88-91页 |
| ·ZmFtsH2A和ZmFtsH2B的基因组结构 | 第91-92页 |
| ·Southern blot分析 | 第92-93页 |
| ·玉米ZmFtsH2A和ZmFtsH2B的表达模式分析 | 第93-94页 |
| ·在玉米不同组织中的表达模式 | 第93页 |
| ·不同处理条件下的表达模式 | 第93-94页 |
| ·玉米FtsH基因在大肠杆菌中的表达 | 第94-96页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第96-99页 |
| ·过表达载体的构建 | 第96-98页 |
| ·RNAi干扰载体的构建 | 第98-99页 |
| ·转基因烟草植株的获得 | 第99页 |
| ·转基因烟草的耐旱性分析 | 第99-101页 |
| ·讨论 | 第101-103页 |
| 第四章 玉米苗期水分胁迫消减文库的构建与玉米基因H~+-PPASE的克隆及分析 | 第103-114页 |
| ·H~+-PPase研究进展 | 第103-104页 |
| ·材料和方法 | 第104-106页 |
| ·18%PEG处理下苗期玉米叶片消减文库的构建 | 第104-105页 |
| ·玉米Ⅱ型H~+-PPase基因的克隆 | 第105-106页 |
| ·借用水稻核酸数据库电子克隆玉米基因H~+-PPase | 第105页 |
| ·RT-PCR获得基因ORF全长 | 第105页 |
| ·3′RACE方法克隆H~+-PPase的3′末端 | 第105-106页 |
| ·Southern bolt分析 | 第106页 |
| ·基因表达模式分析 | 第106页 |
| ·结果与分析 | 第106-113页 |
| ·玉米苗期消减文库的构建 | 第106-107页 |
| ·玉米Ⅱ型H~+-PPase基因的克隆 | 第107-108页 |
| ·玉米ZmGPP基因的序列分析 | 第108-109页 |
| ·玉米ZmGPP基因的Southern blot分析 | 第109-111页 |
| ·玉米ZmGPP基因的表达模式分析 | 第111-113页 |
| ·讨论 | 第113-114页 |
| 总结 | 第114-116页 |
| 参考文献 | 第116-130页 |
| 致谢 | 第130-131页 |
| 博士学习期间发表的文章及基因序列 | 第131-133页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第133-134页 |
| 附 发表论文 | 第134-156页 |
