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mRNA差异显示技术研究糙皮侧耳菌丝体及子实体差异表达基因

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
部分英文缩写说明第10-11页
1 前言第11-22页
   ·糙皮侧耳概述第11页
   ·糙皮侧耳的生活史第11-12页
   ·糙皮侧耳生长发育的条件第12-14页
     ·营养要求第12页
     ·温度要求第12-13页
     ·水分要求第13页
     ·空气要求第13页
     ·酸碱度要求第13页
     ·光的要求第13-14页
   ·mRNA差异显示技术第14-17页
     ·mRNA差异显示技术的原理第14-15页
     ·mRNA差异显示技术的优缺点第15-17页
   ·其他差异表达基因的研究方法第17-20页
     ·代表性差异显示分析技术第17-18页
     ·抑制性消减杂交第18页
     ·基因表达系列分析技术第18-19页
     ·cDNA微阵列第19-20页
   ·差异显示技术在食用菌中的研究现状及应用第20-21页
   ·本研究的目的及意义第21-22页
2 材料和方法第22-37页
   ·实验材料第22页
     ·菌株第22页
     ·培养基第22页
   ·实验仪器第22-23页
   ·实验试剂第23-26页
     ·总RNA提取及纯化试剂第23页
     ·反转录及PCR相关试剂第23页
     ·核酸电泳试剂及硝酸银染料第23-24页
     ·克隆试剂第24-25页
     ·Northern杂交试剂第25-26页
   ·实验技术路线第26页
   ·实验方法第26-37页
     ·糙皮侧耳菌丝体、原基、菇蕾、成熟子实体的培养第26页
     ·总RNA的提取第26-27页
     ·RNA的纯化第27-28页
     ·反转录第28页
     ·PCR扩增第28-29页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳及硝酸银染色第29-30页
     ·差异条带的回收纯化第30-31页
     ·差异条带的二次扩增与纯化第31页
     ·差异片断的克隆第31-33页
     ·差异片断的测序第33页
     ·序列分析第33页
     ·差异序列特异性引物反转录PCR验证第33-34页
     ·Northorn杂交分析第34-37页
3 结果与分析第37-57页
   ·糙皮侧耳菌丝体、原基、菇蕾及成熟子实体的获得与形态比较第37页
   ·RNA提取及纯化结果第37-38页
   ·PCR反应体系的优化结果第38-40页
   ·差异显示结果第40-41页
   ·差异条带回收方法比较结果第41页
   ·差异条带二次扩增结果第41-42页
   ·差异片段二次扩增后纯化结果第42页
   ·差异片段克隆结果第42-43页
   ·序列结果及同源性比对结果第43-54页
     ·12号片段(Seq1)第43-47页
     ·15号片段(Seq2)第47-51页
     ·14号片段(Seq3)第51-54页
   ·序列RT验证结果第54-55页
   ·Northern杂交结果第55-57页
4 讨论第57-64页
   ·实验材料的选择第57页
   ·RNA提取及纯化处理第57页
   ·RT-PCR扩增第57页
   ·聚丙烯酰胺电泳及硝酸银染色第57-58页
   ·差异显示凝胶的选择第58-59页
   ·差异条带的回收第59页
   ·序列同源性比对结果的分析第59-64页
     ·序列结果的分析第59页
     ·同源性比较结果分析第59-64页
5 后续实验思路第64-65页
6 结论第65-66页
发表论文情况第66-67页
参考文献第67-72页
致谢第72-73页
附录第73-76页

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